UNIVERSIDAD  ALAS PERUANAS

BLGA.CARMEN ALBURQUEQUE A.

Microbiología Ambiental
CRECIMIENTO MICROBIANO
 Definición de crecimiento microbiano
 Multiplicación celular

 Fases del crecimiento microbiano

 Metodologías usadas para cuantificarlo

 Cultivo continuo
 CRECIMIENTO MICROBIANO
      Es  el  incremento  ordenado  de  todos  los  componentes     
celulares  que  conduce  a  un  aumento  de  la  masa  y 
finalmente a un aumento del numero de  células .
 
FORMAS DE CRECIMIENTO 
MICROBIANO

 Fisión binaria.

 Fragmentación.

 Gemación.
FISIÓN BINARIA
 Es  la división de una bacteria en dos células hijas .
   Previniendo  que  no  se  produzca  ningún  caso  de 
mutación  las  células  hijas  resultantes  serán 
genéticamente idénticas a la célula original.
FISIÓN BINARIA
GEMACION
FRAGMENTACIÓN
FASE DE CRECIMIENTO
 1. Fase Lag
 2. Fase logaritmica

 3. Fase Estacionaria

 4. Fase de la Muerte
FASE LAG (LATENCIA )
 Consiste  en  la  adaptación  de  las  células 
microbianas a su nuevo ambiente. 
   Las  células  microbianas  se  encuentran 
empobrecidas en cuanto a metabólicos y enzimas, 
esto  debido  a  las  condiciones  desfavorables  que 
representaba el cultivo previo.
 En este lapso de tiempo se forman las enzimas y 
los  metabólicos  intermedios  hasta  alcanzar  las 
concentraciones  necesarias  para  reiniciar  el 
crecimiento.
FASE LOGARÍTMICA
 Las  células  se  encuentran  en  un  estado  de 
crecimiento sostenido.
 Se  sintetiza  nuevo  material  celular  a  una  tasa 
constante (exponencial .
   Continua  hasta  que  uno  o  más  nutrimentos  se 
agoten,
   El  material    sintetizado  es  catalítico  ,la 
acumulación    de  metabólicos  tóxicos    inhibe  el 
crecimiento. 
FASE ESTACIONARIA

 Hay limitación de nutrientes
 El crecimiento exponencial se detiene,

 No  hay  incremento  o  decremento  en  el  número  de 

células o masa . 
  Acumulación de sustancias tóxicas.

   Los  microorganismos  son  fisiológicamente  activos  y 

viables. 
FASE DE MUERTE
 Las  células  pueden  seguir  vivas  y  continuar 
metabolizando, pero lo más probable es que mueran. 
 La viabilidad disminuye lentamente. 

 La muerte se acompaña por lisis celular.
MÉTODOS DE EVALUACIÓN DEL 
CRECIMIENTO

1.Determinación del nº de microorganismos
      – Recuento microscópico directo .
      – Conteo electrónico .
      – Recuento en placa .
      – Filtración por membrana  .
      – Número más probable (NMP).     
RECUENTO EN CÁMARA DE 
NEUBAUER
   ­ Se emplea un dispositivo graduado con 25 cuadrados  
      ­  No  es  práctico  para  un  gran  número  de  muestras.   
­  No  es  muy  sensible,  se  necesitan  al  menos  106   
bact/ml  para  que  sean  observadas  al  microscopio 
­ No distinguen células vivas de muertas
CÁMARA DE NEUBAUER
RECUENTO EN PLACA
  Conteo de células viables
  Pueden ser:
         ­ Diseminación en placa 
         ­ Método   de vaciado en placa 
NÚMERO MÁS PROBABLE (NMP)

 Se basa en la determinación de la presencia o 
ausencia de un determinado tipo de       
microorganismo  en diferentes cantidades de 
muestra .
  En función de que crezcan o  que produzcan 
determinada reacción en el medio 
 Se  debe  diluir  hasta  tener  una  densidad  que 
sea  menor  a  1  célula  por  cada  mililitro  de 
diluyente. 
NUMERO MAS PROBABLE
2 .DETERMINACIÓN DE LA MASA 
CELULAR
 Medida de la masa .
 Turbidimetría .
MEDIDA DE LA MASA CELULAR
.  Se  determina  el  peso  seco  o  peso  húmedo  de  una 
alícuota  de  la  población  separada  por 
centrifugación.
.  El peso seco es por lo general el 20­25 % del peso 
húmedo .
.  El sedimento se seca toda la noche a 105 C .
.
MEDIDA MASA CELULAR
TURBIDIMETRÍA
 Estimación de la biomasa celular
  Cuantas más células haya más luz se dispersa y 
más turbia aparece la suspensión.
  Midiendo la turbidez en unidades de absorvancia

  Se utiliza un fotómetro o espectrofotómetro
ESPECTROFOTÓMETRO
CULTIVO CONTINUO
• AGREGADO CONTINUO DE NUTRIENTES Y 
REMOCIÓN  DESHECHOS.

• NUTRIENTE LIMITANTE ( CONTROL DEL 
CRECIMIENTO MICROBIANO )

• CONDICIONES AMBIENTALES CONSTANTES

• CULTIVO EN FASE EXPONENCIAL
  LA TUBERÍA SUPERIOR AÑADE MEDIO 
FRESCO EN EL CULTIVO MICROBIANO.
  LA TUBERÍA INFERIOR ACTÚA COMO UN 
ALIVIADERO O REBOSADERO.
  EL MISMO VOLUMEN QUE ENTRA EN EL 
QUIMIOSTATO SALE POR LA PARTE 
INFERIOR.
QUIMIOSTATO
DESCANSO

GRACIAS