Enterobacterias

Elaborado por Mblga. Claudia Clavijo Koc.

 Familia Enterobacteriaceae

Son microorganismos gramnegativos,

De forma bacilares
Tienen gran importancia qumica por su presencia
en la flora intestinal, suelo y agua.
Suelen ser responsables de numerosas infecciones
entre ellas el 35% de las septicemias (infeccin
generalizada del organismo de difcil curacin), el
70% de las infecciones del tracto urinario y las
infecciones intestinales debido en parte a su
comportamiento como patgenos oportunistas.
Enterobacteriaceae

Realizan la fermentacin de carbohidratos en

condiciones anaerbicas, en la cual pueden producir
o no gas (CO2 y H2), y son oxidadores en
condiciones aerbicas.
Pueden tener o no flagelos que en caso de existir son
peritricos.
Son quimiohetertrofos que no forman esporas.
Son oxidasa negativa.
Son anaerobios facultativos.
Enterobacteriaceae

Reducen nitratos a nitritos

Estas bacterias estn compuestos por una gran
variedad de gneros y especies.
 Fisiologa

Bsicamente pueden llevar a cabo dos tipos de fermentaciones:

Fermentacin cido mixta: es la que produce ms cidos y genera gas en
una proporcin CO2:H2 1:1. En esta va se forman los cidos actico, lctico,
succnico y frmico dependiendo de la especie y las condiciones de cultivo. Dan
positivo en la prueba rojo de metilo.
Fermentacin butanodilica. Producen como subproductos butanodiol,
etanol, lactato, succinato, acetato y gas en proporciones CO2:H2 5:1. Las
cantidades de cido producidas son insuficientes para dar positivo en la prueba
con rojo de metilo, pero s dan positivo en la prueba de VogesProskauer.
Segn la clasificacin serolgica de esta familia tienen tres tipos de antgenos:

LPS (lipopolisacrido) > O

Cpsula - > K
Flagelos -> H
PATOGENIA

Las causas mediante las cuales generan patogenia

son diferentes factores de virulencia:
Endotoxinas: componente A del LPS (despus de la
lisis)
Cpsula: proteccin frente a fagocitos y antibiticos
Exotoxinas: sustancias que liberan al medio
Supervivencia y multiplicacin dentro de otra clula
Produccin de factores de adherencia
Resistencia a antibiticos
 Bacterias patgenas transmitidas por los
alimentos

Las Enterobacterias se clasifican por su capacidad de

fermentar la lactosa.

ENTEROBACTERIAS
COLIFORMES
TERMOTOLERANTES

Escherichia coli Salmonella sp

COLIFORMES Shigella sp
TOTALES
PRUEBA DE LA GLUCOSA O LACTOSA
Coliformes Totales

La principal caracterstica de los coliformes totales es

fermentar la lactosa(produce cido lctico y gas a partir de la
lactosa), son microorganismos hetertrofos, mesfilos (crecen
entre los 30 a 37 C), halotolerantes y neutrfilos.
El anlisis de coliformes en los alimentos es un indicador de
contaminacin fecal humana o animal.
Entre los gneros bacterianos ms comunes son: Klebsiella sp,
Enterobacter sp, Citrobacter sp, Serratia sp, Aerobacter sp,
Yersinia enterocoltica, Escherichia coli.
Coliformes Termotolerantes:

Anteriormente se les denominaba coliformes fecales. Estos

microorganismos se distinguen porque son indicadores de
contaminacin fecal humana y los riesgos de que exista una
especie patgena para el ser humano aumenta. Estos
microorganismos crecen entre 42 C a 45 C, lo que los diferencia
de los otros coliformes. El 90% de los coliformes termotolerantes
pertenecen a la especie de E. coli, y otras especies del gnero
Enterobacter sp.
Escherichia coli

