INTEGRANTES:

 AVALOS HUACHACA JENNY

 CALDERON BORDA DEISY
 ROJAS VALLE AURORA
 VALDEIGLESIAS PATRICIA
 VICTORIA
 Medio Agar Mc Conkey

 FUNDAMENTO:
 Medio selectivo para aislamiento de entero bacterias obtenidas a partir
de heces, orina, alimentos, etc.
 Las sales biliares y el cristal violeta presentes en su composición inhiben
la flora Gram (+), ya que se mezclan con la pared y membrana celular
impidiendo su desarrollo.
 La lactosa junto con el indicador de PH rojo neutro sirven para
confirmar la degradación de la lactosa.
 composición

 Peptona
 Lactosa
 Sales biliares
 Cloruro de sodio
 Rojo neutro
 Cristal violeta
 Agar
 PH 7.2
 Lectura y resultados

 El desarrollo de las colonias se leerá
entre las 18-24hrs posteriores a la
siembra.
 Las colonias lactosa (-) son incoloras
debido a que no existe metabolismo de
dicho azúcar.
 Las colonias lactosa (+) son de color
rojo-rosadas debido al descenso del
PH, ejemplo E. coli
 Medio Agar-Eosina-Azul de
metileno-Lactosa (EMB) de

Levine
Fundamento:
 Empleando este medio selectivo se puede aislar y diferenciar
escherichia coli y enterobacterias.
 La eosina y el azul de metileno inhiben a muchos microrganismos
Gram +.
 Sirve para diferenciar las colonias de bacilos entéricos patógenos de los
organismos capaces de fermentar rápidamente la lactosa.
 composición

 Peptona
 Lactosa
 Fosfato dipotásico
 Eosina amarillenta
 Azul de metileno
 Agua destilada
 Agar
 PH 7.0
 Colonias de Escherichia Coli y
enterobacter en este medio

 2-3 mm de diámetro
 Presencia de un brillo verde metálico
 Centro oscuro en luz transmitida
 Precipita las sales biliares con el cristal
violeta.

 Las colonias de enterobacter no presentan

ese brillo metálico
 4-6 mmm de diámetro.
 Centro pardo grisáceo con luz
transmitida.
 AGAR XLD

 El agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato es un medio selectivo diferencial,
utilizado para el aislamiento y diferenciación de patógenos entéricos
Gram negativos, especialmente del género Shigella.
 composición

 Xilosa

3,75 g
 L- Lisina 5,0 g
 Lactosa 7,5 g
 Sacarosa 7,5 g
 Cloruro de Sodio 5,0 g
 Extracto de Levadura 3,0 g
 Rojo Fenol 0,08 g
 Desoxicolato de Sodio 2,5 g
 Tiosulfato de Sodio 6,8 g
 Citrato Férrico de Amonio 0,8 g
 Agar 15,0 g
 Agua destilada c.s.p. 1000 mL
 pH final 7,4 ± 0,2
 FUNDAMENTO

 La degradación de los carbohidratos presentes en el medio genera la
producción de ácido haciendo virar el indicador (rojo fenol) de rojo a
amarillo.
 En este medio se incorpora la xilosa porque es prácticamente
fermentada por todas las enterobacterias con excepción de los
microorganismos pertenecientes al género Shigella.
 La lisina se incluye para aumentar la diferenciación de los
microorganismos pertenecientes al género Salmonella, ya que sin la
lisina estos microorganismos rápidamente fermentan la xilosa
produciendo la acidificación del medio y no se pueden diferenciar de
otras especies no patógenas.
 Como la cantidad de este carbohidrato es limitada, una vez que estos
microorganismos lo consumen, comienzan a utilizar la lisina lo cual

produce la alcalinización del medio; este hecho se evidencia porque el
rojo fenol nuevamente vira a un color rojo.
 El medio también tiene la capacidad de detectar la producción de H2S, a
través del sistema indicador tiosufalto de sodio y citrato férrico amonio.
 Cuando el microorganismo produce H2S se observan colonias con el
centro negro.
 Los microorganismos no patógenos productores de H2S no
descarboxilan la lisina; cuando están presentes la reacción ácida
producida por la utilización de los carbohidratos previene en
ennegrecimiento de las colonias.
 El desoxicolato de sodio es utilizado como un inhibidor de los
microorganismos Gram positivos.
Características de colonias
Escherichia coli

• Citrato de simmon
• TSI (triple sugar iron)
• LIA c8lisina iron agar)
• SIM
• Caldo urea
• Prueba de MR-VP
 TSI (TRIPLE SUGAR IRON)

FUNDAMENTO:
 Este medio no presenta inhibidores pero puede llevar indicadores de viraje de
PH.
 Se utiliza para el estudio de enterobacterias y otras por su alto contenido en
nutrientes entre proteínas y carbohidratos.
 Se estudia el metabolismo de la cisteína que posee 2 moléculas de azufre (S)
que serán liberados como H2S por acción de la cisteinasa de la cisteína.
 Con la presencia de sales ferrosas formaran S2Fe que le dará un precipitado
de color negro.
CARBOHIDRATOS PRESENTES
EN EL MEDIO

LACTOSA,SACAROSA Y GLUCOSA:
 El tubo debe tener áreas amplias que manifiesten el metabolismo de estos 3
carbohidratos.
 Un pico de flauta semi inclinado y una profundidad amplia.

