Fitoqumica Compuestos fenlicos

QF.Daniel aez del pino.

2014
 FITOQUMICA
Muchas plantas son usadas por sus poderes curativos desde
tiempos inmemoriales, conocimiento recogido por la
etnobotnica, etnofarmacologa, la medicina tradicional o
folklrica, el uso popular, conocimientos que son transmitidos
de padres a hijos, generacin tras generacin.

Las plantas medicinales son utilizadas para aliviar diversos

males, el avance de la ciencia y diversas tcnicas modernas a
nuestro alcance, nos permite realizar y desarrollar
investigaciones para validarlas cientficamente.
Las plantas medicinales deben su efecto teraputico al contenido de
metabolitos primarios (azcares y aminocidos) y/o metabolitos secundarios
o productos naturales (alcaloides, flavonoides, terpenoides, esteroides,
quinonas, etc.) que se generan por rutas biogenticas determinadas.

Explicando cientficamente las bondades que se atribuyen a nuestras

plantas medicinales, nos conducirn a la produccin de fitomedicamentos de
probada eficacia teraputica, con bioseguridad, evitando contraindicaciones
e interacciones no deseadas con otras especies vegetales y
con otros medicamentos sintticos.
Para estudiar cientficamente plantas medicinales,
necesitamos la contribucin multidisciplinaria de
botnicos, agrnomos, qumicos, farmaclogos,
mdicos, patlogos, toxiclogos, microbilogos,
antroplogos, socilogos, etc.
ESTUDIO FITOQUMICO DE PLANTAS
MEDICINALES

Estudio Etnobotnico y Etnofarmacolgico

Ubicacin y recoleccin

Clasificacin Taxonmica
Preparacin de la muestra

Seleccin de rganos
Estabilizacin y Estandarizacin
Molienda y Almacenamiento

Determinacin de estndares de
calidad y especificaciones
Mtodos y Tcnicas de extraccin de
Metabolitos Secundarios:
Infusin
Cocimiento
Maceracin hidroalcohlica
Percolacin
Extraccin continua por Soxhlet
Extraccin a Reflujo
Extraccin por Arrastre de Vapor
Extraccin por cambio de solventes, etc.
 ESQUEMA GENERAL DE EXTRACCIN

100 g MP en polvo

Maceracin alcohlica x 7 das

Solucin Etanlica

Concentrar

Extracto Etanlico

Marcha Ensayos
Marcha de Solubilidad Fitoqumica Biolgicos Tcnicas
Cromatogrficas

Metabolitos
Solventes de Polaridad Secundarios Cantidad y tipo de
Creciente Metabolitos Secundarios

Elucidacin Estructural

UV-Visible
Ensayos Clnicos RMN-H1 ; RMN-C13
CG-EMS
 MARCHA DE SOLUBILIDAD

30 mg de Extracto

10 mL 10 mL 10 mL 10 mL 10 mL 10 mL 10 mL
Et-O-Et n-Hex CHCl Butanol Etanol Metanol H2O
3
 MARCHA FITOQUMICA

Permite determinar cualitativamente los principales

grupos de constituyentes qumicos de la planta,
orientndose las extracciones o el fraccionamiento de los
extractos.
 Ensayos cromatogrficos

Cromatografa en Capa Fina analtica

Cromatografa en Columna Rpida (CCR)
Cromatografa en Columna Abierta (CCA)
Cromatografa en Capa Delgada a escala preparativa
(CCD preparativa)
Cromatografa de gases (CG)
Cromatografa Lquida de Alta Presin y diferentes
polaridades (HPLC, MPLC, LPLC)
CROMATOGRAFA EN CAPA FINA ANALTICA
(CCF)

Es una aplicacin especial de la cromatografa de

adsorcin, en la cual se utiliza una capa fina de
adsorbente soportada encima de una superficie
plana, generalmente de vidrio.

El desarrollo del cromatograma se consigue por el

movimiento capilar ascendente del disolvente a
travs de la capa fina de adsorbente.
.
 CROMATOGRAFA EN CAPA FINA
ANALTICA

P MP P MP
 CROMATOGRAFA EN COLUMNA
RPIDA (CCR)

columna bomba de vacio

cromatografica metanol
(silica gel para
C.C.)

fraccin
metanlica
CROMATOGRAFA EN COLUMNA ABIERTA
(CC)
CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA A
ESCALA PREPARATIVA CROMATOGRAFA DE GASES

