ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Alejandra Medina Cuellar

Yuliana Muñoz Bastidas
Duver Alfonso Rebolledo
 ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica y estructural que catalizan reacciones
químicas, en estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas
sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos.

Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen, ni

modifican, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar el proceso incluso millones
de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima, o de un catalizador
en general, alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción no
catalizada.
Mecanismo de acción:
1. El sustrato hace contacto con el centro o sitio activo.
2. Se forma un complejo intermedio llamado enzima-sustrato.
3. La molécula de sustrato se transforma por reorganización de los
átomos, por rotura, o por combinación de varias moléculas de sustrato.
4. El sustrato transformado ,los productos de reacción, se liberan de la
molécula de enzima.
5. La enzima, ahora libre, puede reaccionar con otras moléculas de
sustrato.
FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA
Concentración del sustrato:
Al aumentar la concentración de sustrato se
incrementa la velocidad de la reacción. Esto se
debe a que más moléculas de sustrato
colisionarán con las moléculas de enzima, por
lo que se formará el producto más
rápidamente.
No obstante, al superar cierta concentración
de sustrato no habrá ningún efecto sobre la
velocidad de la reacción, pues la enzimas
estarían saturadas y funcionando a su máxima
velocidad.
 Concentración de enzimas:
A medida que aumenta la
concentración de enzimas, la
velocidad de la reacción aumenta de
manera proporcional. Sin embargo,
esto es así solo hasta cierta
concentración, pues en un momento
determinado la velocidad se hace
constante.

Temperatura:
A medida que aumenta la temperatura
aumenta la actividad enzimática y, en
consecuencia, la velocidad de la reacción.
Sin embargo, las temperaturas muy altas
desnaturalizan las enzimas, esto significa
que el exceso de energía rompe los enlaces
que mantienen su estructura haciendo que
no funcionen de manera óptima.
pH
Los cambios en la concentración de iones
hidrógeno (pH) influyen considerablemente en
la actividad de las enzimas. Debido a que estos
iones poseen carga, generan fuerzas de
atracción y repulsión entre los enlaces de
hidrógeno e iónicos de las enzimas. Esta
interferencia produce cambios en la forma de
las enzimas, afectando así su actividad.

Cada enzima tiene un pH óptimo en el que la

velocidad de reacción es máxima. Así, el pH
óptimo para una enzima depende de dónde
funciona normalmente.

Por ejemplo, las enzimas intestinales tienen un

pH óptimo de aproximadamente 7.5
(ligeramente básico). En contraste, las enzimas
en el estómago tienen un pH óptimo de
aproximadamente 2 (muy ácido).
PRINCIPIOS DE CINÉTICA ENZIMÁTICA
CINÉTICA ENZIMÁTICA:
La cinética enzimática estudia la
velocidad de las reacciones químicas
que son catalizadas por las enzimas.
la cinética enzimática puede mostrar
también el orden en el que se unen
los sustratos y el orden en el que los
productos son liberados.
 PRINCIPIOS GENERALES

• La reacción química catalizada por una enzima utiliza la misma cantidad

de sustrato y genera la misma cantidad de producto que una reacción no
catalizada.
• Al igual que ocurre en otros tipos de catálisis, las enzimas no alteran en
absoluto el equilibrio de la reacción entre sustrato y producto.
• La eficiencia de la reacción: hasta el momento en que todos los sitios
posibles estén ocupados. En ese momento se habrá alcanzado el punto
de saturación de la enzima y, aunque se añada más sustrato, no
aumentará más la eficiencia de la misma
 La velocidad de una reacción catalizada por un
enzima puede medirse con relativa facilidad, ya
que en muchos casos no es necesario purificar o
aislar el enzima.
La medida se realiza siempre en las condiciones
óptimas de pH, temperatura, presencia de
cofactores, etc., y se utilizan concentraciones
saturantes de sustrato.
En estas condiciones, la velocidad de reacción observada es la
velocidad máxima (Vmax). La velocidad puede determinarse
bien midiendo la aparición de los productos o la desaparición
de los reactivos.
se puede observar la típica evolución de una curva
obtenida en un ensayo enzimático. Inicialmente, la
enzima transforma el sustrato en producto
siguiendo un comportamiento lineal. A medida que
avanza la reacción, se va agotando la cantidad de
sustrato y va disminuyendo la cantidad de producto
que se genera por unidad de tiempo (disminuye la
velocidad de la reacción).

