BIOINDICADORES DE

GENOTÓXICOS
AMBIENTALES

AGUA AIRE SUELO

 GENOTOXICO
• Agente capaz de
lesionar la integridad
del material genético o
sus componentes • Aumento de mutagénesis
asociados. • Interferencia de procesos
enzimáticos
• Reparación o generación de
Células epiteliales
proteínas involucradas en la
segregación cromosómica

• Células de la médula osea

1975
PRUEBA DE MICRONÚCLEOS
PARA DETERMINAR
GENOTÓXICOS AMBIENTALES

médula ósea eritrocitos

 ¿QUÉ SON LOS MICRONÚCLEOS ?

• Fragmentos de cromosomas o
cromosomas completos que
quedan fuera del núcleo
durante la metafase y anafase
de la mitosis.
• Forma: redonda, almendrada
• Diámetro: 0,4 1,6 micras
 ¿CÓMO SE FORMAN?

• Aneuploidogénicos: • Clastógenos:
radiaciones,

colchicina colchicina
medicamentos
antiemoplásicos
vincristina

vinblastina

• Bloqueo de la • Actúan como

polimerización de análogos de
micro túbulos bases
 ENSAYO MICRONÚCLEOS
Bloqueo de mitosis
citocalasina-B

Choque hipotónico
Solución salina CIK
0,075 M
• SIEMBRA • TRATAMIENTO
• MUESTRA: sangre
• Medio RPMI + Suero fetal
periférica bobino
• Proliferación celular
Bandeo • Incubación 44 h
cromosómico • Penicilina +fitohematoglutina
• 37ºC y 5% CO2

• TINCIÓN • FIJACIÓN
• EVALUACIÓN • CULTIVO
• Solución de
• Conteo por encima • Giemsa (5 a 10 Dispersión celular metanol
de células min) sobre porta objetos
binucleadas por goteo
 ENSAYO MICRONÚCLEOS
• Sondas centroméricas
Secuencias repetitivas de ADN

Alteraciones numéricas de núcleo

• Micronúcleos + en metafase e interface
centrómero =
cromosoma completo
• Sondas de pintado
cromosómico
Conjunto de sondas
Alteraciones numéricas y
estructurales, metafase
• Micronúcleo –
centrómero =
fragamento • Sondas de locus
cromosómico
acéntrico específico
Hibridación - región genómica
concreta
Alteraciones numéricas y
estructurales, metafase e interfase