Cromatografa gas - lquido es uno de los

mtodos ms eficaces con que cuenta un
analista. Presenta un gran uso dentro de
los estudios de estabilidad y es de gran
importancia cuando se trabaja con
productos naturales.
Tambin HPLC.
Elucidacin Estructural de Metabolitos
Secundarios aislados

Espectroscopia UV-visible
Espectroscopia IR
Espectroscopia RMN-H1
Espectroscopia RMN-C13
Espectroscopia 2D RMN
Cromatografa de Gases acoplada a Espectrmetro de Masas
(CG-EMS)
 Espectrofotometra UV
Es ampliamente usado por requerir slo pequeas cantidades del compuesto
Puro, el cual no se destruye. El espectro UV de un flavonoide se relaciona con
su estructura de la siguiente manera:

En general: Banda I 300-400 nm. Banda II 240-285 nm.

Flavona y flavonol: 320-350 nm. Intensa
Isoflavona: hombro 245-270 nm. Intensa
Flavanona y Dihidroflavonol: hombro 270-295 nm. Intensa
Chalcona: 340-380 nm. Intensa
Aurona: 370-430 nm. Intensa
Antocianinas: 480-550 nm. Intensa
 Uso de reactivos de desplazamiento

Actividad biolgica de los flavonoides

Poseen efectos antiinflamatorios y antialrgicos, propiedades

antitrombticas y vasoprotectoras, inhibe la formacin de
tumores y como protectores de la mucosa gstrica.
Los flavonoides tambin poseen actividad antioxidante,
antibacteriana y antifngica.
Ensayos biolgicos preclnicos

Screening Farmacolgico
Toxicidad CL50
Ensayo de Citotoxicidad
Ensayos Farmacolgicos in vitro , in vivo
Ensayos Toxicolgicos: aguda, subcrnica y
crnica
Ensayos Microbiolgicos
Estudios clnicos

Indicaciones y efectos secundarios

Contraindicaciones, advertencias y
precauciones
Compuestos fenlicos
 FENILPROPANOIDES
Un grupo de derivados del fenilpropano distribudos en
Lamiaceae, Oleaceae, Asteraceae, entre otros, localizados
en la mayora de los tejidos vegetales, son los steres fenil
propanoicos , constitudos por un radical cinamoil y
uno hidroxifeniletanol, unidos por lo general a beta glucosa
mediante enlace ster C-4 y ter C-1. Otros azcares como
rhamnosa, xilosa o arabinosa pueden unirse a los carbonos
C-3, C-4 C-6 de la molcula de glucosa.
Las plantas incrementan la sntesis de fenilpropanoides como defensa frente a
herbvoros, proteccin ante el ataque de microorganismos o cuando aumentan
los niveles de radicales libres por estrs medioambiental, elevada luminosidad,
radiacin UV, bajas temperaturas, infecciones por patgenos, dficit de
nutrientes, sequa, exposicin a ozono, etc.

A partir de fenilpropanoides sencillos se sintetizan flavonoides, cumarinas,

lignanos, estilbenos, psoralenos, pterocarpanos, taninos, que tambin
responden al estrs oxidativo.
Los fenilpropanoides tienen actividad antirradicalaria frente a los aniones
superxido, hidroxilo.

Presentan como acciones farmacolgicas antiinflamatoria, protectora de

membranas, cicatrizante, y sobre todo, quimiopreventiva y antitumoral.
Ejemplos de fenilpropanoides
Clasificacin de los compuestos fenlicos
 Flavonoides
Constituyen el grupo ms amplio de los compuestos fenlicos
naturales, se encuentran tanto en estado libre como glicosidados,
dan los colores a flores y hojas (amarillo, azules, rojos). Del latn
flavus=amarillo.
ESTRUCTURA QUMICA
Comprende un anillo A derivado de la cadena policetdica, un anillo B
derivado del cido shikimico, tres tomos de carbono de la parte
alqulica del fenilpropano que unen los anillos A y B.
Los flavonoides con azcares forman O-glicsidos en 3,7,3 y 7
Tambin C-glicsidos en C6, C8