Dependiendo de las condiciones del ensayo y del

tipo de enzima, el período inicial puede durar
desde milisegundos hasta horas.
Para estudiar la cinética enzimática se mide el efecto
de la concentración inicial de sustrato sobre la
velocidad inicial de la reacción, manteniendo la
cantidad de enzima constante.

Si representamos v0 frente a [S]0 obtenemos una

gráfica como la de la Figura de la derecha. Cuando
[S]0 es pequeña, la velocidad inicial es directamente
proporcional a la concentración de sustrato, y por
tanto, la reacción es de primer orden. A altas [S]0, el
enzima se encuentra saturada por el sustrato, y la
velocidad ya no depende de [S]0. En este punto, la
reacción es de orden cero y la velocidad es máxima
(Vmax).
 MODELO CINÉTICO DE
MICHAELIS-MENTEN

Leonor Michaelis y Maud

Menten desarrollaron esta
teoría y propusieron una ecuación
de velocidad que explica el
comportamiento cinético de las
enzimas.
Para explicar la relación observada entre la velocidad inicial
(v0) y la concentración inicial de sustrato ([S]0) Michaelis y
Menten propusieron que las reacciones catalizadas
enzimáticamente ocurren en dos etapas: En la primera etapa
se forma el complejo enzima-sustrato y en la segunda, el
complejo enzima-sustrato da lugar a la formación del
producto, liberando el enzima libre:
En este esquema, k1, k2 y k3 son las constantes cinéticas
individuales de cada proceso y también reciben el nombre
de constantes microscópicas de velocidad.
 LA ECUACIÓN DE
MICHAELIS-MENTEN
La ecuación de Michaelis y Menten describe como varía la
velocidad de reacción con la concentración de sustrato:
Características de Km:
la constante de Michaelis-Menten
es característica de una enzima y
particular para un substrato.
Refleja la afinidad de la enzima
por ese substrato. Km es
numéricamente igual a la
concentración de substrato a la
cual la velocidad de reacción es
la mitad de la Vmax (Km=
Vmax/2). Este parámetro, Km no
varía con la concentración de
enzima.
Relación de la velocidad con la concentración de enzima: la
velocidad de la reacción es directamente proporcional a la
concentración de la enzima a cualquier concentración de substrato.
Por ejemplo, si la concentración de enzima es disminuida a la mitad,
la velocidad inicial de la reacción (v0) es reducida también a la
mitad de la original.
Km:
Es un parámetro característico de
cada enzima. es la concentración de
[S] a la que se alcanza la mitad de la
Vmax y es una medida de la
afinidad.

