Chlamydiae

Chlamydiaceae es una familia

de parásitos intracelulares
obligados con tropismo por las
células epiteliales cilíndricas
que tapizan la membrana de la
mucosa.
 Las clamidias son bacterias inmóviles, gram- negativas,
parásitos intracelulares obligados. Se replican dentro
del citoplasma de la célula huésped, formando inclusiones
intracelulares características que pueden verse con
el microscopio de luz. Difieren de los virus en que
tienen tanto DNA como RNA y pared celular
parecida en estructura a la de las bacterias gram-
negativas.
 Existen tres especies: C. trachomatis, C. psittaci y C.
pneumoniae.

 C. trachomatis incluye a los organismos que causan

tracoma, conjuntivitis de inclusión, linfogranuloma
venéreo (LGV) y otras infecciones transmitidas
sexualmente.

 Las cepas de C. trachomatis son sensibles a las

sulfonamidas y producen un material parecido al
glucógeno dentro del cuerpo de inclusión, el cual se
tiñe con yodo.
 Especies
C. trachomatis
C. psittaci
C. pneumoniae
 Ciclo infeccioso

 Después de unirse a sitios específicos en la

superficie de la célula huésped, las clamidias son
endocitadas por ella, entrando el cuerpo
elemental dentro del endosoma.
 Las clamidias evitan la fusión del endosoma con
el lisosoma. Una vez que el cuerpo elemental
ha entrado en la célula, se reorganiza en una
partícula reticular (cuerpo inicial), que es más
grande y rica en RNA.
 ADN circular, compacto en un
mucleoide central.
Genoma: 1 – 1.2 millones de pb
 Después de aproximadamente 8 h, los
cuerpos iniciales empiezan a dividirse por
fisión binaria. Aproximadamente 18-24 h
después de la infección, estos cuerpos
iniciales se convierten en cuerpos
elementales mediante procesos de
reorganización y condensación. Entonces los
cuerpos elementales son liberados para
iniciar otro ciclo de infección.
 Los cuerpos elementales están adaptados
específicamente para la sobrevivencia
extracelular, y son las formas infecciosas;
mientras que la forma intracelular
metabólicamente activa y replicativa, el
cuerpo inicial, no sobrevive fuera de la
célula huésped y parece adaptada a un
medio intracelular. En general, un ciclo
completo toma de 36 a 72 h.
 Morfología
Dos formas morfológicamente diferentes

 Cuerpo elemental (CE)

 Forma infecciosa

 Cuerpo reticulado (CR)

 Forma intracelular metabólicamente

activa y replicativa
 Ciclo de crecimiento

 Fijación y penetración de CE.

 Transición del CE a CR.

 Desarrollo y división del CR.

 Maduración de los CR no infecciosos a CE

infecciosos.

 Liberación del CE de la célula huésped.

Cuerpos reticulares de Chlamydia trachomatis
en la vesícula fagosómica
 IMPORTANCIA MÉDICA

 C. trachomatis es casi exclusivamente un patógeno

humano. Sus serotipos causan tracoma
(serotipos A, B, Ba, C y J), conjuntivitis de inclusión
y Linfogranuloma venéreo (LGV) (serotipos L1,
L2 y L3). Los serotipos D-K son las principales
causas de uretritis no gonocócica en varones, y
también puede causar epididimitis. Puede producir
proctitis en ambos sexos.
 Serotipos de Chlamydia
trachomatis

Tracoma A B Ba C J

Infecciones genitales y
D E F G H I K
Conjuntivitis de inclusión

Linfogranuloma Venéreo L1 L2 L3
(LGV)
Epidemiología

En diferentes países del mundo, incluyendo Estados

Unidos e Inglaterra se acepta a Chlamydia
trachomatis como la principal causa de las
enfermedades de transmisión sexual, representa un
papel importante en la infertilidad y es una de las
causas más frecuentes de ceguera. Las infecciones
por C. trachomatis pueden dividirse en 3 categorías:

