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ENZIMAS
ENZIMAS
ENZIMAS
INTRODUÇÃO Seres Vivos Variedade de reações bioquímicas Mediadas por catalisadores biológicos
INTRODUÇÃO
Seres Vivos
Variedade de reações bioquímicas
Mediadas por catalisadores biológicos

ENZIMAS

ENZIMAS
ENZIMAS
• Definição: – Catalisadores biológicos – Longas cadeias de aminoácidos
Definição:
– Catalisadores biológicos
– Longas cadeias de aminoácidos
• Função: Viabilizar a atividade das células, quebrando moléculas ou juntando-as para formar novos compostos
Função:
Viabilizar a atividade das células, quebrando moléculas ou
juntando-as para formar novos compostos
Com exceção de um pequeno grupo de moléculas de RNA com propriedades catalíticas, chamadas de RIBOZIMAS,
Com exceção de um pequeno grupo de moléculas de RNA
com propriedades catalíticas, chamadas de RIBOZIMAS,
todas as enzimas são PROTEÍNAS
ENZIMAS
ENZIMAS
Importância da catálise:
Importância da catálise:
Sem a catálise, a maioria das reações químicas nos sistemas biológicos seria muito lenta para fornecer
Sem a catálise, a maioria das reações químicas nos sistemas biológicos seria
muito lenta para fornecer produtos na proporção adequada para sustentar a
vida
ENZIMAS – ESTRUTURA
ENZIMAS – ESTRUTURA
Estrutura Enzimática
Estrutura
Enzimática
Holoenzima
Holoenzima
Proteína Apoenzima ou Apoproteína
Proteína
Apoenzima ou
Apoproteína
Cofator
Cofator
Pode ser: • íon inorgânico • molécula orgânica
Pode ser:
• íon inorgânico
• molécula orgânica
ENZIMAS – ESTRUTURA Estrutura Enzimática Holoenzima Proteína Apoenzima ou Apoproteína Cofator Pode ser: • íon inorgânico
Coenzima
Coenzima
ENZIMAS – ESTRUTURA Estrutura Enzimática Holoenzima Proteína Apoenzima ou Apoproteína Cofator Pode ser: • íon inorgânico
covalente Grupo Prostético
covalente
Grupo Prostético
ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS
ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS
  • Apresentam alto grau de especificidade

ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS • Apresentam alto grau de especificidade • São produtos naturais biológicos •
  • São produtos naturais biológicos

ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS • Apresentam alto grau de especificidade • São produtos naturais biológicos •
• São altamente eficientes, acelerando a velocidade das reações químicas em sistemas biológicos
São altamente eficientes, acelerando a velocidade das reações químicas em
sistemas biológicos
  • Não são tóxicas

ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS • Apresentam alto grau de especificidade • São produtos naturais biológicos •
  • Atuam em condições favoráveis de pH, temperatura

ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS • Apresentam alto grau de especificidade • São produtos naturais biológicos •
  • Estão quase sempre dentro da célula, e compartimentalizadas

ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS • Apresentam alto grau de especificidade • São produtos naturais biológicos •
  • Consideradas as unidades funcionais do metabolismo celular

ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS • Apresentam alto grau de especificidade • São produtos naturais biológicos •
ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS
ENZIMAS – CARACTERÍSTICAS GERAIS
• São fundamentais para processos bioquímicos celulares tais como: - degradação das moléculas em nutrientes
São fundamentais para processos bioquímicos celulares tais como:
-
degradação das moléculas em nutrientes
transformação e conservação da energia química - - síntese de macromoléculas biológicas a partir de
transformação e conservação da energia química
-
-
síntese de macromoléculas biológicas a partir de moléculas precursoras
simples
ENZIMAS Exemplos de doenças que podem ser diagnosticadas e acompanhadas enzimaticamente são:
ENZIMAS
Exemplos
de
doenças
que
podem
ser
diagnosticadas
e
acompanhadas enzimaticamente são:
• Infarto Agudo do Miocárdio (Creatina quinase, Lactato desidrogenase)
• Infarto Agudo do Miocárdio (Creatina quinase, Lactato
desidrogenase)
• Hepatite (Transaminases: ALT, AST) • Pancreatite (Amilase, Lipase)
• Hepatite (Transaminases: ALT, AST)
• Pancreatite (Amilase, Lipase)
• Câncer de próstata (Fosfatase ácida prostática)
• Câncer de próstata (Fosfatase ácida prostática)
Outras formas de classificar
Outras formas de classificar
Outras formas de classificar Enzimas intracelulares atuam no interior da célula sintetizam o material celular realizam

