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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS


QUÍMICO FARMACÉUTICO INDUSTRIAL
LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA GENERAL Y
QUIMIOTERAPIA

Práctica 1a: “Manejo, marcado y distribución de


animales de laboratorio.”

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Introducción
La ciencia de los animales de laboratorio se puede definir como una
rama multidisciplinaria que contribuye con la investigación
biomédica permitiendo la obtención de datos reproducibles,
confiables e informativos.

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Incluye el estudio de la biología de los animales de laboratorio, su
manejo y requerimientos ambientales, los procedimientos de
estandarización microbiológica, la prevención y tratamiento de
enfermedades, la optimización de técnicas experimentales y de las
técnicas de anestesia y eutanasia. Esta ciencia también incluye el
estudio de los aspectos éticos de la experimentación animal junto
con la búsqueda de procedimientos alternativos y complementarios.

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El término “experimento con animales” puede aplicarse a cualquier
procedimiento científico en el que se utilicen animales. El objetivo
principal de la ciencia de animales de laboratorio es lograr el
equilibrio entre la calidad de la experimentación animal y el bienestar
de los animales.

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La ciencia en la que se utilizan los animales de laboratorio
fundamentalmente es la biología (biomedicina), dentro de las siguientes
áreas:
a. Estudios biológicos
b. Desarrollo y control de calidad de productos y aplicaciones para medicina
humana y veterinaria, fabricación de productos farmacéuticos, alimenticios y
pruebas de eficacia y/o seguridad.
c. Diagnóstico y prevención de enfermedades o alteraciones de la salud,
prevención de anomalías o sus efectos, diagnóstico y tratamiento de las
mismas.
d. Educación y formación

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El objetivo es la obtención de animales biológicamente uniformes,
desde el punto de vista genético y microbiológico. Además se deben
estandarizar las variables macro y microambientales del espacio en
el cual se encuentran los animales (ventilación, temperatura,
humedad, luz), como así también separados por especie o de
comportamiento (territorialidad, agresividad y hacinamiento).

ANIMAL PESO (g) AREA DE ALTURA DE


PISO PISO A
(cm2) TECHO (cm)
Rata 300-400 258 20

Ratón >25 97 12

Hámster 60-80 84 18

Cobayo >350 652 18

(Kg) (m2) (cm)

Conejo >5.4 0.46 36

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Las unidades en donde se producen o mantienen bajo experiencia los
animales de laboratorio se denominan bioterios.
Tienen como función producir animales para ser utilizados como
reactivos biológicos de alta calidad y/o mantener especies o cepas
bajo experiencia aplicando metodologías que estén de acuerdo con
las recomendaciones.

Animal de experimentación Porcentaje


MAMIFEROS Ratón 71
Rata 7
Cobayo 0.3
Hámster 0.05
Conejo 0.004
Perros, gatos, primates no humanos 1
OTROS VERTEBRADOS Aves, peces, etc. 20.646

Total 100
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Bienestar Animal
RUSSELL Y BURCH: LAS 3 RS
La teoría de Russell y Burch tal como se elaboró a finales de los años
cincuenta se ha convertido en un tema central de la ciencia de
animales de laboratorio. Se trata de cómo instrumentar medidas
para disminuir o eliminar los aspectos no humanitarios de la
experimentación animal, para ese fin se introdujo el “Concepto de
las 3 Rs” (refinamiento, reducción y reemplazo) como base
fundamental para el empleo responsable de los animales en los
experimentos.

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 Refinamiento: Se refiere a las condiciones y calidad de vida que se
le otorga al animal en cautiverio.

 Reducción: se refiere a una disminución del número de animales


que se necesitan para un experimento determinado.

 Reemplazo: Se refiere a la sustitución del empleo de animales


vivos por técnicas in vitro, modelos normatizados, videos, etc.

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Entrenamiento del personal
El personal debe recibir un entrenamiento y formación adecuada,
condición fundamental para obtener calidad en la investigación y
para utilizar en forma responsable los animales.
Dado el avance de esta ciencia y la influencia de la capacitación del
personal sobre la calidad de la experiencia y del bienestar animal en
muchos países se ha establecido la obligatoriedad de que los
científicos “nuevos” se preparen en este campo.

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• Sin embargo, la preparación y formación, aunque son
imprescindibles, no otorga la libertad para experimentar con
animales y sólo se justifica la realización de una experiencia si ésta
es necesaria y no hay alternativas disponibles; si el beneficio es
superior al sufrimiento del animal (según el juicio de un comité
ético) y si el experimento es diseñado cuidadosamente prestando la
máxima atención al bienestar animal.

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La Unión Europea establece que “las personas que lleven a cabo
experimentos o tomen parte en ellos y aquellas que estén al
cuidado de animales utilizados en experimentos, incluyendo las
tareas de supervisión, deberán tener la preparación y formación
apropiadas”.

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MANEJO

RATON

13
RATA

14
CONEJO

15
MARCAJE DE ANIMALES

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Eutanasia
Bajo dicho término entendemos el sacrificio deliberado de un animal,
siguiendo una técnica indolora, rápida, que permita un tránsito tranquilo
desde la plena conciencia hasta la muerte.
Entre los métodos más empleados se encuentra la administración
intraperitoneal, endovenosa, e intracardíaca de una sobredosis de un
anestésico inyectable. Se calcula una dosis 3 a 4 veces mayor que la
normal.
Otro método de eutanasia se realiza mediante la dislocación cervical,
sólo para un pequeño numero de animales.
Uno de los métodos más recomendados es el CO2. Para esto se debe
contar con una cámara que debe ser suficientemente grande como para
permitir el ingreso de los animales dentro de sus propias cajas, lo que
disminuye el estrés. Los animales deben estar expuestos a este gas luego
de 3 a 5 min del cese de la respiración, los neonatos son resistentes por lo
tanto se requiere de un método alternativo o exponerlos por más de 15
min.

