Aplicaciones de la

ingeniera enzimtica
Instituto Politcnico Nacional
Unidad Profesional Interdisciplinaria de Ingeniera
Campus Guanajuato.
(UPIIG-IPN)

Alumnos:
Susette Paola Daz Barajas
Edder Fuentes Cervantes
Juan Martn Cervantes Rodriguez
Flavio Cesar Snchez Medina
Ftima del Carmen Gutirrez Fonseca

Unidad de aprendizaje: Ingeniera Enzimtica.

Docente: Juan Manuel Salgado Romn
Silao de la Victoria, Gto. a 20 de Mayo del 2016.
 INMOVILIZACIN DE CLULAS

Garca Garibay, Quintero Ramrez , & Lpez-Munguia Canales,

(2004), mencionan que el trmino bioconversin se aplica en el
contexto de procesos en donde se realiza la transformacin de una
molcula precursora en otra diferente, mediante una serie de
reacciones enzimticas.

Para Leuenberger, una biotransformacin se puede llevar a cabo

por diferentes mtodos en donde uno de los principales es
mediante es el uso de clulas inmovilizada. Aqu es necesario
producir las clulas en un medio apropiado, para despus
separarlas e inmovilizarlas.
La ubicacin fsica de clulas en un espacio o regin especfica,
de forma natural o inducida, en la cual son capaces de
mantener una actividad cataltica deseada.
Permite la operacin de biorreactores a velocidades de flujo que
son independientes de la velocidad de crecimiento empleadas.
Tcnicas de Inmovilizacin
La inmovilizacin combina la actividad elevada y especfica de las
enzimas o clulas, con la estabilidad qumica y mecnica del
soporte.
Consiste en mantener la biomolcula unida o atrapada en un
soporte fsico, conservando su actividad cataltica y permitiendo el
flujo de sustratos y productos.
Las enzimas pueden ser inmovilizadas en sustratos naturales y/o
sintticos por medios qumicos o fsicos y pueden adems ser
encapsuladas mecnicamente la adicin de agentes que formen
una pelcula protectora alrededor de la enzima inmovilizada,
permitiendo el paso de reactivos y productos de pequeo tamao,
pero no de protenas (Heering et al., 2004; Wang y Caruso, 2005).
Los mtodos de inmovilizacin de clulas ms usados son:

Autofloculacin (Verstrepen y Klis, 2006; Stewart y Russel, 1986),

Adsorcin sobre soportes (Bardi et al., 1996)
Incorporacin de levaduras en matrices slidas.
 Enzimas

Modificadas Nativas

Enzimas
inmovilizadas

Incluidas Enlazadas

Matriz Adsorcin

Cpsula Enlace
covalentes
Propiedades de las enzimas inmovilizadas

Los efectos de la inmovilizacin sobre la actividad de las enzimas

resultan de la interaccin de diferentes factores:

a)Modificaciones de la estructura.
b)Modificaciones del microambiente.
c)Fnomenos difusionales en el interior del complejo.
d)Impedimentos estricos.
Aplicaciones de las clulas libres

Los procesos de fermentacin con clulas libres son pocos usados,

ya que presentan problemas como:

Baja concentracin de producto.

Alta concentracin de sustrato a la salida.
Baja productividad volumtrica.
Riesgos de contaminacin.
Dificultad de purificacin de clulas.

Pez E. Vanessa. (2010).

Aplicaciones de las clulas libres

Fermentacin para produccin de bebidas.

Manipulacin fcil y no requiere esterilizacin.

Exceso de biomasa al trmino del proceso.
Limitacin del rendimiento del medio de cultivo.
No es econmico.

Pez E. Vanessa. (2010).

Aplicaciones de clulas libres

Tratamiento de aguas residuales a partir de cultivos de microalgas

(eliminacin de N y P).

Gasto de energa.
Menor obtencin de biomasa en comparacin con clulas
inmovilizadas (biofilm).
Puede ser en sistemas cerrados o abiertos.

Fernndez Jess, et al. (2014)

Aplicaciones de las clulas inmovilizadas

Aplicaciones en la industria alimentaria.

Aplicaciones en la Medicina Moderna.

Soluciones Medioambientales con enzimas

y celulas inmovilizadas.

Aplicaciones en el campo de

Agricultura Sostenible.
Principales funciones

El aumento de la estabilidad de la enzima.

La posible reutilizacion del derivado.
Mayor resistencia al dao mecnico.
Mayor resistencia a condiciones qumicas desfavorables.
Biosensores.
Control reaccin.
Industria Alimentaria

Produccion de bebidas alcoholicas.

