KULTUR JARINGAN

OLEH:

ASRI CAHYATI ZEBUA

1503011511
PENGERTIAN KULTUR JARINGAN

Teknik perbanyakan tanaman dengan

mengusahakan tumbuh nya eksplan pada
media buatan yang kaya akan nutrisi dan
ditambah dengan ZPT secara invitro pada
kondisi yang aseptik.
 PRINSIP DASAR DARI KULTUR
JARINGAN

1. Memahami sifat totipotensi

2. Memahami konsep Skoog dan
Miller
3. Organogenesis dan Embriogenesis
4. Kompetensi dan Determinasi
Sejarah kultur jaringan
1838
Mengemukakan teori totipotensi
yang menyatakan bahwa sel-sel
bersifat otonom, dan pada
prinsipnya mampu beregenerasi
menjadi tanaman lengkap

1902

Mengemukakan dasar dari

spekulasi, yag menyatakan
tanaman dapat diisolasi dan
dikulturkan hingga menjadi
tanaman lengkap namun
percobaan haberlandt gagal

HABERLANDT
1907-1909
Harrison, Burrows, dan Carrel
berhasil mengkulturkan
jaringan hewan secara in vitro

White berhasil
1934 mengaplikasikan kultur
jaringan sebagai sarana
perbanyakan tanaman secara
vegetatif pertama kali yaitu
melalui kultur akar tanaman
tomat

1939

berhasil menumbuhkan kalus

tembakau dan wortel secara in
vitro
 KELEBIHAN DAN KEKURANGAN
TEKNIK KULTUR JARINGAN
KELEBIHAN :
Kualitas disertai kuantitas,
seragam
Sifat tanaman sama persis
dengan induknya.
Kesehatan bibit terjamin pada
lingkungan tertentu
Keceptan tumbuh lerbih cepat
dibandngkan dengan
konvensional
KEKURANGAN:
Membutuhkan modal
ivestasi awal yang tinggi
untuk laboratorium,
peralatan dan perlengkapan.
Diperlukan persiapan SDM
yang handal untuk
mengerjakan perbanyakan
kultur jaringan agar dapat
memperoleh hasil yg
memuaskan
Tanaman kultur jaringan pd
akarnya kurang kokoh
 SARANA DAN PRASARANA
laboratorium kultur jaringan

Ruangan kultur jaringan terdiri dari 6

ruangan yaitu :

Ruang Persiapan
Ruang Transfer
Ruang Kultur
Ruang Stok
Ruang Timbang
Ruang aklimatisasi
 Media Kultur Jaringan

Medium kultur jaringan atau kultur in vitro

dapat berupa medium padat atau cair.
Medium ini terdiri atas :
- garam-garam anorganik berupa unsur hara
makro maupun mikro
- zat organik seperti vitamin, karbohidrat (gula),
zat pengatur tumbuh, myo-inositol, dan asam-
asam amino
- agar (untuk media padat)
 Unsur hara makro

Senyawa unsur makro yang sering dipakai pada

beberapa medium dasar,antara lain:
KNO3 NH4H2PO4
NH4NO3 MgSO4.7H2O
Ca(NO3).4H2O NaH2PO4.2H2O
NaNO3 CaCl2.2H2O
KCl KH2PO4
Na2SO4 (NH4)2SO4
NH4Cl
 Unsur Hara Mikro
Unsur mikro seperti : Cl, B, Mo, Mn, Cu, Fe, Zn, dan Co
diperlukan dalam jumlah sedikit
Senyawa mikronutrient yang sering dipakai adalah sbb :
MnSO4.4H2O MnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O H3BO3, KI
CuSO4.5H2O NaMoO4.2H2O
CoCl2.6H2O FeCl3.6H2O
FeIII citrate F eSO4.7H2O
NaFeEDTA Na2EDTA.2H2O
Fe(SO4)3 FeIII tartrate
 Zat Pengatur Tumbuh
Zat pengatur tumbuh yang sering digunakan untuk
kultur jaringan yaitu Auksin dan Sitokinin
Auksin yang sering digunakan adalah :
2,4-D, IAA, NAA, dan IBA