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Método de distribución aleatorio
• Consiste en la asignación de individuo a grupos experimentales se
basa en la probabilidad equitativa
• La elección no se debe considerar la subjetividad del
experimentador

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Método de culebra japonesa
• Se realiza por un ordenamiento de manera decreciente los valores
de alguna variable medida en los animales de experimentación
• Se realiza en una tabla con un numero de lotes a trabajar
• El acomodamiento es realizado de izquierda a derecha

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Objetivo:
Aprender el manejo correcto de los animales de uso mas frecuente en el
laboratorio
Conocer y comparar los metodos de distribucion de animales de
experimentacion
Conoces los metodos de marcaje de los animales de experimentacion

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Hipótesis
• Si en la distribución aleatoria los elementos se eligen al azar mediante
números aleatorios, entonces todos los elementos de la población
tienen la misma probabilidad de ser elegidos.

• Si en la distribución por el método de la culebra japonesa los


elementos se distribuyen de acuerdo a una característica mediante los
individuos ordenando de forma decreciente las mediciones en
dirección horizontal de mayor a menor simulando el movimiento de
una culebra, entonces la distribución realizada será más homogénea
en comparación con el método aleatorio.

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método
Tomar 6 ratas y 10 Registrar los pesos
Marcar y pesar los
ratones de cada uno de los
animales
aleatoriamente animales

Ordenar el peso de Practica manejo Tomar conejo y


forma decreciente adecuado colocarlo en el cepo

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Resultados
Registro de la distrib de peso de las ratas método aleatorio
Rata Lote 1 peso Lote 2 peso Lote 3 peso Lote 4 peso

1 214 219 216 217


2 247 229 257 241
3 235 217 236 196
4 205 231 203 229
Promedio 225.25 224 228 219.5

Registro de la distrib de peso de las ratas culebra japonesa


Desv. Est 19.18984106 7.02376917 23.6220236 19.1898411
Rata Lote 1 peso Lote 2 peso Lote 3 peso Lote 4 peso

1 257 247 241 236


2 229 229 235 231
3 219 217 217 216
4 196 203 205 214
Promedio 231.25 224 222.5 224.25

Desv. Est 25.276801 18.6547581 16.5227116 10.9048919

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ratas
300
aleatorio
culebra japonesa
200
peso(g)

100

0
1 2 3 4
o te o te o te o te
l l l l
lotes
Media de los pesos de los diferentes lotes de ratas con base a los métodos
de distribución aleatoria y culebra japonesa utilizando una ANOVA
unifactorial no presentándose diferencias significativas entre los grupos

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Registro de la distrib de peso de los ratones método aleatorio
Ratón Lote 1 peso Lote 2 peso Lote 3 peso Lote 4 peso

1 27 32 38 40
2 26 26 32 30
3 36 35 31 32
4 34 27 35 30
5 28 32 38 31
6 32 32 27 30
Promedio 30.5 30.6666667 33.5 32.1666667

Desv. Est 4.086563348 3.44480285 4.32434966 3.92003401

Registro de la distrib de peso de los ratones culebra japonesa


Ratón Lote 1 peso Lote 2 peso Lote 3 peso Lote 4 peso

1 40 38 38 36
2 32 34 35 35
3 32 32 32 32
4 30 31 31 32
5 30 30 28 27
6 26 26 27 27
Promedio 31.6666667 31.8333333 31.8333333 31.5

Desv. Est 4.63321343 4.02077936 4.16733328 3.8340579

25
ratones
40
aleatorio
culebra japonesa
30
peso(g)

20

10

0
1

4
te

te

te

te
lo

lo

lo

lotes lo

Media de los pesos de los diferentes lotes de ratones con base a los métodos
de distribución aleatoria y culebra japonesa utilizando una ANOVA (P>0.05)
unifactorial no presentándose diferencias significativas entre los grupos
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Conclusiones
• No existe diferencia significativa entre el método aleatorio y la
culebra japonesa, según el programa estadístico.
• Se aprendió la técnica correcta de marcaje en animales por la
técnica de manchado, de acuerdo a la NOM-062-ZOO.
• Se aprendió el manejo apropiado para cada tipo de animal de
experimentación.

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Bibliografía
• NORMA Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999, Especificaciones
técnicas para la producción, cuidado y uso de los animales de
laboratorio.
• NORMA Oficial Mexicana NOM-003-ZOO-1994, Criterios para la
operación de laboratorios de pruebas aprobados en materia
zoosanitaria.
• NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-033-SAG/ZOO-2014, MÉTODOS
PARA DAR MUERTE A LOS
ANIMALES DOMÉSTICOS Y SILVESTRES
• NORMA Oficial Mexicana NOM-062-ZOO-1999, Especificaciones
técnicas para la producción, cuidado y uso de los animales de
laboratorio.
Referencia electrónica:
www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/ consultada miércoles 28
de marzo de 2018 22:45 hrs

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