1.- Tracoma.
2.- Infecciones oculares y respiratorias perinatales.
3.- Infecciones genitales de transmisión sexual.
 Desde un punto epidemiológico, las infecciones por C.
trachomatis se dividen en tres categorías:
 En mujeres, la cervicitis es el resultado más
común de la infección por clamidias, y puede
ocurrir salpingitis. C. trachomatis es el patógeno
bacteriano más común transmitido
sexualmente. La clamidia puede transmitirse al
recién nacido durante su paso por el canal del
parto, y desarrollar conjuntivitis de inclusión y
neumonía clamidial. También puede causar
enteritis y vaginitis en los recién nacidos.
 Bacteria Manifestaciones clínicas
Varón
N. gonorrhoeae Uretritis, epididimitis, proctitis
conjuntivitis, infección gonocócica
diseminada, peritonitis,
meningitis
C. trachomatis Uretritis no gonocócica, uretritis
posgonocócica, epididimitis,
proctitis, conjuntivitis
Mujer
Síndrome uretral agudo,
Bartolinitis, cervicitis,
salpingitis, conjuntivitis,
perihepatitis, infección
gonocócica diseminada,
peritonitis, meningitis
Síndrome uretral agudo,
Bartolinitis, cervicitis,
displasia cervical,
salpingitis, conjuntivitis,
perihepatitis, artritis,
dermatitis
 Infecciones clínicas ocasionadas por
C. trachomatis (serotipos D-K)

Uretritis/cistitis Conjuntivitis Uretritis

Prostatitis
Infecciones
subclínicas
Cervicitis
Epididimitis

Displasia

Salpingitis Infecciones en el Gastroenteritis

recién nacido

Vaginitis
Otitis media Conjuntitivitis Neumonía
 Patogenia del Linfogranuloma Venéreo (LGV)

Chlamydia trachomatis
(L1, L2 y L3)
5 a 22 días
Lesión primaria
5 a 120 días
Adenopatía inguinal múltiple

Masa dura y firme (indolora)

7 a 15 días
Adhesión a la piel y TCS (Signo del canal)

Ausencia de fluctuación (dolorosa)

Involución
Bubón
Perforación
 Cuadro clínico
 Infección primaria: inoculación por lesión
genital, asintomática. Luego de incubación de
3 a 21 días aparece lesión primaria genital
que en la mujer compromete labios, vagina y
cuello uterino.

 Infección secundaria: 2 a 3 semanas

después, caracterizada por adenopatías
inguinales en el hombre e ilíacas en la mujer.,
En casos no tratados evoluciona a supuración
y formación de escaras.
 Infección terciaria: en casos no tratados,
extensas adenopatías confluentes del espacio
retrorrectal o retroperitoneal, convirtiéndose en
pelvis leñosa con estrechamiento del recto y
vagina.
 LGV se caracteriza por tres fases:
 LINFOGRANULOMA VENEREO
 Es una ETS que causa inflamación y
drenaje de los ganglios linfáticos
inguinales, así como la destrucción y
cicatrización de los tejidos circundantes
 Síntomas
 Úlcera pequeña órganos genitales
 Hinchazón y enrojecimiento de la
piel sobre los ganglios linfáticos
inguinales
 GL inguinales inflamados en uno o
ambos lados
 Drenaje de los ganglios linfáticos
 Sangre en las heces
 Tenesmo
 TRACOMA
 Infección ocular causada por la C.
trachomatis (A, B, Ba o C) que
puede producir cicatrización
crónica y ceguera.

 Síntomas
 Conjuntivitis
 Secreción ocular
 Párpados inflamados
 Pestañas invertidas
 Inflamación de los ganglios
linfáticos retroauriculares
 Opacidad de la córnea
 Estadio I

 Estadio II

 Estadio III

 Estadio IV
 Conjuntivitis de inclusión
 Conjuntivitis causada por Chlamydia trachomatis
(D a K) se da mayormente en lactantes que en
adultos
Síntomas
 Clínicamente evidente
después de 5 a 12 días.
 Conjuntivitis
 Exudado pegajoso
 Puede estar acompañada
de vulvovaginitis
 infección de oídos y rinitis
mucopurulenta.
Mecanismos de
transmisión
 En lactantes pasaje por el
canal del parto
 En adultos contaminación
de piletas de natación no
cloradas
Infecciones urogenitales por Clamidias

Cervicitis mucopurulenta Uretritis no gonocócica

Epididimitis
Endometritis y salpinguitis

Prostatitis
Cervivitis por Clamidia (no gonocócica)
DIAGNÓSTICO DE
LABORATORIO.
 Diagnóstico de laboratorio

 Examen directo de las muestras clínicas.

