A era do DNA

mitocondrial
A importância do estudo do genoma
mitocondrial humano
Orientadora: Silviene Fabiana

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 funções
 Sinalizações intracelulares
 Apoptose
 Metabolismo de
 Aminoácidos
 Lipídios

 Colesterol

 Nucleotídeos

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 ß-oxidação de ácidos graxos
 Ciclo da uréia
 Respiração celular
 Cadeia transportadora de elétrons
 Fosforilação oxidativa

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 Especialmente localizadas...
 Miócitos
 Neurônios
 Células dos túbulos renais
 Espermatozóides
 Células secretoras do endócrino

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 Biogênese da Mitocôndria
 Mereschkovski
(1909): propõe a
simbiogênese, isto é,
o surgimento de
linhagens de espécies
devido a simbioses
estáveis.

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 Teoria endossimbiótica sequencial
Lynn Margulis
 Evidências:
 Reproduzem de maneira diferente da reprodução
celular;
 Reproduzem independente da célula;

 Têm muitas semelhanças bioquímicas e estruturais

com as bactérias;
 Reproduzem por fissão binária;

 Têm DNA circular.

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 Correlação evolutiva
Gray et al, 1999
 Subdivisão
rickettsial das α-
proteobactérias:
gêneros Rickettsia,
Anaplasma e
Ehrlichia

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 Hipóteses

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 Redução de genes
Doolittle(1999): transferência lateral
de genes

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 Genoma mitocondrial humano
 16.659 pares de bases
 37 genes
 5% não-codantes
 Genes codantes:
 13 polipeptídeos
 22 RNAt

 2 RNAr

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 Os polipeptídeos
 Sete: subunidades do complexo I
 Um: complexo III
 Três: complexo IV
 Dois: complexo V

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 RNAt

 18 aminoácidos-específicos
 2 para leucina
 2 para serina

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 Herança mitocondrial

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 Padrões da herança
 Não-mendeliana;
 Extra-nuclear;
 Uniparental;
 Haplótipo;
 Não sofre recombinação.

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 Heredograma de herança
mitocondrial

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 Neuropatia Óptica Hereditária de
Leber
 Afetação de células ganglionares da retina e o
nervo óptico;
 Dos portadores da mutação, 50% dos homens
desenvolvem;
 Enquanto apenas 10% das mulheres
desenvolvem (?)

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 Herança multifatorial?
 Susceptibilidade a aminoglicosídeos (antibióticos
que inibem a síntese protéica):
 Todas as cópias iguais do DNAmt
(homoplasmia);
 Fatores nucleares semelhantes;
 Diversidade fenotípica.

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 Mutações no DNAmt
 10 vezes mais freqüente que no DNA nuclear;
 Danos por radicais livres;
 Sem mecanismos de reparo;
 50% das mutações ocorrem em genes de RNAt
(10% do genoma): “hot spots”.

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 Mutações pontuais identificadas na
espécie humana
 117 polimorfismos;
 87 patogênicas.
 Maior parte transições.

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 Importância na identificação
 Regiões hipervariáveis: I e II.
 D-loop nos vertebrados;
 Auxílio ao poder público: polícia, exército e
justiça;
 Feito no Brasil.

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 Importância nos estudos evolutivos
 1987
Rebecca Cann, Mark Stoneking e Allan Wilson
147 indivíduos:
20 africanos
34 asiáticos
21 aborígenes australianos
26 aborígenes da Nova Guiné
46 caucasianos

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 Resultados
 Análise de parcimônia: região hipervariável do
DNAmt
 Calibrador: 1 mutação a cada 1.000 anos
(baseado na datação do ancestral comum entre
homem e chimpanzé, o Sivapithecus – 5-7 milhões
de anos)
 Eva mitocondrial: 200.000 anos (posteriormente
modificada para 120.000 anos).

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 Mães sem filhas: linhagem se extingue.
 Segundo Cann, apenas uma “sobrevive”.
 Eva mitocondrial.
 Foi beneficiária do acaso.

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 Relógio molecular

 Freqüência das mutações

estável;
 Maior parte das
mutações é neutra.

Sivapithecus

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 Composição populacional
Clã Localização Idade Contribuição atual
(em anos)
Úrsula Inglaterra e 45.000 11%
Dinamarca
Xênia Europa central, 25.000 7%
França e
Inglaterra
Helena Europa, 20.000 41%

Europa
especialmente
 na Espanha e
na França
Velda Finlândia e 17.000 4%
Noruega
Tara Irlanda, Inglaterra 17.000 10%
e Itália
Katrine Itália, regiões do 15.000 10%
Adriático e dos
Alpes
Jasmine Meio-leste 8.500 12%

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 Composição populacional:
Brasil
 UFMG, 2000
 247 indivíduos, brancos de classe média e alta.
 Região hipervariável: 16.060 – 16.362
 Identificação das matrilinhagens:
 Resultado: igual entre as três ascendências, africana,
européia e ameríndia.

