Enfermedad de Alzheimer

POR: GIOVANNI DANIEL AMBRÍZ ÁLVAREZ

Enfermedad de Alzheimer

 Enfermedad degenerativa del SNC, no existen tratamientos

preventivos o curativos

 Afecta a las células nerviosas de la corteza cerebral y de algunas

estructuras circundantes

 Dificultad para gobernar sus emociones, coordinar el movimiento,

recordar, reconocer errores
Cerebro sano-Alzheimer
Etapas de progresión de Braak & Braak*
Histopatología
Estrategías terapeuticas

 Estimulación con Campos Magnéticos

 Favorecen diversos cambios metabólicos como regeneración neural,
proliferación y supervivencia celular entre otros
 Este principio de interacción se basa en las propiedades eléctricas de los
diferentes tejidos
 Combinación de
campo eléctrico y
magnético

Radiación
electromagnética

• Sol
• Campo magnético terrestre
(0.02- 0.07 mT)
• Aparatos científicos,
tecnológicos (1 – 10 mT)
Exposición a CEM

Naturales Artificiales
CEM homogéneos CEM en vórtice
 Estudios de CEM en sistemas biológicos

Marchesi Respuesta citoprotectora

Calobro Aumento en ROS, causando daño y muerte celular.

Cambio en morfología y alteración en la expresión de

Hasanzadeh
189 proteínas

Pérez Prevención de muerte celular dando

efecto citoprotector

Córdova Incremente en la superveniencia celular

Estudio celular

Línea celular SH-SY5Y

Ciencias ómicas
Proteínas
 Proteómica

• Análisis global del proteoma:

Electroforesis Bidimensional
 Expresión
• Análisis individual:
 Estructural
Espectrometría de masas
 Funcional
• Interacciones entre proteínas
Electroforesis Bidimensional

 Preparación de la muestra  Segunda dimensión

 Primera dimensión  Tinción

SDS-PAGE
Segunda dimensión

Isoelectroenfoque
Primera dimensión Tinción
Electroforesis bidimensional.
Espectrometría de masas MALDI TOF
MATERIALES Y MÉTODOS
DISPOSITIVO PARA GENERAR VÓRTICES DE CEM

Icosakaitetragono
Esquematización de la interacción
cultivo celular - CEM de vórtices
 Componentes del sistema implementado

1) Regulador de voltaje
2) Fuente de alimentación
3) Sistema controlador
4) Amplificador acústico
5) Incubadora
6) Estimulador magnético
 Cultivo celular y modelo de estimulación magnética

Morfología

Estudio de
SH-SY5Y
viabilidad
C= Control
T= Tratamiento
Estimulación con CEM en
vórtices en condiciones de
cultivo controladas
Extracción de
Análisis proteómico proteínas
 Electroforesis bidimensional
 Espectrometría de masas
 RESULTADOS

Caracterización del sistema

V = 7.1 V
I= 2.4 A
7 cm
𝐵ത ≈ 2 mT

Cilindro interno
de la bobina
 TEMPERATURA

Sistema cerrado

 Tiempo de trabajo: 6 horas

 Parámetros de estimulación:
60 Hz, 2 mT.

 Temp. Registrada 25 °C
Vórtices de CEM
 Viabilidad celular y estudio microscópico

Morfología celular
Viabilidad celular

Antes de estimular Después de estimular

 Cuantificación de proteínas e integridad de las muestras

Cuantificación de proteínas Gel de integridad

Gel de integridad

Muestras elegidas para

análisis proteómico
Electroforesis bidimensional

Gel muestra C3
 Acoplamiento de geles Gel T2
Gel T1
 Identificación de puntos Gel C3

536
No. ID

12
59
Detección de puntos
 Análisis intra-clase
 Disminución en el número de proteínas al
exponer las muestras a CEM

Promedio
Tipo de muestra en el # de
puntos

CONTROL 2
521
CONTROL 3
TRATAMIENTO 1
460
TRATAMIENTO 3
 ANÁLISIS COMPARATIVO ENTRE GELES CONTROL Y TRATAMIENTO

Control Tratamiento

Sobrexpresión
 Control Tratamiento

Subexpresión
Análisis inter-clase
Resultados del análisis inter-clase

Diagrama de Venn, muestra el comportamiento de los puntos registrados

en el análisis inter-clase.

• sobrexpresión (círculo rojo)

• subexpresión (círculo verde)
Identificación de proteínas por espectrometría de masas
Modelos de estudio

 Modelo de agregación de βA y Tau in vitro e in vivo

 Estimulación con CEM en vórtice de los agregados