UNIVERSIDAD PRIVADA TELESUP

FACULTAD DE SALUD Y NUTRICION

MEDICINA HUMANA

BIOQUIMICA

MC. LUIS PALMA GARCIA

 LUIS PALMA GARCIA

• Médico Cirujano
Universidad Nacional de Piura - CMP N° 36552

• Especialidad : Patología Clínica

Universidad Nacional Mayor de San Marcos - RNE N° 24206

• Auditor Médico - RNA N° 5398

• Maestría en Administración de Servicios de Salud

Universidad Nacional Federico Villarreal

• Actualmente: Hospital Nacional Dos de Mayo

• Miembro : Sociedad Peruana de Patología Clínica

Sociedad Americana de Aféresis

Universidades : Universidad Nacional Mayor de San Marcos ( actualmente )

EX DOCENTE Universidad de San Martin de Porres
Universidad Cientifica del Sur
Universidad San Juan Bautista
Universidad Arzobispo Loayza
BIOQUÍMICA : IMPORTANCIA MÉDICA

Ciencia dinámica
Aprovechamiento de alimentos
Síntesis de proteínas
Contracción muscular
Hormonas
Patologías : diabetes, anemia,
hipertensión
Esquemas metabólicos
Procedimientos de estudio :
centrifugación, cromatografía.
 Bioquímica: ciencia dinámica
• “ es la ciencia que estudia las estructuras
químicas de las células y los tejidos, así
como las modificaciones que ocurren en
las mismas dentro del organismo” Thomas
Devlin

• Eso último, es lo que llamamos y enten-

demos como metabolismo.
• Etimológicamente es la ciencia que
estudia las bases bioquímicas de la vida.
 Aprovechamiento de alimentos
• Carbohidratos y grasas
principalmente, y sólo
proteínas por nece- Páncreas
sidad, son utilizados Glucógeno
Glucosa
como generadores de Glucosa Láctico
energía y eventual-
mente como sustancias Amino a. acetónicos
acidos
de reserva. VLDL
Ác. grasos
• Los alimentos pueden
Grasa
también originar
triglicéridos
proteínas
estructurales,
depósitos grasos y
glucógeno de reserva.
 Síntesis de Proteínas
• La estructura básica del
organismo es eminen-
temente proteica. RNAm
RNA
ribosoma
• La síntesis de proteínas
es función fundamental codones
aminoácidos
de cada célula.
• También se sintetizan
proteínas que son hor-
monas, anticuerpos,
neurotransmisores,
enzimas, transportadores
y otros componentes
básicos. proteína
 Contracción muscular
músculo
• El fenómeno de la
contracción muscular
comprende:
– Aprovechamiento
fibra
energético: creatina
fosfato, ATP.
– Unión de filamentos
de actina y miosina miofibrilla
– Otras proteínas,
tropo-miosina,
troponinas T, I y C.
– Función reguladora filamento
del calcio.
actina
miosina
 Hormonas insulina

• Las hormonas son:

Segundo
proteicas, esteroideas mensajero
(grasas) o formadas por
moléculas pequeñas. Glucógeno

• Las proteicas no pue- + -

den ingresar al interior Glucosa 6P
celular, son recibidas
por receptores. Glucosa

• Su función depende de +
segundos mensajeros.
 Receptor de
Patología: diabetesinsulina
Glucosa
• Paciente delgado,
con gran tendencia
a problemas rena-
les, neurológicos,
metabólicos, etc.
Tyr-P
• Deficiencia en
insulina.

• Menor aprovecha-
Protein
miento de la Fosfatasa
glucosa...
Síntesis de lípidos y
GLUT 4 glucógeno
 Patología: hiperlipemia
• La presencia de
xantomas hace pensar
en hiperlipemia.
• La hiperlipemia se
verifica analizando
la sangre.
• Se debe a transtornos
en los receptores de
betalipoproteínas o en
la síntesis exagerada
de pre
betalipoproteínas.

Netter M,D.Iconografía Médica CIBA

 Patología :anemia

• Glóbulos rojos alterados, que

son fácilmente destruidos por
el bazo.
• Se debe a modificaciones de la
forma de los hematíes.
• Se debe a alteraciones en los
aminoácidos de las cadenas
proteícas de la hemoglobina.
 Procedimientos de estudio
• Centrifugación: preparativa y analítica.
• Fotometría: de absorción y de emisión.
• Fotometría de absorción atómica: minerales.
• Cromatografía: papel, Capa Fina, HPLC.
• Electroforesis: lípidos, proteínas, azúcares.
• Potenciometría: electrodos selectivos.
 Centrifugación Homogenizado
Fotometría celular

Centrif.1000g/
• Aplica la fuerza centrífuga 10min
para separar partículas en
suspensión. Pueden ser Pastilla Sobrenadante
componentes celulares. Centrif.1000g/
10min

Nucleos Sobrenadante

Centrif.3300/
10min

• Fotometría: medición de colores

por absorbancia de la luz
• También fluorometría. mitocondrias sobrenadante
 Generalidades sobre cromatografía

• Sistema de separación de sustancias

• Se inicia en 1834, con lo trabajos de Runge F.,
luego en 1897 con los de Day T y en 1906 con
los trabajos de Tswett M.

