Cromatografía

De
Afinidad
Qué es?
La cromatografía de afinidad
es un método para la
purificación selectiva de una
o varias moléculas a partir de
mezclas complejas basada
en la interacción biológica, la
cual es altamente específica
entre moléculas.
Método

1.Unión
2.Lavado
3.Elución
La matriz debe ser macroporosa y uniforme
Debe permitir el flujo.
No debe interactuar con la muestra ni con el ligando
Debe ser estable

 Agarosa
 Celulosa
 Silica
 Poliacrilamida
 Ligando Especificidad
Cibacron Blue F3GA Albúminas, quinasas, deshidrogenasas
Polymixin Endoproteínas
Benzamidine Proteasas
Lipoproteínas, receptores hormonales,
Heparina
factores de coagulación, etc
Lisina Plasminógeno, rRNA, dsDNA
Lectinas Glicoproteínas, polisacáridos, glicolípidos
o Objetivo
o Eliminar interacciones inespecíficas

Se pueden añadir sales, se puede modificar el

pH o añadir tenso activos pero sin dañar el
ligando.
 Objetivo
 Separar el ligando
y la molécula
diana
1. Cambio suaves en la
solución de lavado
2. Cambios bruscos de pH
o agentes caotrópicos
3. Adición de sustancias
que compiten por la
unión.
Equipo
Ejemplo
Bibliografía
 Urh M1, Simpson D, Zhao K. (2009). Affinity Chromatography:
General Methods. Recuperado el 14 de mayo de 2017 del sitio web:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S00766879096302
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 Amersham Biosciences. (s.f.) Affinity chromatography. Recuperado
el 14 de mayo de 2017 del sitio web:
http://202.38.194.135/spfx1/admin/picture/200752919776125.pdf