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DETERMINACION DE LIPIDOS EN ALIMENTOS

Los lípidos se definen como un grupo heterogéneo


de compuestos que son insolubles en agua pero
solubles en disolventes orgánicos tales como éter,
cloroformo, benceno o acetona.
Métodos de extracción y cuantificación
El contenido total de lípidos se determina comúnmente
por métodos de:
1.- Extracción con disolventes orgánicos (por ejemplo
Soxhlet, Goldfish, Mojonnier), sin embargo también
puede cuantificarse por métodos de :
2.-Extracción que no incluyen disolventes (por ejemplo,
Babcock, Gerber) y por:
3.- Métodos instrumentales que se basan en
propiedades físicas o químicas de los lípidos (por
ejemplo, infrarrojo, densidad y absorción en rayos X)
1.- Extracción con Disolventes
Orgánicos

-Método de Soxhlet

-Es una extracción semi-continua con


un disolvente orgánico. En este
método el disolvente se calienta, se
volatiliza y condensa goteando sobre
la muestra la cual queda sumergida en
el disolvente. Posteriormente éste es
sifonado al matraz de calentamiento
para empezar de nuevo el proceso. El
contenido de grasa se cuantifica por Esquema de extracción Soxhlet.
diferencia de peso
Método de Soxhlet Agregar dos cargas del disolvente
Colocar a peso constante un (generalmente éter etílico) por el
matraz bola de fondo plano con refrigerante y calentar el matraz
perlas o piedras de con parrilla a ebullición suave. Para
ebullición en la estufa a 100ºC, verificar que se ha extraído toda la
aproximadamente 2 hrs. grasa, dejar caer una gota de la
Pesar de 4 a 5 g de muestra descarga sobre papel filtro, al
sobre un papel, enrollarlo y evaporarse el disolvente no debe
colocarlo en un cartucho de dejar residuo de grasa.
celulosa, tapar con un algodón Una vez extraída toda la grasa,
(No apretar el algodón contra la quitar el cartucho con la muestra
muestra) y colocar el cartucho desengrasada, seguir calentando
en el extractor. Conectar el hasta la casi total eliminación del
matraz al extractor, en el que se disolvente, recuperándolo antes de
debe encontrar el cartucho con que se descargue. Quitar el matraz y
la muestra, y posteriormente secar el extracto en la estufa a
conectar éste al refrigerante. 100ºC por 30 min., enfriar y pesar.
(No poner grasa en las juntas).
Método de Goldfish
Es una extracción continua con un disolvente orgánico. Éste
se calienta, volatiliza para posteriormente condensarse
sobre la muestra. El disolvente gotea continuamente a
través de la muestra para extraer la grasa. El contenido de
grasa se cuantifica por diferencia de peso entre la muestra o
la grasa removida
Colocar un vaso para Goldfish en la estufa a 100ºC hasta
peso constante, aproximadamente 2 hrs.
Pesar de 4 a 5 g de muestra sobre un papel, enrollarlo y
colocarlo en un cartucho de celulosa, tapar con un algodón.
Situar el cartucho en un recipiente con el fondo perforado y
colocarlo en el sostenedor del equipo.
Adicionar en el vaso para Goldfish aproximadamente 40 mL del disolvente
éter etílico) y colocarlo en el equipo mediante un anillo de hierro con
empaque de hule.
Subir la parrilla girando hacia un lado y al contrario. Calentar hasta la
extracción completa de la grasa. Para verificar que se ha extraído toda la
grasa, dejar caer una gota de la descarga sobre papel filtro, al evaporarse
el disolvente no debe dejar residuo de grasa.

Al finalizar, cambiar el sostenedor del cartucho por un recipiente sin


perforación y calentar de nuevo para recuperar el disolvente del vaso.
Quitar el vaso del equipo y secar el extracto en una estufa a 100ºC por 30
min., enfriar y pesar.
Calcular el porcentaje de grasa.
MÉTODO DE SOXHLET
CÁLCULOS

%GRASA=gr. GRASA EN LA MUESTRAx100


gr. EN LA MUESTRA SECA
Método de Mojonnier

La grasa es extraída con una


mezcla de éter etílico y éter de
petróleo en un matraz de
Mojonnier, la grasa extraída se
pone a peso constante y es
expresada en porcentaje de
grasa por peso.
La prueba de Mojonnier es un
ejemplo de extracción
discontinua con disolvente.
Esta extracción no requiere Matraz de extracción
remover previamente la Mojonnier
humedad de la muestra.
PROCEDIMIENTO Decantar la fase etérea en
un matraz bola previamente
Pesar 10g de muestra y colocarla en puesto a peso constante.
el tubo de extracción Mojonnier Repetir la extracción 3
Adicionar 1 mL de hidróxido de
veces usando una mezcla
amonio 0.88 N y mezclar. Adicionar
10 mL de etanol, mezclar y enfriar. de 5 mL de etanol, 25 mL
Adicionar 25 mL de éter etílico, de éter etílico y 25 mL de
tapar el tubo y agitar vigorosamente éter de petróleo.
por un minuto. Adicionando el extracto en
Enfriar, adicionar 25 mL de éter de
el matraz bola.
petróleo, agitar vigorosamente por
30 s). Dejar reposar por 30 min o Evaporar el disolvente en
hasta que esté completamente rotavapor, secar el extracto
separada la fase orgánica. Si es lipídico en la estufa a 100ºC
necesario, adicione agua destilada durante 1 h y pesar.
para establecer una interfase entre
Calcular el porcentaje de
los 2 líquidos en la parte mas
angosta del tubo. grasa.
2.-EXTRACCIÓN QUE NO INCLUYEN DISOLVENTES ORGANICOS
Método de Gerber.
Éste, así como los demás métodos
volumétricos presentan un carácter un
tanto empírico ya que varios factores
afectan la gravedad específica de la
grasa separada, variaciones propias de
la grasa, ácidos grasos presentes,
solubilidad de la grasa en los
disolventes, etc.
Con estos métodos volumétricos la
muestra se sitúa en un butirómetro y se
descompone utilizando ácidos o álcalis
de manera que la grasa es liberada,
esta se separa por métodos mecánicos
(centrifuga) y se colecta en el cuello
calibrado.
Medir, en una probeta, 10 mL de
ácido sulfúrico Gerber y añadirlos
dentro del butirómetro.
La grasa está en la leche en forma de
pequeños glóbulos rodeados por una capa
protectora. La separación completa de la
grasa precisa la destrucción de esta
envoltura protectora.
Este proceso se lleva a cabo por medio del
ácido sulfúrico concentrado, de entre el 90
y el 91 % de masa (ácido sulfúrico
Gerber).
Una vez preparada la muestra, tomar
11 mL de leche e introducirlos en el
butirómetro

En este paso, el butirómetro se calienta considerablemente y


los productos que se forman tiñen la disolución de color
marrón. La grasa liberada en este proceso será separada
posteriormente por centrifugación.
Añadir 1 mL de alcohol amílico al
butirómetro y cerrarlo.
Agitar bien la mezcla.

Centrifugar los butirómetros


Los butirómetros se introducen en la
centrifugadora y se centrifugan
durante unos cinco minutos.

Lectura del resultado


En la escala del butirómetro se puede
leer el contenido en grasa de la leche
como contenido de masa en tanto por
ciento (en la imagen 1,9%).
TAREA