• Inicialmente trabajaban sobre pigmentos

vegetales de colores, lo que da lugar al
nombre de “cromatografía”

Repasando Bioquímica
 Cromatografía en papel

• Partición por Solvente 1 Soporte

solventes
• adsorción al
papel
X Z
• gravedad? X1
Solvente 2
Rf= X/Z o X1/Z

Repasando Bioquímica

Técnica
Cromatografía a gas
Cromatografía líquida
Electroforesis capilar
Cromatografía líquida supercrítica
Cromatografía iónica
Cromatografía plana (TLC)
Repasando Bioquímica
Tipos de cromatografía...
Fase móvil
Gas (He,H o N)
Agua o solventes orgánicos:
metanol,acetonitrilo,propanol etc
Solución buffer
Dióxido de carbono en estado
supercrítico, también metanol,
hexano, isopropanol etc.
Soluciones acuosas de ácidos,
bases o sales. También solventes
miscibles en agua como metanol.
Mixturas como hexano/acetona,
cloroformo/acetato de etilo,
butanol/acético/agua.
Fase estacionaria
Líquidos viscosos como escualeno,
etilenglicol, polimetilsiloxano. Sólidos
como sílica, alúmina y polímeros
porosos.Columna de vidrio o metal.
Sílica sólida, poliestireno, en columna
de acero inoxidable.
Columna capilar llena de buffer.
Sílica o polímeros en columnas o
polimetil siloxanos en columnas
capilares.
Resinas de intercambio iónico
Sílica gel, óxido de aluminio,
celulosa, material de intercambio
iónico sobre vidrio, plastico o
aluminio.
 Electroforesis

• Procedimiento de análisis que permite

separar macromoléculas (proteínas)
mediante su diferente carga eléctrica.
• Particularmente las proteínas (formadas por
muchos aminoácidos, ácidos y básicos)
tienen cargas muy diferentes entre sí, lo que
altera su velocidad de migración
• La electroforesis usa distintos soportes,
desde el agua, hasta el poliacetato de
celulosa, pasando por el papel y el agar. Muy
usada en la práctica médica.
• Se le usa en el diagnóstico de cirrosis
hepática, enfermedad renal, trastornos de
los anticuerpos.

Repasando Bioquímica
 Electroforesis del suero humano
PM en
Fracción Proteína miles Función
Albúmina Albúmina 67 Pres.oncótia. Transporte. Hormonas, bilirrubina etc.
alfa 1 glob Antitripsina 51 Inhibidor
Antiquimotripsina 68 Inhibidor
Lipoproteina HDL 300 Transporte de lípidos
Transcortina 51 , progesterona Albúmina
TBG 54 Transporte de tiroxina
alfa 2 glob ceruloplasmina 135 Transporte de cobre
Atitrombina III 58 Inhibidor de coagulación
Haptoglobina 100 Unión de hemoglobina
Plasminogeno 90 Precursor de Plasmina
Macroglobulina 725 Unión de proteasas
Proteína transp.retinol 21 Transporte de vitamina A
Prot.transp.vit.D 52 Transporte de vitamina D
Beta glob Lipoproteína LDL 3000 Transporte de lípidos
Transferrina 80 Transporte de hierro
Fibrinógeno 340 Factor de coagulación Alfa 1 globulina
Proteína C reactiva 110 Activación de complemento
Gamma glob IgG 150 Anticuerpos tardios Alfa 2 globulina
IgA 162 Anticuerpos protectores de mucosa
IgM 900 Anticuerpos tempranos
IgD 172 Receptores de linfocitos B
Beta globulina
IgE 196 Reaginas

Gamma globulina

Repasando Bioquímica
 Ánodo
Ventana de
cuarzo
Fotometría de Absorción
Atómica
• Procedimiento ampliamente usado Gas inerte
para medir contenido de metales en Cátodo hueco Muestra
muestras biológicas.
• La muestra diluida es aspirada Lámpara de
continuamente e introducida a una Cátodo hueco
llama. Los solventes se evaporan y los
átomos quedan libres en la llama.
• Se estudia la absorción de la luz por Atomizador
estos átomos. La luz proviene de una
lámpara de cátodo hueco que esta
formada del metal en referencia. (Se
necesita una lámpara por metal), Los
átomos de Argón que llenan la lámpara
son acelerados y golpean los átomos Monocromad
de metal produciendo un espectro or
luminoso característico que deberá ser
absorbido por los átomos de la
muestra en la medida de su
concentración.
Detector

