REPARACIÓN POR

RECOMBINACIÓN
DE NO
HOMÓLOGOS
 ¿Qué es la recombinación?
• Proceso en el que las moléculas de ADN se rompen y los fragmentos se
vuelven a unir en nuevas combinaciones. Puede ocurrir en la célula viva- por
ejemplo, a través de entrecruzamiento durante la meiosis – o in vitro usando
ADN purificado y enzimas que descomponen y ligan las cadenas de ADN.
(Alberts et al, 2002).
 ¿Qué función tiene la recombinación?
• Al revolver los genes, permite que las mutaciones favorables y no favorables
sean separadas y probadas como unidades individuales.
• Esto permite que alelos favorables se distribuyan y los alelos no favorables
sean eliminados sin derribar a todos los genes asociados con el alelo.
• Reparación precisa de roturas de cadena doble.
 Tipos de recombinación
Existen dos tipos de recombinación:
• Recombinación generalizada o recombinación homóloga.
• Recombinación especializada o recombinación de sitio específico.
Enzimas involucradas en la recombinación
ENZIMA FUNCIÓN
Nucleasa Una enzima capaz de cortar los enlaces fosfodiéster entre
las subunidades de nucleótidos de los ácidos nucleicos.
Ligasa Una enzima que puede catalizar la unión de dos grandes
moléculas mediante la formación de un nuevo enlace
químico.
Rec-A Promueve la invasión cadena.
Ruv-AB Catalizan la migración de la ramificación, lo cual resulta en
el emparejamiento de dos cadenas homólogas de ADN.
Recombinasa Ampliamente utilizada en los organismos multicelulares
para manipular la estructura de los genomas, y para
controlar la expresión génica.
RECOMBINACIÓN
NO HOMÓLOGA
 Es una vía de reparación de doble roturas en la cadena de ADN. Se conoce
como “no homóloga” ya que los extremos de las roturas se ligan directamente,
sin la necesidad de una plantilla homóloga.

Esto puede causar translocaciones cromosómicas, a veces conduce al cáncer.

Mecanismos de reparación
de quiebres en cadena DSB
(double-strand breaks)
• Daños severos al ADN (corte en cadena doble)
• Pueden ser por causas endógenas y exógenas
• Inducen inestabilidad genómica (translocaciones y perdida de material
genético).
• En eucariotas un DSB mal reparado puede provocar inactivación de un gen
esencial (provocando apoptosis)
• Las células reparan DSB con éxito, pero si no el corte puede persistir y
provocar alteraciones importantes en el genoma.
• Existen dos vías para la reparación de las DSB.
• Recombinación homóloga y recombinación de extremos no homólogos.
 Reparación por
extremos no homólogos
• La reparación de quiebres de doble cadena en organismos superiores se da
por extremos no homólogos, esta reparación permite la unión de cadenas
por sus extremos, no necesita de secuencia complementaria u homologa para
su unión.
• El sitio de corte es reconocido por un complejo heterodímero de dos
proteínas KU70 Y KU80 que protege el ADN de la acción de las
exonucleasas y mantiene unidas las cadenas.
• El heterodímero se asocia por acción catalítica a la quinasa (DNA –Pkcs) que
se activa por la acción de la cadena sencilla con el DSB
• La ligasa VI y XRCC llevan a cabo la unión de cadenas
• El procesamiento de los DSB es realizado por el complejo MRE11-Rad50-
NBS1, el cual tiene actividad de exonucleasa, endonucleasa y helicasa.

• En el hombre, la reparación de DSB por la via no homologa es eficiente pero

puede provocar rearreglos cromosomales.
Reparación por extremos no homólogos
Representación por extremos homólogos
 ¿Cómo es que ocurre?
• El mecanismo principal de reparación de las roturas bicaternarias de ADN
en mamíferos es la “Fusión no homóloga de extremos” abreviada como
“NHEJ” en inglés.
• La aparición de una rotura bicatenaria un “DSB”
• El “DSB” hace que queden los extremos libres de ADN

• Y sobre estos se une un complejo llamado “DNA PKcs” formado por tres
subunidades, una subunidad catalítica la proteinquinasa de ADN (DNA PK)
y dos subunidades llamadas “KU 80” Y “KU 70”.
• Estas ( KU 80 y KU 70) se unen a los extremos y además reclutan otra proteína
llamada “Artemis” que es una nucleasa que procesa y digiere los extremos para
que después puedan ser religados

• Estos complejos mantienen unidos los extremos, los procesan y sobre esta
unión interviene otro complejo formado por “XRCC4” y la ligasa 4 “LIGIV”
estas sellan la unión…
• Y al final tenemos la molécula de ADN otra vez unida, habiéndose perdido
unos pocos de nucleótidos en la mayoría de los casos.