PRUEBA INICIAL DE DESEMPEÑO

PARA MÉTODOS FISICOQUÍMICOS

QFB. GUILLERMO VEGA RODRÍGUEZ

Calidad de los resultados

Control de calidad
Métodos validados

Acreditación
Ensayos de aptitud
Concepto de validación

“Confirmación, mediante la examinación

y presentación de evidencia objetiva de
que los requerimientos para un uso
particular son totalmente cumplidos.”

8402
Aplicaciones de la validación
Validación en el diseño

Validación cuando se diseña y

desarrolla un método de medición
para demostrar que cumple con los
requisitos para los cuales se
establece.
Prueba inicial de desempeño

Es la validación que realiza un

laboratorio para demostrar que el
método de ensayo ha sido establecido de
acuerdo al método normalizado.

Evidencia objetiva de la confirmación del

método normalizado para demostrar que
cumple las especificaciones del mismo y
cuenta con la competencia técnica para
realizarlo adecuadamente tomando en
consideración sus propias instalaciones,
equipo y personal.
Decálogo de la Validación
Método normalizado

Método que siempre mide igual y

cuyas variables de influencia
están controladas.
Métodos normalizados
Métodos normalizados
Métodos normalizados
 AOAC

1. Agricultural Liming Materials

2. Fertilizars
3. Plants
4. Animal Feed
5. Drugs in Feeds
6. Disinfectants
7. Pesticide formulations 25. Baking Powders and Baking Chemicals
8. Hazardous substances 26. Distilled Liquors
9. Metals and other elemental at trace levels in foods 27. Malt beverages and Brewing Materials
10. Pesticide and industrial chemical residues 28. Wines
11. Waters; and Salt 29. Nonalcoholic Beverages and Concentrates
12. Microchemical methods 30. Coffee and Tea
13. Radioctivity 31. Cacao Bean and Its Productcs
14. Veterinary Analytical Toxicology 32. Cereal Foods
15. Cosmetics 33. Dairy Products
16. Extraneous Materials: Isolation 34. Eggs and Eggs Products
17. Microbiological Methods 35. Fish and Other Marine Products
18. Drugs: Part I 36. Flavors
19. Drugs: Part II 37. Fruits and Fruit Products
20. Drugs: Part III 38. Gelatin, Dessert Preparations and Mixes
21. Drugs: Part IV 39. Meat and Meat Products
22. Drugs: Part V 40. Nuts and Nuts Products
23. Drugs and Feed Additives in Animal Tissues 41. Oils and Fats
24. Forensic Sciences 42. Vegetable Products, Processed
43. Spices and Other Condiments
44. Sugar and Sugar Products
45. Vitamins and Other Nutrients
46. Color Additives
Official Methods of Analysis 47. Food Additives: Direct
48. Food Additives: Indirect
of AOAC International 49. Natural Toxins
18 th. Edition, 2005 50. Infant Formulas, Baby Foods and Enteral
Products
51. Dietary Suplements
FEUM

Volumen I

 Historia de la Farmacopea Mexicana

 Legislación Sanitaria
 Principios Generales de Buenas Prácticas de Laboratorio
 Generalidades
 Soluciones y Reactivos
 Métodos Generales de Análisis
 Envases Primarios
 Agua para Uso Farmacéutico
 Monografías de Aditivos
 Monografías de Radiofármacos
 Monografías de Fármacos
Volumen II

• Pruebas Básicas para Sustancias Farmaceuticas

• Monografías de Preparados Farmaceuticos
• Monografías de Prueba de Intercambiabilidad
• Métodos de Productos Biológicos
• Monografías de Productos Biológicos
• Monografías de Hemoderivados
• Estadística para Ensayos Biológicos

Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos

Octava Edición. México 2004
Standard Methods

Part 1000 Introduction

Part 2000 Physical and Aggregate Properties
Part 3000 Metals
Part 4000 Inorganic nonmetallic constituents
Part 5000 Aggregate Organic Constituents
Part 6000 Individual Organic Compunds
Part 7000 Radioactivity
Part 8000 Toxicity
Part 9000 Microbiological Examination
Part 10000 Biological Examination

Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater

21 st. Edition, 2005
PAM

Pesticide Analytical Manual Vol. I

3rd. Edition, 1994
Revised, October 1999
FDA. U.S. Department of Health and
Human Services
Food and Drug Administration
Métodos EPA
USP

Volumen 1

Advertencias y Requisitos Generales

Pruebas y Valoraciones Generales
Reactivos, Indicadores y Soluciones
Tablas de Referencia
Suplementos Dietéticos
Monografías Oficiales
Volumen 2

Monografías Oficiales

Farmacopea de los Estados Unidos de América

Formulario Nacional. Compendios de Normas Oficiales
USP 30,NF-25, 2007
Confirmación del método

Criterios NMX-17025
Validación parcial

Criterios NMX-17025
Prueba inicial de desempeño
Objetivos de la validación

 Métodos normalizados
 Métodos normalizados fuera
del alcance previsto
 Ampliaciones y
modificaciones del método
normalizado
 Métodos desarrollados por el
laboratorio
Campo de aplicación

VOLUMÉTRICAS Y
ESPECTROFOTOMÉTRICAS CROMATOGRAFÍA POTENCIOMÉTRICAS GENERALES
Pruebas espectrofotométricas

M
E
T
A
L
E
S

Alcoholes superiores Nitratos

Cianuros Nitritos
Furfural Fosfatos
Metanol Fenol y cresol
Cafeína PRP
Sulfatos Tiomersal
SAAM Valoración y/o pureza
Pruebas cromatográficas

Colorantes
Conservadores
Histamina
Valoración y/o pureza
Residuos
Formalehído

Carbamatos
Micotoxinas
Pruebas cromatográficas

Plaguicidas clorados
Trihalometanos
Herbicidas

Plaguicidas fosforados
Pruebas cromatográficas

Compuestos orgánicos semivolátiles

Compuestos orgánicos volátiles
Bifenilos policlorados
Hidrocarburos aromáticos
Pruebas volumétricas y potenciométricas

Acidez Yodato
Índice de peróxidos Esteres
Cloruros Sulfatos
Dureza Nitrógeno amoniacal
Aldehídos Proteína
Bióxido de azufre Valoración y/o pureza
Yoduro Aluminio

pH
Fluoruros

Agua por Karl-Fisher

Pruebas generales

Residuo de la ignición
Residuo de la evaporación
Pérdida por secado
Extracto etéreo
Variación de volumen
Matrices
Linealidad

Habilidad para asegurar que los

resultados obtenidos directamente
o por medio de una
transformación matemática

Respuesta analítica
definida, son proporcionales a la
concentración del analito, dentro
de un intervalo determinado.

Concentración
Linealidad del Sistema

Respuesta analítica
µg/L
Curva A Curva B Curva C

0.00 0 0 0

0.50 318 330 317

1.00 786 779 785

2.00 1619 1595 1627

4.00 3132 3227 3208

8.00 6639 6569 6655

m 830.53 825.12 834.81

r2 0.9992 0.9999 0.9996

r 0.9996 0.9999 0.9998

b -63.20 -48.23 -57.91

Linealidad del Método

Blanco Cantidad Cantidad Cantidad promedio

adicionado adicionada recuperada recuperada
1 2.10
2 2.00 2.08 2.03
3 1.90
4 4.07
5 4.00 4.10 4.02
6 3.90
7 6.10
8 6.00 6.00 6.10
9 6.20
10 8.10
11 8.00 7.90 7.97
12 7.90
13 10.10
14 10.00 10.10 10.13
15 10.20
16 12.10
17 12.00 12.05 12.08
18 12.10
m 1.0069
r2= 0.9998
r= 0.9999
b 0.0076
Linealidad del método

14.00

Cantidad recuperada
12.00
10.00
8.00
6.00 y = 1.006x + 0.007
4.00 R² = 0.999
2.00
0.00
0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00
Cantidad adicionada
Precisión

Grado de concordancia
entre resultados de
medidas repetidas

◘ Se expresa como la
desviación estándar (s)
◘ Se mide a través de la
repetibilidad y la
reproducibilidad
Repetibilidad (r) y reproducibilidad (R)

Describen la variabilidad de un método de medición.