Repasando Bioquímica
Agua, ácidos, bases,
soluciones buffer
 La estructura del agua

• La molécula de agua es un
tetraedro irregular con
oxígeno en el centro.
• Los dos enlaces con los hi- 2e
drógenos están en dos
vértices y los dos electrones
no compartidos en los 2e
restantes.
• El ángulo entre los dos hidró-
genos es 105° (menor que los H
109° del tetraedro regular)
por lo que la figura es 105o
asimétrica. H
• Las moléculas de agua
forman un dipolo.
La característica dipolar del agua

• Debido a su asimetría y a la
forma como se disponen los
H+, la carga eléctrica se pola-
riza a un lado de la molécula
como positiva y al otro lado
como negativa.
• Por este carácter dipolar las
moléculas se unen entre sí,
formando puentes de
hidrógeno.
• Se pueden formar uniones
dipolo-dipolo e ión-dipolo
intercambiables entre sí.
 Generalidades

• Aproximadamente 60% del peso corporal es agua, medio

fundamental en el que se desarrolla el metabolismo
intracelular como el extracelular.
• El agua solubiliza carbohidratos, proteínas y iones, permi-
tiendo el anabolismo y el catabolismo de los diferentes
nutrientes..
• Del líquido corporal 2/3 partes son intracelulares y 1/3 es
extracelular. El 25% del extracelular es plasma sanguíneo.
• La regulación del agua corporal depende del hipotálamo
que controla la sed, de la hormona antidiurética y de la
función renal.
 Reacciones químicas reversibles
• Casi todas las reacciones químicas en la naturaleza tienen carácter
reversible, es decir transcurren en ambas direcciones.
• Las reacciones reversibles transcurren hasta un determinado punto
de equilibrio, característico de esa reacción.
• A la relación entre productos de la reacción y reactantes originales
se denomina Constante de Equilibrio (K).

• La disociación electrolítica o ioni-

A B  C  D
zación también es una reacción
química reversible.
• Por tanto la capacidad de diso-
ciarse de un ácido, hidróxido, una
K  [ C ][ D ]
[ A][ B ] sal, o del agua, dependerá de su
constante de equilibrio.
 PROPIEDADES DEL AGUA

 CAPACIDAD DISOLVENTE

 ELEVADA FUERZA DE COHESION

 ELEVADO CALOR DE VAPORIZACION

 IONIZACION DEL AGUA

 pH
• El pH es una expresión que pH DE FLUIDOS BIOLÓGICOS
valora la concentración de
Sangre arterial 7.4
iones hidrógeno.
Sangre venosa 7.35
• Se define como el
logaritmo negativo de la Líquido intersticial 7.35
concentración de iones H. Líquido intracelular 6,0 a 7,4
• Así, para el caso del agua el Orina 6,8 a 7,2
pH correspondiente es: Sudor 5,0 a 7,0
Jugo gástrico 2,0 a 2,5
pH   log( H  )   log 107  (7)  7
Acidosis: pH sanguíneo menor 7,36
• El pH de las soluciones al-
calinas se obtiene sobre la Alcalosis: pH sanguíneo mayor 7,44
base de pH + pOH=14.
 Algunas características
adicionales del pH...
• El agua al disociarse
genera 1x10-7 moles de
hidrógeno por litro de
agua. Genera también pH   log[ H  ]
1x10-7 moles de OH-por lo
que es pH   log[ 107 ]
característicamente
neutra y su pH es 7. pH  (7)  7
Hidrógeno pH • Las unidades de pH avanzan de
1x10-4 4 una en una, pero las
1x10-5 5 concentracio-nes
1x10-6 6 correspondientes, de diez en diez.
1x10-7 7 • Valores por debajo de 7 son
1x10-8 8 ácidos y por encima de 7 son
alcalinos.
1x10-9 9
1x10-10 10
1x10-11 11
 Potenciometría
• La potenciometría es el sistema de medida del
pH, mediante la diferencia de potencial entre un
electrodo indicador, que se modifica de acuerdo
a las condiciones de la sustancia en la que se
encuentra sumergido y, uno de referencia.
• El electrodo indicador más usado es el de vidrio
que consta de un bulbo de vidrio especial, lleno Ag +
con una solución de HCl 0,1N, en contacto con AgCl
un electrodo de Ag/AgCl.
• Cuando el electrodo indicador se sumerge en la
solución problema, se establece una diferencia
de potencial entre ambos lados del vidrio, que
es detectada por el electrodo de plata y HCl 0,1N
establece diferencia también con el electrodo
de referencia.
 Otros electrodos de medida...
• El electrodo a que nos hemos referido es para medir [H] y el vidrio
del bulbo es selectivo a este ión.
• Existen otras calidades de vidrio que son selectivas para otros iones
y permiten la medida de éstos con facilidad (Na, K, Cl, Ca, etc.).