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 Contribuição ameríndia
Região Contribuição dos
ameríndios
Norte 41% (54%)
Nordeste 22%
Sul 22%
Sudeste 33%
Brasil 33%

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 Contribuições

 Africano: Camarões e Angola.

 Europeu: Península Ibérica

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 Homo sapiens neanderthalensis ou
Homo neanderthalensis ?

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 Dúvidas...
 São ancestrais diretos dos povos europeus
modernos?
 Contribuíram geneticamente para a constituição
humana atual?
 Desapareceram completamente sem formar
contribuição genética?

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 Kriggs et al, 1997

 Extração de DNAmt de um Neanderthal alemão

(1856)
 0,4g do úmero
 Sequenciou-se 379 pb (região hipervariável I)

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 Comparações
Espécies Divergências

Homem – homem 8,0 ± 3,0

Homem – neanderthal 25,6 ± 2,2

Homem – chimpanzé 55,0 ± 3,0

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 Comparações
Linhagem Divergências

Europeus 27,1 ± 2,2

Africanos 27,7 ± 2,1

Asiáticos 27,7 ± 2,1

Ameríndios 27,4 ± 1,8

Australianos 28,3 ± 3,7

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 Divergências da datação
 Aplicando relógio molecular...
 550 a 690 mil anos

 Datação da paleontologia...
 300.000 anos

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 Outros fósseis
 Criança neanderthal da Rússia, 1999
 Terceiro fóssil, da Croácia, 2000.

 Resultados semelhantes.

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 Importância clínica
 1988: primeira associação entre enfermidade e
mutação no DNAmt.
 Muitas doenças estão relacionadas com o
DNAmt como: Alzheimer, diabetes mellitus e
hipoparatiroidismo.

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 Doenças neurológicas
 Síndromes:
 MELAS
 MERRF

 CPEO

 Síndrome de Kearns-Sayre

 LHON

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 MELAS
 Lesões cerebrais de desenvolvimento súbito
 Dores de abeça
 Miopatia
 Ataxia
 Acidose láctica
 80% dos casos: A3243G (RNAt para leucina)
 Biópsia: fibras vermelhas-ásperas.

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 MERRF
 Demência
 Lipomatose simétrica múltipla
 Déficit no trato corticoespinal
 Atrofia óptica
 Surdez
 Neuropatia periférica
 Cardiomiopatia
 Disfunção renal
 80% dos casos: A8344G (RNAt para lisina)

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 Diabetes
 1,5% dos casos de diabetes apresenta mutação
no DNAmt. (dados da Europa)
 Defeito na secreção de insulina
 Atrofia das células beta
 Associada com sinais neurológicos

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 Outras enfermidades
 Apnéia do sono
 Aminoacidúria.
 Males digestivos
 Infertilidade
 Hipertrofia cardíaca

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 “Hot spots”
 Há mutações patogênicas em 21 dos 22 genes
para RNAt mitocondriais (exceção apenas para o
RNAt para Arginina).
 Malfuncionamento:
 Baixa estabilidade
 Dificuldade de aminoacilação

 Perda de afinidade com o RNAm

 outros

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 Tratamento
 Anti-oxidantes
 Creatina
 Coenzima Q10
 Terapia combinada

 Não há cura para as doenças mitocondriais.

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 Considerações finais
 Fins evolutivos:
 Subsídio para discussão
 Discussão sobre relógio molecular

 Incompatibilidade com alguns achados fósseis.

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 Transmissão paterna
 Homem de 28 anos, fadiga muscular extrema
músculos absorviam pouco oxigênio
comparando os DNAmt verificou-se que:
90% das mitocôndrias dos miócitos eram de
origem paterna
embora do cabelo, sangue e dos fibroblastos
eram totalmente maternos.
www.newscientist.com
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 “Partenogênese”

 Loebel e Tam, 2004

 Fusão de células
gaméticas femininas

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 A polêmica do Neanderthal

 Fóssil de João Zilhão: híbrido entre humano e

neanderthal.
 Contribuição masculina?

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 Importância
 Compreensão de doenças
 1 em cada 8.000 doentes
 farmacogenômica

Uma herança relevada por muito tempo, diante

de tanta informação, agora celebra modestamente sua
importância e justifica serenamente o título de estar-
se vivendo o que se chama de era mitocondrial.

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