 Aislamiento de microorganismos.
 Detección de anticuerpos específicos contra
estas bacterias.
El cepillo urogenital.
Transferencia de la torunda uretral al medio de transporte
para cultivo de clamidias y micoplasmas genitales.
 Si no está disponible un medio de transporte, o si
la muestra consiste en gran cantidad de orina,
el espécimen deberá llevarse al laboratorio tan
rápido como sea posible; si el transporte va a
tardar varias horas, la muestra deberá mantenerse
a 4°C.
Material biológico.

 Raspados de células epiteliales de la uretra anterior,

el cuello uterino y la vagina, biopsias de salpinge
o de epidídimo. Orina. También pueden tomarse
muestras de la mucosa rectal, la nasofaringe y la
garganta. Suero.
 Las muestras deben depositarse en un medio de
transporte especial, y refrigerarse si van a procesarse
dentro de las 48 h siguientes; en caso contrario
deberán congelarse a -60°C.
 Exudado cervical.

 No use lubricantes.
 Limpie el cérvix de secreción vaginal y moco.
 Rote un hisopo estéril, y obtenga exudado de las
glándulas endocervicales.
 Si no se ve exudado, inserte un hisopo estéril en el canal
endocervical y rótelo.
 Exudado uretral.
 El hisopo se introduce unos 2 cm dentro de la uretra y se rota
suavemente antes de retirarlo. Dado que las clamidias son
patógenos intracelulares es importante extraer células
epiteliales de la mucosa uretral.

 Se requieren muestras separadas para el cultivo de gonococos y

clamidias o ureaplasmas.

 Cuando la descarga uretral es abundante, sobre todo en los

hombres, la muestra puede tomarse externamente sin
introducir ningún dispositivo en la uretra.
Orina:

 Colecte 20 ml de chorro medio de la micción

en un recipiente estéril. Esta muestra no
es útil para inmunofluorescencia directa
(IFD) ni para sondas de ácidos nucleicos,
pero sí para ELISA.
 Recolección de las muestras
 Muestras: oculares, urogenitales,
rectales, nasofaríngeas y de las
fauces.
 se recolectan mediante el raspado de
mucosas.
 Aspirados urogenitales y de ganglio
linfático
 Deben obtenerse células epiteliales
cilíndricas.
 Se utiliza hisopos de rayón, dacrón
o algodón en varilla de metal o de
plástico con dispositivo para la toma
de muestras citológicas.
Examen directo.

 Los frotes o los tejidos infectados pueden teñirse con

Giemsa, Gimenez o Macchiavello para buscar cuerpos
de inclusión. Los cuerpos elementales se tiñen de púrpura
rojizo con Giemsa, en contraste con la coloración azul que
toma el citoplasma de la célula huésped.
 También puede emplearse la inmunofluorescencia
directa y el ELISA.
 Examen directo

 Tinción de Giemsa

 Tinción de Gimenez para

Chlamydia
 Tinción de Macchiavello
para Chlamydia
 Tinción con yodo
ELISA:
 Existen varios productos comerciales que pueden
detectar antígenos clamidiales en muestras
clínicas. La mayoría de estos productos
detectan al LPS. Las pruebas incluyen ya sea
anticuerpos policlonales o monoclonales contra
el LPS, de manera que al menos en teoría pueden
detectar todas las clamidias. Son un poco más
sensibles y menos específicas que la
inmunofluorescencia directa (IFD). Son menos
sensibles que el cultivo y tienen una especificidad
de 97%.
Sondas de DNA:
 Existen en el mercado algunas sondas
de ácido nucleico. Son menos
sensibles que el cultivo y su especificidad
es de alrededor de 95%.
 MEDIOS DE TRANSPORTE.
Sacarosa-fosfato (2SP).
Sacarosa ........................... 68.46 g
K2HPO4 ............................. 2.01 g
KH2PO4 ............................. 1.01 g
Agua destilada .................. un litro
Ajuste el pH a 7.2-7.4, esterilice y añada:
Gentamicina ....................... 50 µg/ml
Vancomicina ....................... 100 µg/ml
Anfotericina B ..................... 25 µg/ml
También puede usarse Estreptomicina (50 µg/ml),y, en
vez de Anfotericina B, puede usarse Nistatina (25 U/ml).
 Sacarosa-fosfato-glutamato (SPG)
Sacarosa ................................. 75.00 g
K2HPO4 ................................... 0.52 g
Na2HPO4 ................................. 1.22 g
Ácido glutámico ...................... 0.72 g
Agua destilada ........................ un litro