Repetibilidad (r) y reproducibilidad (R)
Cálculo de repetibilidad (r)

Analista 1 Analista 2

N1 N1 N2 N3 N1 N2 N3

0.71 1.68 3.14 0.67 1.77 3.08

N2
0.70 1.77 3.26 0.65 1.70 3.24
N3
0.71 1.68 3.31 0.66 1.68 3.15

0.69 1.71 3.23 0.74 1.71 3.32

0.68 1.79 3.23 0.69 1.64 3.19

0.66 1.75 3.35 0.69 1.63 3.12

N1 x 0.69 1.73 3.25 0.68 1.69 3.18

s 0.02 0.04 0.07 0.03 0.05 0.09

N2 CV 2.56 2.47 2.04 4.69 3.03 2.73

N3 s2 0.00031 0.00183 0.00442 0.00103 0.00262 0.00755

r= 0.07 0.13 0.22

Cálculo de reproducibilidad (R)

N1

N2 Promedios

N3 N1 N2 N3

Analista 1 0.69 1.73 3.25

Analista 2 0.68 1.69 3.18
x 0.69 1.71 3.22
s 0.006 0.029 0.049
N1 CV 0.86 1.72 1.54

N2 R= 0.10 0.18 0.30

N3
Gráficos r y R
Exactitud
Cálculo de % de recobro

N1
Cantidad recuperada
N2 Muestra Muestra sin
adicionar N1 N2 N3
1 5.00 200.20 251.57 301.57
N3 2 4.98 199.83 250.50 300.50
3 4.96 201.78 250.53 300.53
Muestras adicionadas 4 4.94 202.44 249.42 299.42
5 4.91 203.14 251.58 301.58
6 4.94 201.99 251.56 301.56

x 4.96 201.56 250.86 300.86

s 0.032 1.292 0.875 0.875
CV 0.65 0.64 0.35 0.29

% Recobro 98.30 98.36 98.64

Muestras sin adicionar

Límites de detección y cuantificación

LIMITE DE DETECCIÓN

Es la cantidad más baja del analito que puede

detectarse, pero no necesariamente
cuantificarse como una concentración o
cantidad exacta.

LIMITE DE CUANTIFICACIÓN

Es la cantidad más baja del analito que puede

cuantificarse con una precisión y exactitud
aceptables.
Cálculo de límites de detección y cuantificación

Muestra Cantidad
adicionada recuperada
1 5.22
2 5.22
3 5.49
4 5.30
5 5.07
6 5.62
7 5.17
8 5.42
9 5.15
10 5.36
x 5.30

s 0.17
CV 3.22

LD 0.51
LC 1.70
Parámetros de validación por tipo de método

Medicamentos y productos biológicos Alimentos y agua

Parámetro Impurezas y Residuos

Disolución o Generales y
Contenido compuestos de orgánicos y
liberación volumétricos
degradación contaminantes

Linealidad del sistema  X   X

Linealidad del método

    

Repetibilidad
    

Reproducibilidad
    

% Recobro
    

Límite de detección X X   X

Límite de cuantificación X X   X
Efecto de modificaciones al método de prueba

Modificación Posible efecto sobre:

Método de
% Recobro
extracción
Matriz de la Especificidad, %
muestra recobro
Cambios en el pH Robustez
Cambio de Repetibilidad, límite de
operador detección, veracidad
Intervalo de trabajo,
Detección
linealidad, especificidad
Control de calidad

Confirmación de que un
método de medición
implementado en el
laboratorio cumple con los
requisitos establecidos en la
validación de diseño
Control de calidad
Referencias consultadas
No podemos contra el viento pero,
podemos construir molinos

Gracias