Familia

Bartonellace
ae

 GONZALES CHUMPEN HELEN ELVIRA

 GONZALES RODRÍGUEZ LUIS MIGUEL
 LOPEZ CABRERA ALPHA
 CLASIFICACION
 Dominio : Bacteria
 Filo : Proteobacteria
 Clase : Alfa Proteobacteria
 Orden : Rhizobiales
 Familia : Bartonellacea
 Género : Bartonella
 Especies : B. bacilliformis
B. alsatica
B. birtlesii
B. bovis
B. capreoli
B. clarridgeiae
B. doshiae
B. elizabethae
B. grahamii
B. henselae
B. rochalimae
 CARACTERISTIC
AS GENERALES
 Bacterias Gram negativas de forma bacilar.

 Son parásitos facultativos intracelulares que pueden infectar a personas sanas pero
normalmente son considerados patógenos oportunistas.

 La familia Bartonellaceae abarca dos géneros: Bartonella y Grahamella. El género

Bartonella era capaz de infectar al ser humano y desarrollaban cerca de la superficies
de eritrocitos de vertebrados. El género Grahamella desarrollaban preferentemente en
el interior de los eritrocitos de vertebrados, pero no infecta al ser humano.

 En 1984 en el Manual Sistemático de Bacteriología de Bergey solo se describía una

sola especie de Bartonella (B. bacilliformis), dos especies de Grahamella (G. talpae y
G. peromiset) y dos especies Rochalimaea (R. quintana y R. vinsonii).
 El género Bartonella ha sido reclasificado de acuerdo a las características
filogenéticas basado en datos de hibridación DNA-DNA y secuencia genética del
16SrRNA; Brenner realiza la primera propuesta que fue aceptada por la comunidad
científica, de unir el género Rochalimaea al de Bartonella y se removió la familia
Bartonellaceae del orden de las Rickettsiales. De esta unión surgieron las especies B.
bacilliformis, B. quintana, B. vinsonii, B. elizabethae y B. henselae.

 Posteriormente Birtles realiza una segunda propuesta para unir el género

Grahamella al de Bartonella, que también es aceptado

 El género toma su nombre de Alberto Leonardo Barton Thomp-son, un

científico peruano nacido en Argentina.

 Es trasmitida por insectos tales como garrapatas, pulgas, moscas de la

arena y mosquitos. Al menos ocho especies o subespecies de Bartonella
infectan a los seres humanos.
 Actualmente el género Bartonella contiene 14 especies, de los
cuales 7 han sido reportados en los últimos 5 años y siete son
patógenas para el humano

B.
bacilliformis
B. quintana
Patógen
os en B. vinsonii
humanos B. elizabethae
B. henselae
B. clarridgeiae
B. grahamii
 Oscilan en
tamaño desde en
en cultivo
cultivo
pequeñas presentan
presentan
estructuras un
un penacho
penacho
cocoides hasta de
de 11aa 10
10
formas largas flagelos
flagelos
en cadenas o
unipolares
unipolares
Suelen grupos.
aparecer
en los
eritrocitos
como No son
bacilos resistente
cortos s al acido
Morfología o al
alcohol.

son
son
pequeñas
pequeñas
bacterias
bacterias se tiñen
Gram
Gram débilmente con varian de 1
negativas colorantes de a 3 um de
negativas anilina pero
móviles
móviles y
y largo por
toman un color
notablement
notablement 0.25 a 0.5
rojo brillante a
e
e polimórfica.
polimórfica. púrpua con los um de
colorantes de ancho.
Wrigth y
Giemsa.
 FISIOLOGÍA

 Son aerobios obligados.

 La multiplicación y el mantenimiento en el laboratorio pueden lograrse usando

medios semisólidos libres de células que contengan agar, suero fresco de
conejo y hemoglobina de conejo.

 Su temperatura optima esta entre19-37ºC.

 Los cultivos se mantienen viables durante varios periodos cuando se les

conserva a -70ºC.

 En agar semisólido las colonias se presentan como cúmulos blancos de 1-5 mm

que aparecen de 1-2 semanas después de la inoculación.
 Pueden proliferar en el saco vitelino y la membrana corioalantoidea de un
huevo de gallina embrionado

 Si se siembra en medios que contengan una

variedad de azúcares no producen ni ácido ni
gas.

 No se ha demostrado la elaboración de
hemolisinas in vitro.

 Todas las cepas parecen ser similares en lo que

respecta a la morfología (colonias pequeñas,
puntiformes y translucidas), características de
crecimiento y reactividad antigénica.
 Bartonella bacilliformis

 Fue descrita en 1909 por Alberto Barton, es un bacilo gram negativo,

pleomórfico e intracelular.