Esta bacteria es parte de la flora natural del ser humano,

mayora de sus cepas habitan en el intestino, sin embargo
existen serotipos patgenos como:
E. coli enteropatgena: Causa importante de la disentera en los
lactantes, esta bacteria se adhiere al intestino delgado.
E. coli enterotoxignica: Es comn la diarrea del viajero, producto
de una exotoxina termoestable.
E. coli enterohemorrgica: Esta bacteria produce una toxina que
afecta las clulas renales y tambin produce colitis
enterohemorrgicas, la cepa ms comn es la O157H7
Recuento de coliformes en alimentos
Coliformes. presuncin
Bacterias control:
Recuento presuntivo
Coliformes: confirmativo
Recuento confirmativo
confirmativa de coliformes fecales a-prueba confirmativa de coliformes fecales
Recuento confirmativo
Confirmativa deE. coli
7-comprobar si corresponden a E. 7-1- Tincion de Gram- Todos los bacilos Gram negativos deben ser :
coli:
8-Interpretacion:
Prueba presuntiva para coliformes, coliformes fecales y E. coli
-control positivo; una cepa de E. coli que produzca gases a 45 grados
-control negativo: una cepa de Salmonella berta
-1 -3
1- Seleccionar las diluciones 10 a 10
2- Inocular con 1 ml de cada dilucin (por quintuplicado) caldo lactosado (10 ml por tubo) que contiene una
campana Durham.
Caldo lactosado para el recuento de coliformes Los coliformes se definen como fermentadores de lactosa con
produccin de gases. El verde brillante y bilis incluidos en el medio inhiben el crecimiento de muchas bacterias. Se
consideran positivos los tubos que presentan turbidez y tienen gases en lacampana de Durham. Se cuenta el
nmero de tubos positivos producidos por cada dilucin y se compara con una tabla de NMP, que proporciona el
NMP de bacterias en la muestra que proporciona esa combinacin de tubos positivos y negativos en esa dilucin
3- Incubar a 35 C durante 24 horas adicionales los tubos donde no se detectaron gases
4- Estimar el nmero mas probable de coliformes totales: contar el nmero de cultivos con gases en tres diluciones
consecutivas y seguir las recomendaciones que se indican.
5- Iniciar la prueba de confirmacin de coliformes
Prueba confirmativa de coliformes
Transferir un asa o una gota de cada tubo con gases de la prueba presuntiva a caldo BRILLA, evitando en su caso
la pelcula superficial. Incubar los cultivos en BRILLA a 35C durante 48 h.
Calcular el NMP de coliformes utilizando la proporcin de tubos con produccin de gases confirmada de los tubos
seleccionados en la prueba presuntiva
o
Los coliformes fecales se determinan a 45,5 C o menos frecuentemente a 44.5 C.
1- transferir un asa o una gota de cada tubo con gases de la prueba presuntiva a un tubo de caldo EC
2- incubar a 24 h a 45.5 C y detectar produccin de gas. Si es negativo volver a determinarlo despus de 48 h.
3-calcular el NMP de coliformes fecales
B/ prueba confirmativa de E. coli
1-agitar los tubos con gases en los cultivos en caldo EC. Sembrar en estras una placa de L-ENDO, Los presuntivos
de E. coli son colonias con brillo metlico y los coliformes son de color rojo.
2-incubar 18-24 h a 35C.
4-examinar las placas con colonias sospechosas de corresponder a E. coli : con brillo metalico
5-transferir hasta 5 colonias sospechosas de cada placa a tubos inclinados de PCA
6-incubar durante 18-24 h at 35C y emplear los tubos para la idntificacin de E. coli. La identificacin de una sola
como de E. coli es suficiente para considerar el tubo con EC como positivo.
a -sometidos a las pruebas del IMViC o utilizar API20E o el sistema automatizado VITEK biochemical assay
b-volver a cultivar en caldo lactosa para confirmar la produccin de gas.
Se consideran E. coli las bacterias de todos los cultivos que (a) fermentan la lactosa con produccin de gas en 48
h a 35C, (b) son bacilos no esporulados Gram-negativos y (c) proporcionan un IMViC de ++-- (biotipo 1) o -+--
(biotipo 2).
 Coliformes

