Cromatografa de lquidos

(HPLC)
Materia: Caracterizacin de materiales
Integrantes
Prof. Dr. Mizraim Uriel Flores Guerrero
Cecilia Bonilla Miranda
Damian Neri Enriquez
Karen Olivarez Garca
Lesly Sabina Villaseor Cern

Grupo: Nano51
 Introduccin
Se suele denominar HPLC (high-performance liquid chromatography), y es
una forma de cromatografa en columna que se utiliza a menudo en
bioqumica y qumica analtica.

La muestra problema es forzada a pasar a travs de una columna (fase

estacionaria) por un lquido (fase mvil) a elevada presin, lo que
disminuye el tiempo que los componentes separados permanecen en la fase
estacionaria, y por lo tanto, el tiempo de difusin dentro la columna.

En la salida de la comuna existe un detector que indica la cantidad de soluto

que est saliendo.
 Principios de la tcnica
En la cromatografa lquida, la fase mvil es un lquido que fluye a travs de
una columna que contiene a la fase fija.
La separacin cromatogrfica en HPLC es el resultado de las interacciones
especficas entre las molculas de la muestra en ambas fases, mvil y
estacionari.
A diferencia de la cromatografa de gases, la cromatografa de lquidos de
alto rendimiento no est limitada por la volatilidad o la estabilidad trmica
de la muestra.
La HPLC es capaz de separar macromolculas y especies inicas, productos
naturales lbiles, materiales polimricos y una gran variedad de otros
grupos polifuncionales de alto peso molecular. Con una fase mvil lquida
interactiva, otro parmetro se encuentra disponible para la selectividad, en
adicin a una fase estacionaria activa.
La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite
una mayor gama de estas interacciones selectivas y ms posibilidades para
la separacin.
 HPLC Preparativa
La cromatografa preparativa comprende un
amplio rango de aplicaciones, desde el
aislamiento de 1g de muestra para
identificacin espectroscpica hasta el
aislamiento de un compuesto puro de una
mezcla de 100 g.
 Aplicaciones
Frmacos: Antibiticos, sedantes esteroides, analgsicos.

Bioqumica: Aminocidos, protenas, carbohidratos, lpidos.

Productos de alimentacin: Edulcorantes artificiales, antioxidantes,

aflatoxinas, aditivos.

Productos de la industria qumica: Aromticos condensados, tensoactivos,

propulsores, colorantes.

Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB.

Qumica forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcticos.

Medicina clnica: cidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina,

estrgenos.
Aplicaciones de HPLC Preparativa
Separacin y purificacin de metabolitos.

Separacin y purificacin de los metabolitos de las

drogas procedentes de muestras de orina.

Purificacin y separacin de enantimeros.

Purificacin de compuestos naturales.

Purificacin y caracterizacin de enzimas y

protenas.
 Referencias
Ozores Belmonte, M. I. ; Cromatografa de
Lquidos: Laboratorio de Tcnicas
Instrumentales UVA, disponible en
http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/ana
lisis-qumicos/cromatografa-de-lquidos-hplc
Rosell Gloria, et al.; Operaciones bsicas en el
laboratorio de qumica-Cromatografa:
Universidad de Barcelona, disponible en
http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/in
dex.html#