Ajuste el pH a 7.4-7.6, esterilice y añada los

Transporte de las muestras para su cultivo

Medios de transporte Gentamicina

Vancomicina
 Sacarosa 2-fosfato Anfotericina B
 Sacarosa fosfato glutamato

Condiciones
 Refrigerar a 4°C

 Procesar dentro de las 48 hrs. posteriores

 Conservar a -70°C si no se puede procesar

dentro de las 48 hrs.
 AISLAMIENTO Y CULTIVO.

 La técnica más popular involucra la inoculación

de los especímenes en células de McCoy
tratadas con cicloheximida. Los principios
básicos involucran la centrifugación del
inóculo (tratado con antibióticos para
descontaminar), con la monocapa celular a
aproximadamente 3,000 x g durante una hora,
incubación de la monocapa por 48-72 h, y luego
tinción con yodo, con Giemsa o con anticuerpos
marcados con fluoresceína para detectar los
cuerpos de inclusión.
 También puede inocularse el saco vitelino de
embrión de pollo, incubarse durante 13
días y examinar improntas del saco vitelino de
los que mueran después del tercer día,
mediante la tinción de Gimenez, de
Macchiavello o la inmunofluorescencia directa.
 MEDIO DE CRECIMIENTO.

Medio Mínimo Esencial de Eagle (MEM)

(10X) en sales de Earle, sin glutamina...... 50.0 ml
Suero fetal de ternera ............................... 50.0 ml
L-glutamina, solución 200 mM .................. 5.00 ml
Agua destilada estéril, a ............................ 500.0 ml

Ajuste el pH a 7.4 con bicarbonato de sodio al 7.5%

 MEDIO DE AISLAMIENTO.

Es el medio de crecimiento, adicionado con:

Vancomicina ............................ 50.0 µg/ml

Gentamicina ............................ 10.0 µg/ml
Anfotericina B .......................... 2.0 µg/ml
Glucosa ................................... 0.594 mg/ml
Cicloheximida .......................... 1 a 2 µg/ml
 IDENTIFICACIÓN.

 Se realiza mediante la tinción de

Giménez, la tinción con yodo, o la
inmunofluorescencia directa del
crecimiento en cultivos celulares o en
embrión de pollo.
Fotografía de un cultivo de células de McCoy
con cuerpos de inclusión por Chlamydia
trachomatis. Tinción de Giemsa, x1,000).
Tinción inmunofluorescente contra Chlamydia
trachomatis en células de McCoy infectadas.
Aplicación de diferentes pruebas diagnósticas para
infecciones por Chlamydia
 Diagnóstico serológico
 Es posible detectar anticuerpos en el suero, las
lágrimas y las secreciones genitales.
 Se logra por medio de:
 Prueba de fijación de complemento (FC)
 Usa un Ag específico de género
 Técnica de microinmunofluorescencia (micro-IF)
 Inmunoensayo enzimático (ELISA)
 Mideanticuerpos de inmunotipo contra cada
una de las 15 serovariedades.
 Tratamiento
 Incluye sulfadiazina o tetraciclina
 La penicilina ha demostrado ser efectiva
cuando otros fármacos han fracasado.

 Los que tienen mayor actividad en los

cultivos celulares son tetraciclinas, eritromicina,
sulfonamidas, trimetroprim- sulfametoxazol.