• Si la Km ↑ : ↓ afinidad del E por S

• Si la Km ↓ : ↑ afinidad del E por S
 TIPOS DE INHIBICIÓN ENZIMÁTICA

Inhibidor : es una sustancia específica

que disminuye parcial o totalmente la
actividad enzimática. La unión de un
inhibidor puede impedir la entrada
del sustrato al sitio activo de la enzima
y/u obstaculizar que la
enzima catalice su reacción
correspondiente.
TIPOS DE INHIBICIÓN
ENZIMÁTICA
 INHIBICIÓN IRREVERSIBLE O
VENENOSO
el inhibidor se une covalentemente a la enzima, casi siempre a un
grupo de la cadena lateral de los amino ácidos en el foco activo. La
enzima queda inactiva permanentemente.
Este tipo de inhibición se conoce también como envenenamiento de
la enzima.
Por ejemplo, la aspirina o ácido acetilsalicílico (ASA) inhíbe
irreversiblemente la acción de la sintetasa de prostaglandina:
INHIBICIÓN REVERSIBLE:
La unión de la enzima y el inhibidor es temporal.
Impide el normal funcionamiento de la enzima, solo
mientras dura la unión.
el inhibidor puede disociarse de la enzima porque
no se une por enlaces covalentes, Si no
por puentes de hidrógeno, las interacciones
hidrofóbicas y los enlaces iónicos.
. Esta inhibición puede ser competitiva o no-
competitiva.
 INHIBICIÓN REVERSIBLE COMPETITIVA
El inhibidor es una molécula con una conformación espacial muy similar a la del sustrato
con el que compite para alojarse en el centro activo, impidiendo así la unión y posterior
transformación del sustrato.
INHIBICIÓN REVERSIBLE NO COMPETITIVA
El inhibidor se une en otra región distinta del centro activo y provoca un cambio en
la conformación de la enzima que da lugar a una disminución de su actividad.
los enlaces débiles múltiples entre el inhibidor y el sitio activo se
combinan para producir una unión fuerte y específica. Al contrario de
lo que ocurre con el sustrato y los inhibidores irreversibles, los
inhibidores reversibles generalmente no experimentan reacciones
químicas cuando se unen a la enzima y pueden ser eliminados
fácilmente por dilución o por diálisis.
 APLICACIONES DE LOS INHIBIDORES
Fármacos:
en el tratamiento de diversas enfermedades.
Muchos de estos inhibidores son capaces de
actuar sobre enzimas humanas y así corregir
determinadas patologías.
Un ejemplo de inhibidor enzimático terapéutico
es el sildenafil (Viagra), utilizado como
tratamiento de la disfunción eréctil. Este
compuesto es un potente inhibidor de la
fosfodiesterasa tipo 5 específica de GMPc, una
enzima que degrada una molécula de
señalización celular, el GMPc
 APLICACIONES DE LOS INHIBIDORES

• Control metabólico
• Inhibidores artificiales como:
• Herbicidas
• Desinfectantes
• Venenos naturales
 GENERALIDADES DE LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA EN PRESENCIA DE XENOBIÓTICOS

XENOBIÓTICOS:
Es todo compuesto químico que no
forme parte de la composición de los
organismos vivos.
Fármacos, Aditivos alimenticios,
Contaminantes ambientales,
Carcinógenos químicos, Insecticidas
y otros.
• Pueden producir una gran variedad de efectos biológicos, incluyendo
respuestas farmacológicas, toxicidad, reacciones inmunológicas y cáncer.

• los xenobióticos deben ser sometidos a transformaciones químicas para

aumentar la polaridad y solubilidad en agua y facilitar su eliminación.

• Estas transformaciones son llevadas a acabo por enzimas que se encuentran

localizadas en : El hígado, mucosa intestinal, sangre (plasma sanguíneo),
riñones, pulmones y piel.

• Casi todos los compuestos xenobióticos quedan sujetos a metabolismo,

principalmente en el hígado.
 EL METABOLISMO DE LOS XENOBIÓTICOS:

el 80 % de los xenobióticos van a sufrir oxidación, va a tener lugar sobre todo en el

hígado, aunque también en la mucosa intestinal, en el riñón y en el pulmón. Estas
reacciones las llevan a cabo un sistema de enzimas conocidas como citocromo p-450.

citocromo p-450 es el principal

catalizador de las reacciones de
biotransformación de medicamentos
y Se encarga del metabolismo de
toxinas en alimentos y fármacos.
lo que se hacen en el metabolismo de los
xenobióticos es transformar desde el punto de
vista químico a una sustancia para que pueda
sufrir otras reacciones.
en otras fases se realizan otro tipo de reacción
para hacer las sustancias mas polares, solubles en
agua y facilitar la excreción por orina o por bilis.
 BIBLIOGRAFÍA
o HARPER, bioquímica ilustrada.
o https://es.slideshare.net/LIZANDJOR/xenobioticosmetabolism?next_slides
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o http://apuntesbiotecnologiageneral.blogspot.com.co/2014/05/enzimas.ht
ml
o http://slideplayer.es/slide/11451604/#