Enzimas intracelulares

Outras formas de classificar Enzimas intracelulares atuam no interior da célula sintetizam o material celular realizam
atuam no interior da célula
atuam no interior da célula
sintetizam o material celular realizam reações catabólicas que suprem as necessidades energéticas da célula
sintetizam o material celular
realizam reações catabólicas
que suprem as necessidades
energéticas da célula
Outras formas de classificar Enzimas intracelulares atuam no interior da célula sintetizam o material celular realizam

Enzimas extracelulares

Outras formas de classificar Enzimas intracelulares atuam no interior da célula sintetizam o material celular realizam
atuam fora da célula
atuam fora da célula
Outras formas de classificar Enzimas intracelulares atuam no interior da célula sintetizam o material celular realizam

executando as alterações necessárias à entrada dos

nutrientes para o interior das

células

Outras formas de classificar
Outras formas de classificar
Outras formas de classificar Enzimas habituais ou constitutivas As células sempre as sintetizam Enzimas indutivas As

Enzimas habituais ou constitutivas

Outras formas de classificar Enzimas habituais ou constitutivas As células sempre as sintetizam Enzimas indutivas As
Outras formas de classificar Enzimas habituais ou constitutivas As células sempre as sintetizam Enzimas indutivas As

As células sempre as sintetizam

Outras formas de classificar Enzimas habituais ou constitutivas As células sempre as sintetizam Enzimas indutivas As
Outras formas de classificar Enzimas habituais ou constitutivas As células sempre as sintetizam Enzimas indutivas As

Enzimas indutivas

Outras formas de classificar Enzimas habituais ou constitutivas As células sempre as sintetizam Enzimas indutivas As
Outras formas de classificar Enzimas habituais ou constitutivas As células sempre as sintetizam Enzimas indutivas As

As células só as sintetizam

quando estão na presença do substrato da enzima

Outras formas de classificar Enzimas habituais ou constitutivas As células sempre as sintetizam Enzimas indutivas As

Isoenzimas

Enzimas que têm a mesma função, ou seja, catalisam uma mesma reação, porém apresentam estruturas diferentes
Enzimas que têm a mesma função, ou
seja, catalisam uma mesma reação,
porém apresentam estruturas
diferentes
ENZIMAS – COFATOR
ENZIMAS – COFATOR
 Cofatores – pequenas moléculas orgânicas ou inorgânicas que podem ser necessárias para a função de
Cofatores – pequenas moléculas orgânicas ou inorgânicas que podem ser
necessárias para a função de uma enzima
ligados à molécula de enzima, mas na ausência a enzima é inativa
 A catálise ativa enzima-cofator é denominada holoenzima  quando o cofator é removido, se mantém
 A catálise ativa enzima-cofator é denominada holoenzima
 quando
o
cofator
é
removido,
se
mantém
a
proteína,
a
qual
é
catabolicamente inativa e é denominada apoenzima
ENZIMAS
ENZIMAS
E + S
E + S
E + P
E + P
A molécula que a enzima atua é o substrato, que se transforma em produto
A molécula que a enzima atua é o substrato, que se transforma em produto
ENZIMAS – COMPONENTES DA REAÇÃO
ENZIMAS –
COMPONENTES DA REAÇÃO
Equação geral de uma reação enzimática
Equação geral de
uma reação
enzimática
E + S ES EP E+P
E
+
S
ES
EP
E+P
ENZIMAS – COMPONENTES DA REAÇÃO Equação geral de uma reação enzimática E + S ES EP
ENZIMAS – COMPONENTES DA REAÇÃO Equação geral de uma reação enzimática E + S ES EP
Substrato se liga ao SÍTIO ATIVO da enzima
Substrato se liga ao
SÍTIO ATIVO
da enzima
representa o estado de transição da enzima com o substrato e com o produto
representa o
estado de
transição da
enzima com
o substrato e
com o
produto

