Facultad de Ingeniería Química

Lic. Institucional en Química Aplicada

Métodos de separación no cromatográficos

RECUBRIMIENTO DE OXIDO DE
GRAFENO/ POLIETILENGLICOL PARA LA
EXTRACCIÓN DE FLOUROQUINOLONAS
EN CARNE E HÍGADO DE POLLO CON
BARRAS DE AGITACIÓN MAGNÉTICA
EQUIPO:
JOSÉ PABLO AVALOS HERNÁNDEZ
YAZMANY ALONSO BATÚN QUIJANO PROFESOR:
WILLIAM ABRAHAM MAY CEN JESÚS ALBERTO BARRÓN ZAMBRANO
MARÍA PATRICIA PINTO FRANCO
FLOUROQUINOLON
AS
• Son antibióticos para infecciones respiratorias e intestinales en humanos y
animales
• Su amplio uso en animales y sus derivados alimenticios procesados, han
generado que se presenten alergias en personas hipersensibles y el temor de
que se genere resistencia.
• La Unión Europea tiene regulaciones acerca los limites máximos de residuos
(MRLs) para diversos antibióticos de este grupo:

Compuesto Enrofloxacin Difloxacina Flumequina (en aves)

MRL (µg/kg) 100-300 300-1900 250-1000
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OTRAS TÉCNICAS Y MÉTODOS PARA SU
ANÁLISIS
• Para el análisis se usa HPLC y electroforesis
capilar, por tener una buena resolución, alta
reproducibilidad y fácil automatización.
• Son más usados por alta sensibilidad y bajo costo
que la espectrometría de masas, UV y detección de
fluorescencia (FLD).

• En los alimentos derivados de animales está a

nivel de trazas y la matriz de muestra es bastante
complicada.

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• Se requiere un pretratamiento para retirar la matriz de la muestra y
enriquecer las fluoroquinolonas antes del análisis instrumental.
• La extracción líq. – líq. (LLE) y la extracción en fase sólida (SPE) son
comúnmente usadas para la preparación de la muestra.

• Sin embargo estos métodos requieren grandes cantidades de solventes

orgánicos, además los procedimientos son largos, que consumen mucho
tiempo, los cuales pueden causar contaminación y pérdidas del analito
o exactitud.
• El método más adecuado es la extracción con barras de agitación magnéticas
(SBSE) dado que es amigable con el ambiente por ser una técnica de
microextracción y por su sencillez, rapidez y alta eficiencia.
Fase PDMS Este método es muy
La falta de revestimientos, de aplicado en muestras en
las barras de agitación, con áreas biológicas,
Recubrimiento
mayor afinidad para analitos de vidrio ambientales y de
polares o menos polares, alimentos.
limita la amplia aplicación de
la SBSE.

• Se tiene conocimiento de que un recubrimiento basado en poly(methacrylic acid-3-

sulfopropyl ester potassium salt-divinylbenzene) puede extraer 4 fluoroquinolonas en aguas
residuales, esto por intercambio catiónico e interacciones hidrofóbicas.
ÓXIDO DE GRAFENO (GO).
• El óxido de grafeno consiste en una cadena hexagonal de carbonos
con grupos hidroxilos y epóxidos en el plano basal y grupos
hidroxilo, epóxidos y carboxilos en los bordes.

• Debido a la alta área superficial, apilamiento electrostático π-π y alto contenido de oxígenos
ofrecen abundantes sitios para analitos polares y menos polares.

• Sin embargo, por la agregación irreversible y la

solubilidad del GO en agua, causan que los
revestimientos de este material no sean adecuados, ya
que su preparación tiene poca reproducibilidad y su
desempeño es bajo, no se ha preparado una barra con
este revestimiento para muestras reales.
• Para mejorar el rendimiento y
durabilidad se han desarrollado
compuestos de GO/polímero

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GO/PEG Y GO/PAN
• Por polimerización in situ el GO reacciona con el polímero por interacciones intermoleculares.
• Estos compuestos pueden ser: GO/polietilenglicol(PEG), GO/polianilina(PAN), entre otros. En
este trabajo GO/PEG y GO/PAN son sintetizados por el método de solution co-blending y
polimerización in situ respectivamente. Y recubren la barra por la técnica sol-gel.

Pueden extraer cinco fluoroquinolonas (Con PEG

más eficiente):
El método se realizó en muestras de músculo e
• Pefloxacina
hígado de pollo.
• Norfloxacina
El análisis de las cinclo fluoroquinolonas se realizó
• Ciprofloxacina
según SBSE-HPLC-FLD para su validación.
• Enrofloxacina
• Lomefloxacina 7
 Parte
experimental
REACTIVOS
• Se utilizaron cinco flouroquinolonas que fueron preparadas a 500mg/L en
metanol y se conservaron en refrigeración (4º C) lejos de luz directa.

• Pefloxacina (PEF) • Ciprofloxacina (CIP)

• Norfloxacina (NOR) • Enrofloxacina (ENR)

• Lomefloxacina (LOM)

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REACTIVOS
• Los shingos de reactivos y la fase móvil van aquí

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EQUIPOS Y DISPOSITIVOS
• HPLC Agilent 1100 de bomba cuaternaria, desgasificador, inyector de 100µL,
detector UV (450nm) y detector fluorescente (270nm).
• Placa de agitación magnética
• Sonicador (procesador ultrasónico)
• Potenciómetro
• Moledora de carne eléctrica

• Para caracterizar el recubrimiento

• FT-IR
• Microscopio de barrido electrónico

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PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
• Se consiguió carne e hígado de pollo en mercado local (Wuhan, China)
Se liofilizó para Se toman 2g y se
Se molió hasta
Se molió la carne remover diluyó en 20mL
obtener polvo
humedad de agua

Centrifugado a Se agitó en
Se tomo el Sonificado
4,000rpm vortex durante
sobrenadante durante 15min
durante 5min 1min

El residuo volvió El sobrenadante

Se ajustó a pH 3
a pasar por el se combina con
con HCl 1M
mismo proceso el primero
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SINTESIS DEL RECUBRIMIENTO

• Lo más basic posible, el punto es la barra, no síntesis de polimeros

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RECUBRIMIENTO

• Lo más basic posible, el punto es la barra, no síntesis de polimeros

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SBSE

10mL de
Se agrega la Se selló el
muestra en
barra con GO vial
vial de 25mL

Se colocó en Se retiró la barra Se coloco en vial

50min agitación y y se limpio con de desorción
800rpm temperatura agua y papel sellado con
constante filtro parafilm

Equipo Se filtró con

100µL de Se inyectó al
ultrasónico membrana
100mM NaOH HPLC
durante 10min 0.22µm

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RESULTADOS
EL COPOLIMERO Y SU CONCENTRACIÓN

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¿POR QUÉ NO USAR PDMS?

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OPTIMIZACIÓN DEL SBSE
pH Añadir NaCl

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EFICIENCIA ANALÍTICA DEL MÉTODO

• Describir qué detector se usó para obtener los datos

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EFICIENCIA ANALÍTICA DEL MÉTODO

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EFICIENCIA ANALÍTICA DEL MÉTODO

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ANALISIS DE MUESTRA

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CONCLUSIONES

• Este método analítico es viable para la determinación de varios

flouroquinolonas en muestras animales. Debido a su sensibilidad y alto
porcentaje de recuperación.
• Otros.

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BIBLIOGRAFÍA

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