LACTOSA
POSITIVA
 Petrifilm para Coliformes totales y E. coli

http://multimedia.3m.com/mws/mediawebserver
?mwsId=SSSSSu7zK1fslxtUmx_v58_9ev7qe17zHv
TSevTSeSSSSSS--
petrifil e.coli coliformes.pdf
Mtodos Rpidos (Petrifilms)
E.coli
Salmonella

Enterobacteria bacilo gramnegativo, no fermenta la

lactosa y un gran porcentaje de sus cepas producen
sulfuro de hidrgeno, olor caracterstico al huevo podrido
Alto grado de patogencidad,.

Esta bacterias se disemina principalmente en alimentos

ricos en protenas como huevo y carnes de aves debido a
la contaminacin de heces de humanos, aves y roedores.
Salmonella

Es un gnero muy relacionado con Escherichia ya que

comparten alrededor del 50% de la secuencia de ADN pero
son casi todas patgenas de humanos y animales de sangre
caliente.
Salmonella enterica
Es una especie de la que existen ms de 1500 serotipos
distintos, en clnica se llaman con el nombre del serotipo
pues cada serotipo genera una enfermedad diferente.
Se encuentra en todos los animales: aves, reptiles, vacas,
animales domsticos.
El reservorio de Salmonella se mantiene por contacto entre
animales y por consumo de piensos contaminados.
Salmonella typhi y Salmonella
paratyphi
Se transmiten por ingestin de alimentos o aguas
manipulados por gente contaminada (higene).
Para el resto de las especies se contrae infeccin por agua o
alimentos contaminadas y en nios pequeos por
contaminacin oral-fecal.
La mayor parte de los casos son nios en la estacin clida
o que han ingerido alimentos que hayan estado al aire libre.
Los huevos, carne de ave y por productos lcteos.
Se dan ms casos por el consumo de huevos crudos o poco
cocidos porque Salmonella se encuentra en el intestino de
las gallinas.
Salmonella typhi y Salmonella
paratyphi
En USA se dan 50.000 casos todos los aos. Los ms graves
se refieren a nios pequeos y a ancianos. Para que se
desarrolle la enfermedad es necesario ingerir una gran
cantidad de Salmonella, del orden de 108 individuos
aunque en el caso de nios, ancianos, inmunodeprimidos y
personas con menor acidez en el estmago se necesita una
menor dosis.
En los meses clidos se da una mayor incidencia porque
permiten la reproduccin de las bacterias con mayor
facilidad. El tratamiento mejora con antibiticos.
 Enfermedades

Salmonellosis Enteritis: Se produce de 6 a 48

horas despus de consumir el alimento, provoca
dolor de cabeza, fiebre, diarrea y vmitos. Su
duracin es de una semana y desaparece por s
misma pues no responde a antibiticos sino que el
tratamiento es sintomtico. El problema es que
puede derivar en septicemia y puede darse en nios y
ancianos.
 Enfermedades

Fiebres tifoideas (S. tiphy) y paratficas (S. paratyphi):

son graves y su mortalidad es del 20% si no se tratan. Se
contraen por ingerir alimentos contaminados por personas.
Los sntomas aparecen despus de 10-14 das. Las bacterias
penetran en el intestino liberando LPS que provoca picos de
fiebre. Es muy importante en el Tercer Mundo. Puede
ocurrir que sean mantenidas en portadores humanos por
colonizacin asintomtica en el 1 a 5% de los casos y puede
durar hasta un ao o mucho ms. El rgano donde se
acantonan es en la vescula.
Existen muchas Salmonellas resistentes a antibiticos
porque a las aves de granja se les suelen proporcionar en
gran cantidad.
 Aislamiento en alimentos

