O Antigo Dogma Central

Transcriptase Reversa

Virus com material genmico de RNA

 Histrico
Mendell: hiptese estatstica sobre hereditariedade ...

(Grifith F., 1928) (Avery, MacLeod e McCarthy, 1943)

Princpio transformante DNA , o princpio transformante

Desoxiribonucleotdeos que compem o DNA

Purinas Pirimidinas
Ligaes fosfodiester ligam
os sucessivos nucleotdeos.
 Estrutura DNA

Regra de Chargaff: contedo de A = T; C = G.

Rosalind Franklin: pistas sobre a estrutura do DNA.

DNA visto por difrao de raio X

Watson e Crick (1953) foram os primeiros cientistas a descrever a estrutura do DNA.
 Estrutura

Purinas e Pirimidinas
A = T / C G
Fitas Antiparalelas
 Duplicao ou Replicao do DNA

Qual o sentido da vida (da sntese de 5 3

DNA ou do DNA nascente )?

Pirofosfato
 Etapas da Replicao do DNA

1. As DNA-Helicases separam a dupla fita e mantm as fitas abertas

com o auxlio das protenas de ligao ao DNA fita-simples (Single
Strand DNA Binding Protein -SSB- em ingls).

2. As Girases (procariotos) ou Topoisomerases (eucariotos) do um

pequeno corte na fita de DNA desfazendo um giro e em seguida
religa a fita quebrada

3. A Primase usa ATP, UTP, CTP e GTP para sintetizar a fita de RNA
iniciador (primer).
4. A DNA Polimerase III adiciona nucleotdeos a extremidade 3 da
cadeia de DNA crescente.

5. A DNA Polimerase I troca os ribonucleotdeos colocados pela

primase por desoxinucleotdeos e faz a reviso dos erros.

6. A DNA Ligase junta os fragmentos de Okasaki.

 3
Duplicao DNA 5

Fragmentos de Okazaki 5
Duplicao DNA
 Vdeo
DNA Replication Process.flv
 Fita tardia (Lagging Strand)

3
3 5

5
3 5

3
3
5

5
 Vdeo
Molecular Visualization of DNA.flv
 Origens de Replicao
- Autonomous Replication Site (ARS) em S. cerevisiae 50bp.
- Forquilhas de Replicao tem de 40 100 kb

- Origin Replication Complex (ORCs) Levedura, Xenopus, Drosophila,

Plantas, Mamferos Regies de ligao s caracterizadas em levedura

- Clulas de Mamferos - Poderiam se dividir em 1 hora mas se dividem em

6 horas (apenas 15% das origens ativas de cada vez)
 - Procariotos - apenas 1 origem de replicao

- Velocidade de DNA Polimerase (2kb/min eucarioto x 50kb/min procariotos)

No o faz correo!!
 Compactao
Ligando os Cromossomos cerca de 2
metros de DNA estendido (Humano tem 23
pares)
Nucleossomos: Tem uma rea central de
histonas e envolto pelo DNA

Histonas (4 pares) Organizao do DNA

Nvel de compactao papel na regulao
gnica
Morfologia: Eucromatina vs heterocromatina
 Telmeros

The Nobel Prize in Physiology

or Medicine 2009
"for the discovery of how chromosomes are
protected by telomeres and the enzyme
telomerase"
 Reparo de DNA

Alteraes em protenas ou RNAs no so herdadas,

mas alteraes no DNA sim.

Mudana permanente na sequncia de nucleotdeos

do DNA chamada de mutao.

Para prevenir mutaes as clulas possuem

diversos sistemas de reparo de DNA.

Durante a replicao, a prpria DNA polimerase

capaz de reconhecer um erro e corrigi-lo o que
aumenta a fidelidade deste processo.
-Reparo de pareamento errado

C
-Reparo por Exciso de Bases

Reconhecimento do dano ao DNA

Remoo da parte danificada
Correo baseada na fita
complementar
-Reparo por Exciso de Nucleotdeos

Reconhecimento do dano ao DNA

Remoo da parte danificada
Correo baseada na fita complementar
-Reparo de quebra de dupla-fita

Quebra da dupla-fita do DNA

Reconhecimento
Pareamento das cromatides irms
Reparo do DNA danificado
Mutaes e Reparo no DNA

Existem diferentes tipos de mutao no DNA:

1. Substituio de nucleotdeos:

2. Deleo de nucleotdeos;

3. Insero de nucleotdeos.
 Agentes mutagnicos

Anlogos de nucleotdeos.

Ex: 5-bromouracila, 2-aminopurina.

cido nitroso (HNO2): reage com bases que contm aminas.

Molculas que se intercalam no DNA:

Ex: acridinas, brometo de etdio.

Compostos que so transformados em mutagnicos altamente ativos

pela ao de enzimas que normalmente atuam na desintoxicao.

Ex: aflatoxina B1.

Luz ultravioleta: liga por covalncia pirimidinas adjacentes ao longo de um

filamento de DNA.

Espcies reativas de oxignio (radicais livres): radical hidroxil,

superxido, etc...

Radiaes ionizantes: raio X, radiao, outras ondas eletromagnticas, ...

 Substncias mutagnicas

Aflatoxina Benzopireno

Presente no amendoim Presente no cigarro

Intercalantes de DNA!
/
Defeitos no reparo de DNA podem causar cncer!!!
- Cncer de pele em pacientes com xeroderma pigmentosum:
Pele extremamente sensvel luz solar;
O cncer de pele em geral se desenvolve em vrios locais e
muitos pacientes morrem antes dos 30 anos por metstases
destes tumores malignos de pele;
Esta doena pode ser produzida por um defeito em uma enzima
que repara dmeros de pirimidina, entre outros genes;
- Cncer colo-retal sem polipose hereditrio (HNPCC):

causado pelo reparo defeituoso de mau pareamento no

DNA, principalmente devido a mutaes em 2 genes: hMSH2 e
hMLH1.
Mutaes nesses genes levam ao acmulo de mutaes em todo
o genoma, inclusive em genes importantes no controle da
proliferao e morte celular.
 Telmeros

The Nobel Prize in Physiology

or Medicine 2009
"for the discovery of how chromosomes are
protected by telomeres and the enzyme
telomerase"