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Mecanismo de Ação
Mecanismo de Ação
• A reação enzimática ocorre em duas etapas:
A reação enzimática ocorre em duas etapas:
• 2 modelos: – Modelo chave-fechadura – Modelo do ajuste induzido
2 modelos:
– Modelo chave-fechadura
– Modelo do ajuste induzido
Modelo Chave-Fechadura
Modelo Chave-Fechadura
Formas rígidas Modelo de encaixe induzido
Formas rígidas
Modelo de encaixe induzido

E e S se deformam, para otimizar o encaixe

Emil Fisher, na década de 1950, propôs o modelo chave-fechadura para explicar o reconhecimento (especificidade) do
Emil Fisher, na década de 1950, propôs o
modelo chave-fechadura para explicar o
reconhecimento (especificidade) do
substrato pela enzima. Nesse modelo, o
sítio ativo da enzima é pré-formado e tem
a forma complementar à molécula do
Substrato, de modo que outras moléculas
não teriam acesso a ela
Na década de 1970, Daniel Kosland propôs o modelo de encaixe induzido, no qual o contato
Na década de 1970, Daniel Kosland propôs
o modelo de encaixe induzido, no qual o
contato com a molécula do substrato induz
mudanças conformacionais na enzima, que
otimizam as interações com os resíduos do
sítio ativo. Esse é o modelo aceito hoje em
dia
- As enzimas aceleram a velocidade das reações por diminuir sua energia de ativação
- As enzimas aceleram a velocidade das reações por diminuir sua energia de ativação
- As enzimas aceleram a velocidade das reações por diminuir sua energia
de ativação
A combinação do substrato com a enzima cria uma nova via de reação que tem um
A combinação do substrato com a enzima cria uma nova via de reação que
tem um estado de transição de menor energia do que na ausência do substrato
Fatores que Influenciam a Ação Enzimática
Fatores que Influenciam a Ação
Enzimática
• pH • Temperatura
pH
Temperatura
• Concentração da Enzima • Concentração do Substrato
Concentração da Enzima
Concentração do Substrato

pH

% atividade enzimática máxima
% atividade enzimática máxima
• O pH ótimo de uma enzima reflete variações no estado de ionização de resíduos de
O pH ótimo de uma enzima
reflete variações no estado de
ionização
de
resíduos
de
aminoácidos do sítio ativo
• A enzima está pelo menos parcialmente desnaturada em pHs afastados do pH ótimo
A
enzima
está
pelo
menos
parcialmente desnaturada em
pHs afastados do pH ótimo

pH ótimo=1,5

pH ótimo=6,8

pH ótimo=9,9

Temperatura
Temperatura

Temperatura

T velocidade de reação

• Enzima  temperatura ótima para que atinja sua atividade máxima
• Enzima  temperatura
ótima para que atinja sua
atividade máxima
Temperatura • Temperatura  T   velocidade de reação • Enzima  temperatura ótima para
Concentração da Enzima
Concentração da Enzima
– A velocidade máxima da reação é uma função da quantidade de enzima disponível (existindo substrato
– A
velocidade
máxima
da
reação
é
uma
função da
quantidade de enzima disponível (existindo substrato em
excesso)
Concentração da Enzima – A velocidade máxima da reação é uma função da quantidade de enzima

