Michaelis-Menten

Pablo Araujo Granda Ph.D.

paaraujo@uce.edu.ec
 Leonor Michaelis
• Nace en Berlín 1875.

• Médico 1896

• Bacteriologo 1905

• Bioquímico 1910

• Química fisiológica =
bioquímica
Leonor Michaelis

• Embriología experimental / Fisico química de

proteínas / Inmunología / Reacciones redox
biologicas.

• Textos = Embriología / Matemática para biólogos y

médicos
 Leonor Michaelis

• Japon 1923 - 1926

• Química de iones y electrodos

• Permeabilidad de las membranas

• Estados Unidos 1926 …. 1949

• Rockefeller Institute for Medical Research New York

La investigación
Cinética enzimática
Por donde empieza todo ….

• Fisicoquímicos = Teoria de la materia basada en el

“nuevo” concepto de iones.

• Michaelis y Sorensen = Teoria de iones para

explicar los fenómenos biológicos

• Influencia de los iones hidrógenos (pH) en las

propiedades de las enzimas y proteínas.
 .. Por aquí empieza todo …

• Teoria de los buffers (reguladores de iones

hidrógeno)

• Teoria de disociación de electrolitos anfóteros.

• Puntos isoeléctricos de las proteínas

• Método de la electroforesis a pH constante

 Primeras investigaciones en
cinética enzimática
• 1890 - Invertasa (sacarosa  Glucosa + Fructosa)
• Emile Duclaux – Instituto Pasteur – Paris
• Victor Henri - Sorbonne - Paris
• Leonor Michaelis – Berlin
• Max Bodenstein – Leipzig
• Donald D. Van Slyke - New York
• Adrian J. Brown – Birmingham
• Archibald Vivian Hill - Cambridge
1890 – O´Sullivan and Tompson

• La acción de la Invertasa  acción simple de

cinética de masa

• La velocidad de la reacción  concentración de

sustrato

• Desviaciones que fueron aclaradas por:

• Duclaux 1899 / Henri 1901 / Brown 1902

La ecuación Victor Henri

• Complejo Enzima-sustrato

• Complejo enzima-producto

• Liberación de la Enzima
Modelo científico
• Modelo descriptivo – • Relaciones entre:
Fenomenológico • Bioquímica y Química

• Confrontar frente a una • Cinética y Catálisis

Química
serie de hipótesis
• Producir un modelo que
explique los hechos
• Probar el modelo
 El Material de estudio

• La enzima (fermento)

• Invertasa (sacarosa  Glucosa + Fructosa)

• Azucar = Azucar Invertida (polarizacion)

• Se puede dar sin enzimas pero en presencia de

Acido (reacción de primer orden)
 1890 – O´Sullivan and Tompson
• Ley exponencial para la
producción de azucar invertida
usando invertsa

• La velocidad de la reacción 
concentración de enzima

• No se estudió la influencia de la
concentración del sustrato

• K = varia con la concentración

inicial del sustrato de forma
inversamenet proporcional.
1898 – Investigación Duclaux
• Cantidad de sacarosa invertida no cambia en relación
a la concentración de sacarosa inicial

• Cinética = no de primer orden.

• Al inicio = velocidad de reacción es constante (1er

orden)

• La reacción de los productos tienen efecto retardado

 1898 – Investigación Duclaux
• Al inicio = velocidad
constante (orden cero),
en ausencia de productos
(considerable).
• Luego = los productos se
definen por la
concentración del
sustrato
1898 – Investigación Duclaux
1901 – Ecuación de Henri

• Demuestra de forma experimental que el valor “k”

se incrementa con los incrementos de azucar
invertida.

• Por tanto NO ES CONSTANTE

1901 - Henri
 1901 – Henri

• La enzima no pierde su actividad en el transcurso

de la reacción.

• (1890 O´Sullivan) Activa incluso después de haber

catalizado 100.000 veces su peso en sacarosa.
 Conclusiones de Henri
• 2 corrientes en las cuales estudió:
• El comportamiento vivo depende de la FisicoQuímica
• Tipos de energía = fuerza vital = vitalismo

• Primero en considerar a las enzimas como catalizadores.

• La enzima permanece intacta durante el proceso de conversión

• Los productos hacen mas lento el proceso

• Efecto de la concentración inicial del sustrato en la velocidad de

transformación.

• La velocidad es proporcional a la concentración de enzima pero no a

la de sustrato.
 Conclusiones de Henri
• Complejos entre enzima <=> sustrato <=> producto

• (O´sullivan) Tolera temperatura cuando esta acomplejada con

sustrato, sola no.

• (1902) Brown = complejo enzima<>sustrato y qu etarda un

tiempo en ser enzima + producto

• Si sube concentración de sustrato, imposible subir concentración

de complejo, por lo cual velocidad de reacción es constante.

• Aparece concepto de máxima velocidad (chequeo experimental)

El trabajo de Michaelis-Menten

• Parten del trabajo de Henri

• Aumentan:
• La concentración de iones hidrógeno

• La mutarotación de los azúcares

Para revisar

• Paper en aula virtual:

• The mode of action of urease and of enzimes in

general J. Biol. Chem.-1914-Van Slyke-Cullen