La salmonella es una bacteria que se analiza en todos

los alimentos que son de consumo directo, todas las
normas requieren Ausencia en 25 o 100 gramos
La tcnica de aislamiento de salmonella es muy
laboriosa y requiere de experiencia para poder emitir
los resultados.
Existen medios rpidos para la deteccin de
Salmonella que reducen el tiempo de 78 h a 44 h.
Shigella

Esta bacteria es muy similar geneticamente a la Eschirichia

coli, con la diferencia que no fermenta la lactosa y no produce
gas, son hetertrofos mesfilos y neutrfilos, hay varias
especies patgenas como:
Shigella flexneri
Shigella sonei
Shigella disenteriae
Shigella boydii
La enfermedad que produce es conocida como Shigelosis, afecta
principalmente a los bebs, causando vmitos y diarreas
mucosanguinolentas provocando la muerte de los nios si no hay
un tratamiento adecuado.
 Mtodo tradicional

Enriquecimiento No selectivo
Enriquecimiento Selectivo
Siembra en medios diferenciales
Pruebas bioqumicas (TSI-LIA)
Pruebas serolgicas
 Mtodo con Petrifilm

salmonella express.pdf
LACTOSA NEGATIVA
Bacterias Gram Negativas No fermentadores
de la glucosa

Genero Pseudomonas :
Este gnero bacteriano pertenece a la familia
Pseudomonadaceae.
La principal caracterstica es que tiene metabolismo
oxidativo (son aerobias).
Muchas especies producen pigmentos fluorescentes
de color verde azulados.
Contamina agua y alimentos con alto contenido
proteico.
Pseudomonas
PSEUDOMONAS
Caractersticas de carne contaminada con
Pseudomonas fluorescens
 Familia Vibrionaceae

Es un grupo muy diverso cuya principal

caracterstica es su morfologa la cual es de forma de
comas gramnegativas, son de caractersticas muy
variadas entre ellas y algunas especies son
haloterantes y halfilas moderadas, las cuales se
desarrollan en habitas marinos. Las principales
gneros de inters son
Vibrio, Campilobacter y Helicobacter
 Gnero Campylobacter

Es un bacilo curvado gramnegativos que crece a bajas

tensiones de oxgeno, es microaerfilo, la contaminacin
normalmente es por el agua y los alimentos, causando
calambres estomacales y fiebre por encima de 40 C,
principalmente se presenta en nios, aunque estudios
recientes dan como unas de las principales causas de colitis en
paises desarrollados.
Especies
Campylobacter coli

Campylobacter fetus

https://www.youtube.com/watch?v=HaRD7qhiixQ
 Gnero Vibrio

Bacilos gramnegativos
Rectos o curvos
No esporulados
Anaerobios facultativos
Mviles por flagelos polares
Oxidasa positivos
Poco exigentes.
El sodio estimula su crecimiento, algunos halfilos (7% ClNa)
Labilidad a pH cido
Algunos capsulados
 Vibrio parahemolitycus

Es una bacteria halofila moderada, crece a concentraciones altas de sal,

se encuentra en el intestino de los moluscos. La intoxicacin se debe al
consumo de mariscos contaminados.
Principal caracterstica bioqumica: no fermenta la sacarosa.
Son mviles.
Fermentan el Manitol
 Vibrio cholerae

Es causante de la enfermedad de l clera la cual provoc varias

pandemias en el mundo, se transmite por el agua contaminada y los
alimentos.
En el Per se desarrollo una pandemia en el ao 1991-1992, matando a
miles de personas.
La enfermedad es producida por una toxina y la bacteria no ingresa al
torrente sanguneo por lo cual no produce fiebre, sin embargo las heces
son mucosas y la deshidratacin es violenta, causando la muerte en
pocas horas.
Fermenta la Sacarosa y el manito
Es una bacteria mvil.
 Helycobacter pylori

Es un bacteria que se encuentra

principalmente contaminando fuentes de
agua, soporta un pH muy bajo y se instala en
la pared del estmago, se ha demostrados que
es la principal causa de gastritis y en
ocasiones puede degenerar en cncer al
estmago