Concentração do substrato

A quantidade de reagente é suficiente grande para saturar todos os sítios catalíticos enzimas
A quantidade de reagente é
suficiente grande para
saturar todos os sítios
catalíticos enzimas
Inibição enzimática
Inibição enzimática
Inibidores
Inibidores
Substâncias que reduzem a atividade de uma enzima de forma a influenciar a ligação do substrato
Substâncias que reduzem a atividade de
uma enzima de forma a influenciar a
ligação do substrato
Incluem fármacos, antibióticos, preservativos de alimentos e venenos
Incluem fármacos, antibióticos, preservativos de alimentos e venenos
Inibidores São importantes por várias razões:
Inibidores
São importantes por várias razões:
(1) - Atuam como reguladores das vias metabólicas (2)- Muitas terapias por fármacos são baseadas na
(1) - Atuam como reguladores das vias metabólicas
(2)- Muitas terapias por fármacos são baseadas na inibição enzimática. Ex.: Muitos
antibióticos ou fármacos reduzem ou eliminam as atividades de certas enzimas.
O tratamento da AIDS inclui inibidores das proteases, que inativam a enzima
necessária para produzir novos vírus
(3) - as propriedades tóxicas de muitos inibidores possibilita também o seu emprego
no combate contra insetos (inseticidas);

Inibição enzimática

Classificação:

Irreversível

Inibição enzimática • Classificação: Irreversível Competitiva Reversível Não Competitiva

Competitiva

Inibição enzimática • Classificação: Irreversível Competitiva Reversível Não Competitiva

Reversível

Não Competitiva

Inibição Irreversível
Inibição Irreversível
• os inibidores irreversíveis reagem quimicamente com as enzimas, levando a uma inativação praticamente definitiva
os inibidores irreversíveis reagem quimicamente com as
enzimas, levando a uma inativação praticamente definitiva
• Podem destruir grupos funcionais que são essenciais para a atividade enzimática • A enzima não
Podem destruir grupos funcionais que são essenciais para a
atividade enzimática
A enzima não retoma a sua atividade normal
Ex.: Alguns pesticidas inibem o sítio ativo da acetilcolinesterase (enzima
importante na transmissão dos impulsos nervosos), o que impede a
hidrólise da acetilcolina na sinapse, resultando no homem, paralisia dos
músculos respiratórios e edema pulmonar
Penicilina - liga-se especificamente as enzimas da via de síntese da parede
bacteriana, tornando-as susceptíveis à lise
Inibição Reversível Competitiva • Uma substância que compete diretamente com o substrato pelo sitio de ligação
Inibição Reversível Competitiva
Uma substância que compete diretamente com o substrato
pelo sitio de ligação de uma enzima
• Inibidor normalmente é semelhante ao substrato, de modo
que se liga especificamente ao sitio ativo, mas difere do
substrato por não poder reagir com ele
O
inibidor liga-se a enzima
formando o complexo EI
cataliticamente inativo

Inibição Reversível Não Competitiva

O inibidor não competitivo pode ser uma molécula que não se assemelha com o substrato, mas
O inibidor não competitivo pode ser uma molécula que não se assemelha
com o substrato, mas apresenta uma grande afinidade com a enzima
Não bloqueia a ligação do substrato, mas provoca uma modificação conformação da enzima que evita a
Não bloqueia a ligação do substrato, mas provoca uma modificação
conformação da enzima que evita a formação do produto
na
Esta ligação pode distorcer a enzima tornando o processo
catalítico ineficiente

Comparação das enzimas com catalisadores químicos

Característica Enzimas Catalisadores Químicos Especificidade ao substrato Natureza da estrutura Sensibilidade à T e pH alta
Característica
Enzimas
Catalisadores Químicos
Especificidade ao substrato
Natureza da estrutura
Sensibilidade à T e pH
alta
baixa
complexa
Simples
alta
Baixa
Condições de reação (T, P e pH)
suaves
drástica (geralmente)
Custo de obtenção (isolamento e purificação)
Natureza do processo
alto
Moderado
batelada
Contínuo
Consumo de energia
Formação de subprodutos
Separação catalisador/ produtos
Atividade Catalítica (temperatura ambiente)
Presença de cofatores
Estabilidade do preparado
Energia de Ativação
Velocidade de reação
baixo
Alto
baixa
Alta
difícil/cara
simples
alta
baixa
sim
não
baixa
alta
baixa
alta
alta
baixa