2,4-D paling efektif utk menginduksi pembelahan sel dan

pembentukan kalus
NAA dan 2,4-D lebih stabil dibandingkan IAA, yaitu tidak
mudah terurai oleh enzim-enzim yg dikeluarkan oleh
sel atau karena pemanasan pada saat proses sterilisasi
IAA : mudah rusak oleh cahaya dan oksidasi ensimatik
Sitokinin : berperan dlm pengaturan pembelahan sel dan
morfogenesis, contoh nya kinetin, ziatin, benzilaminopurine (BAP)
Beberapa macam media dasar yang sering
digunakan dalam Kultur Jaringan

1. MS (Murashige dan Skoog)

2. B5 atau Gamborg
3. White
4. VW (Vacin dan Went)
5. Nitsch dan Nitsch
6. Schenk dan Hildebrant
7. WPM (Woody Plant Medium)
 LARUTAN STOK

Larutan stok adalah larutan dalam bentuk pekat

(biasanya 100x konsentrasi).
Larutan stok antara lain: unsur hara mikro, hormon,
vitamin, iron (besi), zat pengatur tumbuh.
 Tahapan-tahapan kultur jaringan

1. Pemilihan Eksplan

Ada tiga aspek yang harus diperhatikan

dalam seleksi bahan eksplan yaitu
Genotip
Umur
Kondisi fisiologis
2. Inisiasi Kultur/culture establisment.
Tujuan utama dari propagasi secara in-vitro
tahap ini adalah pembuatan kultur dari eksplan
yang bebas mikroorganisme serta inisiasi
pertumbuhan baru.

Masalah yang sering dihadapi pada kultur tahap

ini adalah terjadinya pencokelatan atau
penghitaman bagian eksplan (browning).
 3. Multiplikasi atau Perbanyakan
Propagul
Tahap ini bertujuan untuk menggandakan bahan
tanaman yang diperbanyak seperti tunas atau
embrio serta memeliharanya dalam keadaan
tertentu sehingga sewaktu-waktu bisa
dilanjutkan untuk tahap berikutnya.
Subkultur dapat dilakukan berulang-ulang kali
sampai jumlah yang kita inginkan.
4. Pemanjangan Tunas, Induksi, dan
Perkembangan Akar/ Praaklimatisasi
Tujuan dari tahap ini adalah membentuk akar dan
pucuk tanaman yang cukup kuat agar dapat
bertahan hidup saat dipindahkan dari lingkungan
in-vitro ke lingkungan luar.
Media untuk pemanjangan tunas mengandung
sitokinin sangat rendah atau tanpa sitokinin
Pengakaran tunas in-vitro dapat dilakukan dengan
memindahkan tunas ke media pengakaran yang
umumnya memerlukan auksin seperti NAA atau
IBA.
 5. Aklimatisasi
tahap aklimatisasi planlet merupakan salah
satu tahap kritis yang sering menjadi kendala
dalam produksi bibit secara masal.
Pada tahap ini, planlet atau tunas mikro
dipindahkan ke lingkungan di luar botol
seperti rumah kaca , rumah plastik, atau
screen house (rumah kaca kedap serangga)
.
 FAKTOR YANG MEMPENGARUHI
KEBERHASILAN KULTUR JARINGAN

Seleksi eksplan , mencakup : Genotip , umur

tanaman , jenis tanaman
Sterilisasi bahan eksplan dan alat
Media Kultur
Komposisi media, zat pengatur tumbuh,
media yg digunakan padat/cair
Faktor Lingkungan : pH medium, suhu,
kelembaban, cahaya
 Daftar Pustaka

Hartman et al.1990.Plant Propagation Principles

and Practices.Prentice-Hall,inc.,Upper Saddle
River New Jersey.USA
Yuliarti,N.2010.Kultur Jaringan Tanaman.Lily
Publisher.Yogyakarta
Zulkarnain.H, 2009.Kultur Jaringan
Tanaman.Bumi Aksara.Jakarta