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3,000’000,000 pb
Red de difracción
del ADN (izquierda)
y del ARN (derecha)
Maurice Wilkins
PROPIEDADES FÍSICAS DEL ADN
• DENATURACIÓN RENATURACIÓN
Curvatura
superficial
Curvatura
profunda
Las hélices con sus escalones
codificados está lista para
dividirse
REPLICACIÓN
DEL
“A D N “
Al abrirse nuevas unidades de
código
convergen hacia ella.
Las nuevas unidades se juntan
A las resultantes de la división
Según el Código.
De la hélice original empiezan
A formarse dos hélices
Independientes.
5- Terminado el proceso resultan
dos hélices exactamente iguales
a la original
COMPONENTES DE LOS ACIDOS NUCLEICOS
BASES:
A. PURICAS
ADENINA GUANINA
(6-aminopurina) (2-amino-6-oxipurina)
B.PIRIMIDICAS
TIMINA URACILO
(5-metio-2,4-dioxipiridina) (2,4-dioxipirimidina)
CITOCINA
2-oxi-4-aminopirimidina
COMPONENTES DE LOS ACIDOS NUCLEICOS
AZUCARES
•DNA contiene
desoxirribosa
•RNA contiene
ribosa
FOSFATO
DESDE LOS
GENES A LAS
PROTEINAS
UNIDAD DE TRANSCRIPCION DEL ADN
(Cadena peptídica de la Globina Humana)
RNA
SPLICING
TRADUCCIÓN Y SÍNTESIS DE PROTEÍNAS
Cómo ocurre la síntesis de las
proteínas
https://www.youtube.com/watch?v=wky3JnP3Rrs
EL CODIGO GENéTICO
PROPIEDADES DEL CÓDIGO GENÉTICO
1. ES UNIVERSAL
2. ES DEGENERADO
3. ES LINEAL
4. LA UNIÓN DE BASES ES ESPECÍFICA
5.- ES UN CÓDIGO DE TRIPLETES
6. EL CODÓN QUE INICIA UN GEN EL AUG (METIONINA)
7. LOS CODONES DE TERMINACIÓN DE UN GEN SON:
UUA, UAG, UGA.
8. ES VARIABLE
9. ES ESTABLE
10. ES UNA ESTRUCTURA TOTALMENTE DECIFRADA (SE
BASARON EN LA SÍNTESIS DE CADENAS DE
POLINUCLÓTIDOS DESIGUALES, EJ. UUU- PHE-.
MUTACION
Detección:
¿Cómo se produce una mutación?
1.- En organismos inferiores se pueden diseñar
experimentos.
2.- En el genoma humano son indirectos y deducibles
por inferencia
(basándose en el Arbol Genealógico)
TASA DE MUTACIÓN
Variaciones se deben a:
Mutantes/millón Frecuencia
Rasgos de gametos de la
mutación
Acondroplasia 10 1 x 10 -5
Aniridia 2.6 2.6 x 10 -6
Retinoblastoma 6 6 x 10 -6
Osteogenesis imperfecta 10 1 x 10 -5
Neurofibromatosis 50-100 0.5-1 x 10 -4
Enfermedad poliquistica renal 60-120 6-12 x 10 -6
Sindrome de Marfan 4-6 4-6 x 10 -6
Sindrome de Von-Hippel-Landau <1 1.8 x 10 -7
Distrofia Muscular de Duchenne 50-100 0.5-1 x 10 –4
Secuencia de los ocho primeros aminoácidos de las cadenas b
de la HbA y HbS. En posición 6 la HbS tiene Val en lugar de
Glu, lo que se debe al cambio de un nucleótido del codón
GGA en la HbA por GUA en la HbS.
Codón Aminoácido Codón Aminoácido
HbA HbS
GUU Valina GUU Valina
CAU Histidina CAU Histidina
UUA Leucina UUA Leucina
ACU Treonina ACU Treonina
CCU Prolina CCU Prolina
GGA Acido glutámico GUA Valina
GAA Acido glutámico GAA Acido glutámico
AAA Lisina AAA Lisina
CLASIFICACION DE LAS MUTACIONES
1. FISICOS
* RADIACIONES
- Radiaciones ionizantes (rayos X, rayos a, b, g, etc)
- Luz ultravioleta
3. BIOLOGICOS
* Virus (retrovirus: HTLV, VPH)
EL GEN: PROPIEDADES
PENETRANCIA Y EXPRESIVIDAD :
* Penetrancia : Capacidad del gen para alcanzar una
expresión.
Penetrancia reducida : Algunos individuos que
poseen el genotipo apropiado no expresan este
carácter. Ejm. Retinoblastoma (gen RB1) *
¿Cómo medimos la penetrancia
de un gen?
• Si examinamos a 42
personas que tienen
un alelo para la
polidactilia y
observamos que 38
de ellas presentan
polidactilia, la
penetrancia sería de
38/42=0.90 (90%)
RETINOBLASTOMA
( Penetrancia reducida)
PENETRANCIA Y EXPRESIVIDAD :
*Expresividad : Gama de fenotipos que proceden de
un determinado genotipo.