METABOLISMO DE LA LACTOSA:
Para realizar este metabolismo la bacteria debe tener 2 enzimas.
 Una permeasa
 B- galactosidasa
 La lactosa se desdobla en glucosa y galactosa y continua con la vía glucolitica
hasta formar ácidos.
 
 La sacarosa mediante la sacarasa se desdobla en glucosa y fructosa y
llegan a acido pirúvico
 Una pequeña burbuja o ruptura del medio indica la presencia de gas
que es significativo para la diferenciación de especies no productoras
de gas.
 Escherichia coli


AGAR MACONKEY AGAR MBM

Lactosa positiva colonias con borde metálico y
Colonias : rosadas , grandes , centro oscuro violáceo
redondas
 PRUEBAS DE BIOQUÍMICA


TSI LIA SIM

Citrato URIA RM VP
A/A
K/K INDOL (+)
GAS+
GAS + MOV+
- H2S -
H2S - H2S - - + -
KLEBSIELLA

Agar Mac Conkey

Colonias grandes plano convexa, mucoides,

brillantes, forma irregular, también se observan
redondeadas, bordes ondulados, lactosa
positivo(consume el carbohidrato lactosa lo cual
acidifica el medio y el indicador rojo de fenol
cambia rojo-rosado, por ello las colonias se ven
de ese color).
 KLEBSIELLA PNEUMONIA PRUEBAS DE BIOQUÍMICA

CITRATO TSI LIA SIM UREA R.M V.P

POSITIVO A/A K/K S (-) POSITIVO NEGATIVO POSITIVO

GAS(+) Gas + I (-)
H2S (-) H2S (-) M (-)

KLEB. OXYTOCA
(+)
A/A +,- k/k +,- -,-,- positivo - positivo

 PROTEUS MIRABILIS

AGAR MACONKEY se observa claramente el
Colonias incoloras efecto de swarming, lo que
transparentes con evidencia la gran motilidad
de la bacteria.
ondas en el medio
 PROTEUS –BIOQUIMICA


CITRATO TSI LIA SIM U R.M V.P

K/A R/A
-/+ Gas + Gas -,++ -+/+,+ + + -
H2S++
P. Mirabilis TSI LIA SIM U R.M V.P
VARIA-/+ K/A+,++ R/A-,++ +,-+ + + -
 SALMONELLA

AGAR S.S
Colonias transparentes lactosa negativos , con
centro H2S + negativos

AGAR MACONKEY
colonias incoloras cremosa
 salmonella- bioquímica


CITRATO TSI LIA SIM U R.M V.P

NEGATIVO K/A K/K Indol –
gas - H2S + Mov + - +
H2S + H2S +
S. g K/A K/K Indol –
POSITIVO Gas – H2S + Mov – - +
H2S + H2S +
S. paratyphi K/A K/K Indol-
- Gas + H2S - Mov – - +
MORGANELLA MORGANI CARACTERISTICAS
COLONIALES


agar sangre y el agar McConkey, no son

hemolíticas y usualmente no producen el
fenómeno de "swarming" como Proteus.
morganella morganii


 SERRATIA

 Es un bacilo aerobio Gram-negativo de la familia Enterobacteriaceae,
que clásicamente había sido considerado una bacteria saprofita,
anaeróbico facultativo, oxidasa negativo.
 Puede encontrarse en la flora intestinal del hombre y animales, en el
ambiente y en reservorios pobres en nutrientes como el agua potable,
cañerías y llaves, así como también en insumos hospitalarios como
jabones, antisépticos, etc. Su adquisición es mayoritariamente
nosocomial, especialmente en unidades de cuidados intensivos, siendo
secreciones respiratorias, heridas y orina, sitios frecuentes de
colonización.
 MEDIOS DE CULTIVO
 McConkey 
 Las colonias que pueden ser
pigmentadas,
especialmente Serratia marcescens y
Serratia rubias, las cuales producen
un pigmento rojo muy característico
llamado prodigiosina.
 Serratia marcescens forma colonias
lactosa negativo en el agar
McConkey y puede ser B-hemolítica
en el agar sangre.
 PRUEBAS BIOQUIMICAS

SERRATIA MARCENSCENS

CITRATO TSI LIA SIM MIO UREA R.M V.P

Positivo K/A K/K S (-) M (+) NEGATIV NEGATIV POSITIVO

H2S (-) H2S (-) I (-) I (-) O O
Gas (-) Gas (-) M (+) O (V)