 Es una bacteria, agente causal de la enfermedad de Carrión que sólo se

encuentra en Perú, Ecuador y Colombia. Es endémica en algunas áreas de
Perú y transmitida por el mosquito del género Lutzomía.
 Características Características
morfológicas fisiológicas

 Aerobios obligados, no
 Adopta formas cocoide, ovoide, fermentativo, no utiliza los
cocobacilar y bacilar (Pleomorfismo) carbohidratos.
 crece lentamente en medios
 Suelen aparecer en los eritrocitos enriquecidos con sangre y
como bacilos cortos aminoácidos esenciales, como el de
Seneckii o agar Columbia (No
 Mide de 0.25 - 0.5um de ancho por produce hemólisis).
1-3um de largo.
 se tiñe de color rojo con Giemsa
 Presenta un penacho de 1-10
flagelos unipolar que le confiere alta  puede ser cultivada sobre medios
movilidad sólidos a partir de muestras de
sangre, biopsias de lesiones
eruptivas o nódulos subcutáneos,
 Características
fisiológicas

 Su desarrollo se realiza de 28-37°C, su

temperatura óptima de crecimiento es 28ºC.

 No crecen en medio de agar Mac Conkey o agar nutritivo.

 Las colonias son pequeñas, puntiformes y translúcidas, de borde

entero; otras son ligeramente más grandes blanquecinas, de borde
entero y se adhieren a la superficie del agar

 Son oxidasa negativa, catalasa positiva, ureasa e indol negativo.

 Son móviles, lo que se observa en el medio de gel de fases,

forman una banda de desarrollo bacteriano de aproximadamente
6 mm, con migración del cultivo desde el trazo de inoculación
hacia las paredes del tubo.
Bartonella
Bartonella bacilliformis en
bacilliformis en las
las células
células de
de la
la
sangre
sangre preparada
preparada para
para el
el examen
examen
microscopio
microscopio electrónico que muestra la
electrónico que muestra la
Bartonella
pared celular (pb), la membrana
pared celular (pb), la membrana celular celular bacilliformis con
(MC),
(MC), el
el citoplasma
citoplasma (c),
(c), yy en
en la
la región
región flagelos unipolares.
nucleoide
nucleoide (N)
(N) Microscopía electrónica.
 CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS PARA LA
IDENTIFICACIÓN DE ESPECIES DE
BARTONELLA

Característica B. bacilliformis B. quintana B. henselae

T° óptima de crecimiento 25 – 30 °C 35 – 37 °C 35 – 37 °C

Hemolisis - - -

Oxidasa - v -

Catalasa + v -

Reducción de nitrato - - -

Ureasa - - -

Indol - - -

Acetoina - - -

Glucosas O/F -/- -/- -/-

Flagelos + - -
 ESTRUCTURA
ANTIGENICA
 Se han identificado 24 antígenos por inmuno precipitación y Westen
blot usando suero de conejo y de pacientes con anticuerpos antibarto-
nela.
 Los antígenos han sido designados de acuerdo a su peso molecular que
varía de 16 a 160 KDa. De estos al menos 6 (antígenos, 18, 26, 36, 48,
65, 78) son capaces de detectar anticuerpos específicos en suero de
pacientes bartonelocicos.
 Loa antígenos, 50, 65 y 75 pueden detectar anticuerpos persistentes.
 Los antígenos 65 y 75 son considerados como los principales antíge-nos
debido a que siempre presentan fuerte reactividad
 A diferencia de los antígenos crudos, los antígenos proteicos reaccio-
nan específicamente con la especie cuando se usa Western blot o
inmunoprecipitación, por lo que es recomendable para la confirmación
de especie cuando se detectan anticuerpos con antígenos crudos.
 FACTORES DE
VIRULENCIA
 Deformina:
Es una proteína extracelular de 67 kDa, es inactivada por proteasas y calor a 70-
80ºC . Produce profundas invaginaciones en la membrana del eritrocito. Las fosas y
surcos producidas por la deformina purificada son morfológicamente similares a las
observadas en células infectadas por B. bacilliformis.

 Motilidad:
Bartonella bacilliformis es una bacteria que tiene múltiples flagelos unipolares que
le dan gran movilidad. Los flagelos han sido aislados y purificados. Utilizando
anticuerpos dirigidos contra el flagelo purificado se ha determinado que el
componente principal del flagelo es una proteína de 42 kDa llamada flagelina. El
gen de la flagelina a sido clonado y secuenciado46 y está estrechamente
relacionado al gen flagelar de Rhizobium meliloti y Azospirillum brasilense . Es
posible que exista un segundo gen flagelar para B. bacilliformis, sin embargo no ha
sido localizado.
 CICLO DE INFECCION