Celulas inmovilizadas en la industria lechera.
Biotransformacion de varios tipos de alimentos.
Preparacion y uso de probioticos.
Produccion de aromas encapsulados.

(Leticia Romero Cedillo, 2014)

Aplicaciones en la medicina moderna
Ingenieria de tejidos.
Biosensores.
Microencapsulacion para tratamientos de enfermedades.
Terapias con enzimas, celulas y medicinas
microencapsuladas.

(Leticia Romero Cedillo, 2014)

Ingeniera en tejidos: Clulas inmovilizadas
El proceso comienza con la construccion de un andamio a
partir de fuentes, desde proteinas hasta plasticos.
Se introducen las celulas, que forman y secretan sus propias
estructuras de soporte, llamadas matriz extracelular y se
obtiene un nuevo organo.

Otro metodo para crear un tejido nuevo utiliza un andamio

existente. Las celulas de un organo donado se desprenden
y el andamio de colageno restante se usa para crecer un
tejido nuevo con clulas compatibles al cuerpo que las
necesita.

(NIBIB, 2013)
Biosensores de clula entera
Estos biosensores son bsicamente potenciomtricos o amperiomtricos, pero tienen una lenta
respuesta caracterstica y a menudo responden a un amplio espectro de sustratos.

(L.M. Walker)
 Soluciones medioambientales

Remediacion de suelos degradados y contaminados.

Control de contaminaciones del aire.
Tratamiento de aguas residuales y/o contaminadas.

Tratamiento de residuos agro-industriales.

Estropajo de Luffa.

(Barragn, B. 2008)
Agricultura sostenible

Bioproduccion de fertilizantes.
Formulaciones de inoculantes
microbianos.

Preparacion de semillas artificiales.

(Yoav Bashan)
Formulaciones en polimeros: encapsulan las celulas vivas y
protegen a los microorganismos contra estreses ambientales;
adicionalmente, cuando los polimeros son degradados por los
microorganismos del suelo, se liberan de manera gradual pero
en grandes cantidades, usualmente cuando la semilla germina y
emerge la plantula.

A partir de un explanto, se pueden establecer cultivos de clulas

para producir compuestos de inters, o para obtener embriones
somticos y semillas artificiales, entre mltiples aplicaciones.

(Yoav Bashan)
Problemas de difusin con clulas inmovilizadas
La inmovilizacin de clulas presenta grandes desventajas, en
donde las ms importantes son los posibles problemas de difusin
de nutrientes y productos a travs de la matriz porosa y la pobre
resistencia mecnica de los soportes slidos.
Los biorreactores que operan de manera continua y en los que
se utilizan clulas inmovilizadas para la obtencin de productos,
se deben prevenir desde el diseo algunos problemas como:
Asegurar la adecuada difusin de sustrato y oxgeno.
Perfecto mezclado para una transferencia de masa adecuada.
Problemas de difusin con clulas inmovilizadas

Una deficiente difusin en un biorreactor puede deberse a:

Velocidad de flujo.
Difusin a travs del gel empleado para la inmovilizacin.
Tamao de la clula.

Martnez T. M., Garca R. M. (2011)

Constantes cinticas con clulas inmovilizadas

El estudio de las constantes cinticas es de gran importancia ya

que debido a la inmovilizacin puede producirse un cambio
conformacional en la enzima y por lo tanto verse alterada la
afinidad entre la enzima y el sustrato (Chibata, 1978).
 Constante de Michaelis-Menten
En varios casos se ha observado que el cambio producido en el
valor de Km, debido a la inmovilizacin ha sido pequeo o nulo,
dependiendo no solo del mtodo de inmovilizacin empleado
sino tambin del sustrato ensayado.
Velocidad Mxima de reaccin

Es la velocidad que se alcanza cuando todo el sustrato esta

unido a la enzima.
Bibliografa y referencias
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2016, de http://farmacia.ugr.es/ars/pdf/125.pdf
Barragn, B. (2008). Inmovilizacin microbiana: Tcnicas y usos en el tratamiento de residuos txicos. Recuperado el 3
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Colombia.
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Garcia Garibay, M., Quintero Ramirez , R., & Lpez-Munguia Canales, A. (2004). Biotecnologa alimentara. Mxico,
D.F.: Limusa.
Leticia Romero Cedillo, C. M. (2014). Aplicacin de enzimas inmovilizadas. Revista Cientifica de la Universidad
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Martnez T. M., Garca R. M. (2011). Aplicaciones ambientales de microorganismos inmovilizados. Revista Mexicana de
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