Piper ossanum
BIOSNTESIS DE FLAVONOIDES
FLAVONOIDES
FLAVONOIDES
 Los flavonoides constituyen el grupo ms amplio de los derivados
fenlicos tipo C6-C3-C6, biosintetizados a travs de rutas mixtas que
combinan la via del cido shikimico y de los polictidos.
Confieren resistencia a enfermedades bien como antimicrobianos
antifngicos. Protegen a las plantas del ataque de los insectos y
herbvoros.
Actividad farmacolgica, como venotnicos o vasoprotectores,
hipotensores, hipocolesterolmicos, antibacterianos. Antiinflamatorios y
sobre la respuesta inmunitaria. Quimiopreventivo y antitumoral, son
antioxidantes ya que reaccionan con el exceso de radicales libres, por lo
que son antimutagnicos.
Se ha encontrado una relacin entre el tipo de flavonoide y su actividad
antioxidante, as, es importante la presencia de OH en C-3, grupo ceto en
C-4 y el doble enlace entre C-2 y C3.
Se comportan como inductores de apoptosis y diferenciacin celular e
inhibidores de la mitosis.
 Aislamiento e identificacin de flavonoides

Los flavonoides por lo general en las plantas estn

glicosidados, por lo que se aislarn solubilizndolos en
solventes polares como el agua, etanol o metanol; las
geninas en cambio son solubles en ter de petrleo,
diclorometano o en cloroformo.
Determinacin de la estructura
Si tenemos un glicsido debemos identificar la genina
y tambin los azcares. Hidrolizamos y los azcares se
identifican por RMN, la genina por RMN y por
espectrofotometra UV-VIS.
 Luteolina

Ensayos farmacolgicos para demostrar actividad:

Antiangiognica y antimetasttica, Antiestrognica-
estrognica, Antiinflamatoria, Antimutagnica,
Antioxidante, Citotxica, Genotxica,
Inmunoestimulante, Proapopttica, Regulacin del
ciclo celular e inhibicin de seales mitgenas.
 Flavonoide
Luteolina 7-O-beta-glucosido

Ensayos farmacolgicos para demostrar actividad:

Antiinflamatoria, Antioxidante, Antimutagnica, Citotxica,
Genotxica, Hepatoprotectora, Inmunomoduladora, Regulacin
del ciclo celular e inhibicin de seales mitgenas.
 Flavonoide Flavonoide
Quercetina Rutina

Ensayos farmacolgicos para demostrar actividad: Antiangiognica y

antimetasttica, Antiestrognica- estrognica, Antiinflamatoria,
Antimutagnica, Antioxidante, Citotxica, Proapopttica, Regulacin del
ciclo celular e inhibicin de seales mitgenas. Coadyuvante en
quimioterapia y en multirresistencias.
 Antocianinas
Son pigmentos rojos y azules de las
flores, tienen caractersticas
especiales, muy solubles en agua.
Son heterosidos y derivan de las
agliconas llamadas antocianidinas,
derivadas de 2 fenilbenzopirilo.
Antocianinas y antocianidinas
Antocianinas y antocianidinas
 Plantas que contienen flavonoides
Plassiflora incarnata L. (passiflora), es un arbusto, contiene flavonoides,
cidos fenlicos, glicsidos, cumarinas y alcaloides indlicos. Flavonoides:
flavon di C-glicsidos, shaftsido, inoshaftsido, glicsidos de isovitexina
e iso orientina.
Citrus aurianthus, sus frutos contienen citroflavonoides, abundan
en el pericarpio, principalmente como glicsidos, hesperidina o hesperetin-7
O-rutinsido; neohesperidina; naringenina; eriodyctina; eriocitrina; diosmina y
rutina.

Werneria dactylophylla, arbustos

pequeos que contienen en gran
proporcin: rutina, quercetina,
hesperidina, adems de
cumarinas.
 RUTA BIOGENETICA DEL SHIKIMATO Y DEL ACETATO
COOH COOH
COOH

COOH
COOH NH2
OH OH

HO OH
L-Phen cido Ac (E) o-cumrico Ac (z) o-cumrico
OH
cido COOH cinmico
Shikmico NH2 Cumarinas

cidos Fenlicos
L-Tyr
OH
Derivados del
Derivados del
c. cinmico, C6C3
c. benzoico, C6C1
Fenoles simples, C6 COOH COOH
COOH COOH
OH OH
HO OH OH OH

HO OH
Lignanos
Pirogalol Catecol Ac. saliclico OH OH
OH OH
Taninos Ac. glico
Ac. Ac. cafeico
condensados Antocianinas p-cumrico
+
Flavonoides, O Taninos
C6C3C6 hidrolizables

O O
Ruta
Acetato

O
Ruta Shikimato
 ANTOCIANOSIDOS

Catin flavilio: 2
fenilbenzopirilio.
El nmero de hidroxilos del
anillo B esta relacionado con
el color:
la pelargonidina con un
hidroxilo color rojo.
La cianidina con 2 hidroxilos
color granate
La delfinidina con tres
hidroxilos color lila
ANTOCIANOSIDOS
GRACIAS