 Los vectores de transmisión son los artrópodos hematófagos y los

reservorios son mamíferos.
 Inmediatamente después de la infección, las bacterias colonizan su
nicho principal, las células endoteliales.
 Cada cinco días, se libera una parte de la población de Bartonella de las
células endoteliales en el torrente sanguíneo, donde infec-tan a los
eritrocitos.
 Las bacterias invaden y se replican dentro de una membrana fago-
somial en el interior de los eritrocitos.
 Las bacterias se multiplican dentro de los eritrocitos hasta que al-
canzan una densidad de población crítica. En este punto, Bartonella
espera a que los artrópodos hematófagos succionen estos eritrocitos.
 Una vez que la B. bacilliformis ha alcanzado al eritrocito se dan las siguientes
pasos
 Adherencia
 Invasión
 Persistencia
Proteínas de superficie bacteriana:
DEFORMINA, produce invaginaciones,
hoyos y trincheras en la membrana del
eritrocito, fa-vorece la colonización y la
entrada a la célula, es sensible al calor
r (70 - 80°) e inactivada por proteasas,
la kanamicina inhibe su síntesis.
El flagelo le sirve para desplazarse, las
bacterias reciben información del exterior
por medio de quimioreceptores que se
encuentran en la superficie de la pared
bacteriana, si el medio es adecuado se
suspenderá el movimiento, actúa como
un coayudante en la invasividad o
penetración al eritrocito.
 DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO.

1. Diagnostico por frotis de sangre periférica

Durante la fase aguda, este es el método más

práctico, aunque no el más sensible. La tinción
puede realizarse con Wright o Giemsa.
Recomendamos este último utilizando la técnica
de coloración con la lámina invertida para evitar
la precipitación del colorante sobre la lámina y
evitar los falsos positivos.

Al inicio de la fase aguda se puede observar las

formas bacilares (forma tóxica de la bacteria),
posteriormente las cocobacilares y hacia el final
de la fase aguda las cocoides (formas benignas).
2. Diagnostico por métodos moleculares.

La única manera de poder identificar las diferentes especies de Bartonella es

aislando la cepa a partir de una muestra biológica y realizando su posterior
secuenciamiento genético de los productos amplificados por PCR. Las muestras
biológicas para aislar B. bacilliformis pueden ser sangre venosa, aspirado de
medula ósea, biopsia de lesiones verrucosas o de órganos, liquido pericardico,
liquido cefaloraquideo, etc.

3. Cultivos en Agar.

B. bacilliformis puede ser cultivado en Agar Columbia enriquecido con 5% de

sangre de carnero o conejo e incubado a 28ºC y pH de7,8.

Debido a que su crecimiento es muy lento, los cultivos deben ser mantenidos
hasta por 8 semanas para ser considerado como negativo. Se puede incrementar
la sensibilidad realizando subcultivo ciego a partir de los cultivos primarios
negativos.
 Para el aislamiento de B. henselae, B. quintana u otras especies de
Bartonella se utiliza el mismo medio pero debe de incubarse a mayor
temperatura y en una atmósfera con 5% de CO2.

 Agar BHI suplementado con sangre y agar tríptico-

soja también es adecuado para B. henselae.

 Las características de las colonias podrían ayudar a identificar las

diferentes especies de Bartonella. Por ejemplo, B. elizabethae y B.
vinsonii crecen rápidamente y forman grandes colonias; B. quintana
crecen más lentamente y forman pequeñas colonias lisas, planas,
pequeñas y no penetran el agar, es la única que crece mejor a 30ºC.
 Las colonias de B. henselae típicas son
blancas, secas, adherentes, tienen un
aspecto similar a del coliflor,
embebidas en el agar, de morfología
heterogenia.
 Después de varios días se tornan
menos secas, menos adherentes, más
grandes y su crecimiento es más
rápido. Su aislamiento es de 28-30°C,
con CO2 al 5%, durante 2 a 3 semanas,
no desarrollan en condiciones
anaeróbicas ni temperatura de 25 o
42.
 Cultivo puro en placas con agar
Columbia con sangre de cinco, seís y 9
días de incubación. Colonias de B.
bacilliformis en agar
sangre
 ENFERMEDAD

Bartonella bacilliformis es el agente etiológico de la enfermedad de Carrion o

fiebre de la Oroya (fase aguda de la infección) y Verruga peruana (fase crónica
de la infección).

• Fase aguda : Enfermedad severa caracterizada por una invasión masiva de

la Bartonella a los eritrocitos y consecuentemente una hemólisis aguda
asociada a fiebre. Si la infección no es tratada, la tasa de mortalidad puede
alcanzar hasta un 85%. Los pacientes en esta fase pueden complicarse con
infecciones sobregaregadas por, principalmente,Enterobacterias (Salmonella
spp) y parásitos (Toxoplasma gondii, Pneumocystis jirovecci).
• Fase crónica : Caracterizada por lesiones eruptivas benignas que son
pruríticas y sangrantes y otros síntomas como malestar y dolor
osteoarticular.Bartonella puede ser aislada de hemocultivos y secreción de
las lesiones en personas de áreas endémicas.