Variación de las manifestaciones clínicas (tipo y
severidad) de trastornos genéticos entre individuos
afectados, incluso dentro de la misma familia
• Distrofia muscular
risomélica (cintura
escapular o pelviana)
• Distrofia muscular
miotónica (AD): Ligada
a los cromosomas 19 o 3
HETEROGENEIDAD :
(En las distrofias musculares)
HETEROGENEIDAD GENETICA:
(varios genes un solo efecto) Osteogénesis I
CARACTERES LIMITADOS POR EL SEXO
( Pubertad precoz )
Niños afectados son mas altos que los de su edad, pero pronto interrumpen
su crecimiento y son bajos). Difícil de diferenciar de la HR ligada a X.
CARACTERES LIMITADOS POR EL SEXO
(Síndrome de Feminización testicular)
Persona resistente a las hormonas
masculinas (andrógenos).
Fórmula cromosomica : 46, XY
Tipo de herencia: AR ligado a X
EDAD Y EXPRESION DE LOS GENES:
Muchos genes actúan antes del nacimiento o en las primeras
fases del desarrollo
Cuando el niño comienza su vida independiente puede ser
afectado: fenilcetonuria, galactosemia (enfermedades metab.)
Corea de Huntington : HAD, locus 4p 16.3, Gen CAG 30-35
(premutantes). repeticiones de 35 a 40 (mutantes).
ADN MITOCONDRIAL ADN mt
PROPIEDADES DEL “ADNmt”
Doble hélice pequeña de 16,579 pb.
Forma circular, contiene 37 genes para 22 ARNt.
Las enzimas implicadas en su replicación, transcripción y
traducción son codificadas por genes nucleares.
Tiene distribución asimétrica de “G” y “C” generando:
Una cadena pesada (H) rica en “G”
Otra cadena ligera (L) rica en “C”.
DIFERENCIAS CON EL ADN NUCLEAR
ELECTROFORESIS EN CAPILAR
SECUENCIAMIE
NTO DE
SIGUIENTE
5000 nt por 3 días
GENERACIÓN:
-Sec por perlas
28000 nt por 3 días - Sec por síntesis
- Sec por ligación
G↓AATTC
Werner Arber (1978)
+ =
PFGE (Continuación)
PFGE: Resultado final
HIBRIDACIÓN
• Southern blot : ADN
Electroforesis
Hibridación
Señal de hibridación
MICROARREGLOS
(Ejm expresión diferencial de genes)
https://www.youtube.com/watch?v=UgL1Pq2sk3M
PCR
• Kary Mullis inventó el PCR
buscando una mejor manera de
secuenciar ADN
Mullis et al., 1986. Specific enzymatic amplification of DNA in vitro: the polymerase chain reaction.
Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 1986;51 Pt 1:263-73.
PCR
• https://www.youtube.com/watch?v=2KoLnIwoZKU
“ADN “ RECOMBINANTE
ROMPIMIENTO (*)
ENZIMA BACTERIA
5’ 3’
Alul Athrobacter luteus AG*CT
Mspl Especies de Moraxella GC*CC
Hinfl Haemophilus influenzae Rf G*ANTC
Se observa:
(1) El virus se aproxima a la
bacteria llevando un
genoma con el gen que le
interesa donar.
(2) El virus se pone en
contacto con la bacteria
donde se forma un poro.
(3) El virus inyecta su ADN
al interiror de la célula
bacteriana.
CROMOSOMAS ARTIFICIALES
Transportan grandes cantidades de material genético. Por
esto son muy útiles en la secuenciación del genoma.
Yabar C. 2017
INGENIERÍA GENÉTICA
• Ligación inserto vector
CONSTRUCTO INSERTO-VECTOR
Yabar C. 2017
INGENIERÍA GENÉTICA
Vacuna, Ab
Ag Dx
Antisuero
Yabar C. 2017
APLICACIONES DEL ADN RECOMBINANTE
* Clonación de mamíferos
* Mapeo de genes defectuosos
* Producción de proteínas de utilidad medica (como la
somatostatina, la insulina, la hormona del crecimiento
humano, los interferones).
* Utilización de plantas desarrolladas mediante ingeniería
genética para producir vacunas orales.
APLICACIONES MÉDICAS
. Producción de anticuerpos monoclonales
MÉDICAS
VACUNAS
1. Vacunas orales usando plantas desarrolladas con la técnica
del ADNrecombinante.
2. Vacunas sintéticas, por ejemplo contra el paludismo y la
rabia
3. Vacuna recombinante contra la hepatitis B
4. Vacunas para animales infectados
VACUNAS
V
A
C
U
N
A
S
APLICIONES EN LA A G R I C U L T U R A
Terapia génica
• https://www.youtube.com/watch?v=ksyFK5fdKNY
Último sistema de reparación
descubierto: CRisPR Cas 99
https://www.youtube.com/watch?v=0pGVSTaClXg
IMPACTO SOCIAL DE LA TECNOLOGÍA DEL ADN
RECOMBINANTE
1. Probable diseminacion de infecciones por
microorganismos portadores de genes peligrosos
2. Cuestionamiento ético y moral acerca del empleo
de la tecnología recombinante en seres humanos
para modificarlos y/o conocer su estructura
genética
3. Preocupación ecológica sobre el uso de la
tecnología recombinante en agricultura como
agente modificador del ecosistema