Para estudiar: Electrodo Membrana

H Vidrio 72% SiO2, 6% CaO, 22%Na2O
Na Vidrio 11% Na2O, 18% Al2O3, 71% SiO2
Cl Membrana líquida Cloruro de octipropil amonio decanol
K Membrana líquida Valinomicina
Ca Membrana líquida Dinitrofeniloctil tetrafenilborato
CO2 Sensor de gases Electrodo de pH+solución bicarbonato
 pH biológico
• El pH es la concentración de iones [H] de una solución.
• Las distintas soluciones naturales, artificiales y biológicas tienen
un pH variable que es bueno reconocer.
• Las soluciones alrededor de pH 7 (neutralidad) son las menos
agresivas para los seres biológicos.

Jugo de
naranja Agua
Cola de mar
Amoniaco
Leche

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
ácido neutro alcalino
 Medida de pH
• Existen varias formas de medir el pH de una solución:
– Tiras indicadoras
– Colorantes indicadores líquidos
– Electrodos de medida
• Las tiras y los colorantes líquidos, funcionan a base de
indicadores que varían de color de acuerdo al pH donde se
encuentren.
pH color 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Azul de timol R-AM
Rojo Congo AZ-AM
Anaranjado de metilo R-AM
Verde de Bromocresol AM-AZ
Rojo de Metilo R-AM
Púrpura de bromocresol AM-PU
Azul de Bromotimol AM-AZ
Rojo de Fenol AM-R
Fenolftaleina IN-R
 Ácidos y bases
• Ácido es un donante de protones y base un receptor.
• Un ácido fuerte es aquel que se disocia en alto porcentaje
mientras que un ácido débil lo hace discretamente.
• Así el HCl se disocia en un 95% mientras que el ácido
acético lo hace en un 1,34%.

HA  H   A

Ácido conjugado Base conjugada

 Ácidos fuertes y débiles
La fortaleza y debilidad
de un ácido no depende
sólo de la concentración
del mismo, sino del grado HCl  Cl  H
de disociación que 36 , 5 g  35 , 5 g  1 g
alcanza. Disocia 95 %
H  0 , 95 g
El HCL fuerte se disocia
95% mientras que el
ácido acético débil lo CH 3 COOH  CH 3 COO H
hace en un 1,34%. 60g  59g 1g
El H + que proporciona Disocia 1,4%
una solución de HCL es H  0,014g
diferente.
 Ecuación de
Henderson -Hasselbalch

HA  H  A Disociación de un ácido
débil.
K  [ H[ HA][ A] ]
Constante de equilibrio.
H  K [[HAA]]
Concentración de H+.
•
log[ H ]  log K  log [[HAA]] Aplicar logaritmos

 log[ H ]   log[ K ]  log [[HAA]]

• Aplicar signo negativo
pH  pK  log [[HAA]]
• Aplicar pH
 Características de una solución amortiguadora

• Las características de una solución amortiguadora derivan

de la Ecuación de Henderson Hasselbalch.
• La máxima capacidad amortiguadora se produce cuando
el pH=pK del ácido, es decir cuando la concentración de
sal y de ácido son iguales.
• Los valores pH de la solución dependen de la relación
sal/ácido y no de la concentración absoluta de ellos.
• pKa es la fuerza que tienen las moléculas al disociarse
(es el logaritmo negativo de la constante de disociación
ácida de un ácido débil). ... Un ácido será más fuerte
cuanto menor es su pKa y en una base ocurre al
revés, que es más fuerte cuanto mayor es su pKa.

pH  pK  log sal
ácido
 Amortiguadores
de importancia biológica

• Bicarbonato: Bicarbonato/ácido carbónico, es el

más importante amortiguador extracelular. El pK del
ácido carbónico es 6,1 y se genera a partir del CO2 del
metabolismo.
• Fosfato: Fosfato básico/fosfato ácido, el más im-
portante en el intracelular. El pK del fosfato ácido es 6,8
y el pH intracelular se mantiene entre 6 y 7,4.
• Proteínas: Son importantes amortiguadores intra-
celulares. En base a las cadenas imidazólicas de las
histidinas. Su pK está entre 5,6 y 7,0 dependiendo de la
proteína.