 ENTEROBACTER

 Enterobacter sakazakii es un bacilo Gram negativo, aerobio facultativo y
móvil, que hace parte de la familia Enterobacteriacea. Esta bacteria se
conoció en 1980 como Enterobacter cloacae y, debido a las diferencias
genéticas, hoy en día se denomina Enterobacter sakazakii . E. sakazakii
produce enterotoxinas.
 En la actualidad, se considera un patógeno oportunista emergente de
alto riesgo en salud pública a nivel mundial, el cual puede causar
meningitis y enterocolitis necrosante, especialmente en neonatos e
infantes de riesgo.
 MEDIOS DE CULTIVO
 MAC CONKEY 
 Forma colonias de borde entero, de
color rosado de 2 – 4 mm de
diámetro, no tan mucoides como K.
pneumoniae.
ENTEROBACTER
ESPECIES

 PRUEBAS BIOQUIMICAS

ENTEROBACTER CLOACAE

CITRATO TSI LIA SIM MIO UREA R.M V.P

POSITIVO K-A/A K/A S (-) M (+) NEGATIV NEGATIV POSITIVO

H2S (-) H2S (-) I (-) I (+) O O
Gas (-) Gas (-) M (+) O (V)
 PRUEBAS BIOQUIMICAS

ENTEROBACTER AEROGENES

CITRATO TSI LIA SIM MIO UREA R.M V.P

POSITIVO K-A/A K/K S (-) M (+) NEGATIV NEGATIV POSITIVO

H2S (-) H2S (+) I (-) I (+) O O
Gas (-) Gas (-) M (+) O (V)
 PRUEBAS BIOQUIMICAS

ENTEROBACTER AGGLOMERASUS

CITRATO TSI LIA SIM MIO UREA R.M V.P

POSITIVO K-A/A K/A S (-) M (+) NEGATIV NEGATIV POSITIVO

H2S (+) H2S (+) I (-) I (-) O O
Gas (-) Gas (-) M (+) O (V)

 MORGANELLA

 Morganella morganii es una bacteria presente en la flora fecal causante
como otras enterobacterias de infección urinaria y, en menor medida, de
otras infecciones en la esfera ginecológica o la herida quirúrgica.
Ocasionalmente se ha relacionado con la artritis séptica, especialmente
en pacientes de avanzada edad y con enfermedades de larga evolución.
 Tiene una relación comensales dentro del tracto intestinal de humanos,
mamíferos y reptiles, como es normal flora.
 M. morganii es facultativamente anaeróbica y oxidasa negativa.
 MEDIOS DE CULTIVO
 Sus

colonias aparecen blanquecinas y
opacas en color, cuando se cultiva en
placas de agar. Las células de M. morganii
son varillas rectas, de aproximadamente
0.6 - 0.7 μm de diámetro y 1.0 - 1,7 μm de
longitud. Este organismo se mueve a
través de flagelos peritrichous, pero
algunas cepas no forman flagelos en 30 °
C. M. morganii puede producir la enzima
catalasa, por lo que puede convertir el
peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno.
 PRUEBAS BIOQUIMICAS

MORGANELLA MORGANII

CITRATO TSI LIA SIM MIO UREA R.M V.P

NEGATIV K/A R/A S (-) M (+) POSITIVO POSITIVO NEGATIV

O H2S (-) H2S (-) I (+) I (+) O
Gas (-) Gas (-) M (+) O (+)

 PROVIDENCIA

 Providencia stuartii es un
microorganismo que rara vez se
aísla en la clínica, excepto a partir de
la orina de enfermos en residencias o
en ancianos con catéteres urinarios
insertados durante largo plazo.
 PRUEBAS BIOQUIMICAS

PROVIDENCIA RETTGERI

CITRATO TSI LIA SIM MIO UREA R.M V.P

POSITIVO K/A R/A S (-) M (+) POSITIVO POSITIVO NEGATIV

H2S (-) H2S (-) I (+) I (+) O
Gas (-) Gas (-) M (+) O (-)

 CITROBACTER

 El Citrobacter está ampliamente diseminado en la naturaleza
encontrándose en la tierra, en el agua y ocasionalmente habita en el
tracto gastrointestinal del hombre, usualmente es saprofito, puede
causar enfermedad en pacientes comprometidos y también ha sido
asociado con epidemias esporádicas de gastroenteritis.
 El Citrobacter es un bacilo gram-negativo, móvil, anaerobio facultativo
 Es en forma de varilla que tiene una longitud característica de 1-5
micras. La mayoría de las bacterias tienen flagelos y en algunos casos
no. Las bacterias se encuentran en lugares húmedos. Citrobacter
freundii pertenecen a la familia Enterobacteriaceae .

 PRUEBAS BIOQUIMICAS

CITROBACTER FREUNDIS

CITRATO TSI LIA SIM MIO UREA R.M V.P

POSITIVO A-K/A K/A S (+) M (+) NEGATIV POSITIVO NEGATIV

H2S (+) H2S (-) I (-) I (-) O O
Gas (++) Gas (++) M (+) O ()
 
El Citrobacter Freundii son diferenciados por la
formación de sulfuro del hidrógeno, producción de
Indol y fermentación de Adonitol y Malonato de Sodio.
