Enfermedades

Reumatológicas
DOCENTE: M.C Jaime Vargas
CURSO: Laboratorio Clínico
 Sistema inmune
• El sistema inmunológico es aquel conjunto
de estructuras y procesos biológicos en el
interior de un organismo que le permiten
mantener la homeostasis o equilibrio
interno frente a agresiones externas, ya
sean de naturaleza biológica (agentes
patógenos) o físico-químicas (como
contaminantes o radiaciones), e internas
(por ejemplo, células cancerosas)
CELULAS NO LINFOIDES
• Son efectores de reacciones inmunes desencadenadas
por distintos factores.
NEUTROFILOS
• Su cantidad es del 50% al 70% de los leucocitos. Su
número absoluto se considera entre 3,000 a 6,000
por milímetro cúbico de sangre. Su función más
importante es actuar en las inflamaciones agudas.
• Son un tipo de glóbulo blanco, de tipo de
granulocito, cuya principal función es fagocitar y
destruir a bacterias y participar en el inicio del
proceso inflamatorio. Los neutrófilos se
caracterizan por tener un núcleo lobulado y gran
cantidad de gránulos y lisosomas en su citoplasma
con diferentes contenidos que les permiten realizar
sus funciones específicas.
• Según la forma de su núcleo se los puede clasificar
en neutrófilos en banda o cayados y en neutrófilos
segmentados. Presentan divisiones de sus núcleos
en lóbulos en un número que va de 3 a 5. Si es
mayor el número de divisiones nucleares se habla
de neutrófilos hipersegmentados.
Eosinofilos
• Se encuentran entre el 1% y el 4% de las
células de sangre periférica. Su número
absoluto es de 120 a 350 por milímetro cúbico
de sangre. Tiene una función reguladora en las
alergias. Un número elevado de eosinófilos en
la sangre periférica puede ser un indicador de
que la persona sufre de parasitosis.
• Se producen en la médula ósea (el tuétano de
los huesos) y se encuentran normalmente en
la sangre y en la mucosa que tapiza por dentro
los intestinos.
• Contienen proteínas que ayudan al organismo
a luchar contra la infestación por parásitos,
por ejemplo las lombrices. Pero en algunas
enfermedades, estas proteínas de los
eosinófilos pueden dañar, en vez de ayudar, al
organismo.
CELULAS NO LINFOIDES
Basofilos
• Constituyen solo el 0.5% de los
leucocitos de la sangre periférica. Su
número llega a 40 por milímetro
cúbico de sangre. Pueden acumularse
en zonas donde se producen
reacciones alérgicas.
• Los basófilos, en conjunto con los
mastocitos y plaquetas, secretan
mediadores inflamatorios que atraen a
los leucocitos hasta el punto de
infección.
• Los gránulos basófilos se tiñen de
color azul oscuro, y contienen
histaminas que causan vasodilatación
y heparina que actúa como un
anticoagulante.
Monocitos
• Los monocitos comprenden de 2% al 8% de
los leucocitos sanguíneos. El número absoluto
son de 200 a 300 por milímetro cúbico de
sangre. Los monocitos sirven como
precursores de los macrófagos. Tiene una vida
media de tres días, para luego migrar fuera
del torrente sanguíneo.
• Los Monocitos son células fagocíticas con
gran capacidad bactericida. Ante estímulos de
sustancias químicas siguen a los neutrófilos
en la reacción inflamatoria. Por la fagocitosis
aumentan de tamaño y pueden fijarse a los
tejidos del baza, hígado y pulmón, dando
lugar a los macrófagos tisulares que forman el
sistema retículo endotelial encargado de
remover el material extraño que circula en la
sangre.
INMUNOGLOBULINAS
• las principales Inmunoglobulinas en sangre son la IgM, IgG y la IgA estos anticuerpos provienen de la
exposición continuada a multitud de antígenos extraños. Las inmunoglobulinas de la sangre funcionan
uniéndose a los antígenos Invasores en la superficie de células extrañas bacterias o virus y facilitando su
destrucción mediante efectores inespecíficos como el complemento y las células NK. La monitorización
incluye análisis cualitativo para la detección clonal frente a la policlonal.
SISTEMA DE COMPLEMENTO
• Sistema de defensa y limpieza, constituido por una serie de proteínas solubles que pueden ser
activados por Ag o reacciones Ag-Acs produciendo lisis del microorganismo.
• Es uno de los componentes fundamentales de la conocida respuesta inmunitaria defensiva ante un
agente hostil (por ejemplo, microorganismos). Consta de un conjunto
de moléculas plasmáticas implicadas en distintas cascadas bioquímicas, cuyas funciones son
potenciar la respuesta inflamatoria, facilitar la fagocitosis y dirigir la lisis de células incluyendo
la apoptosis. Constituyen un 15% de la fracción de inmunoglobulina del suero
Funciones principales
• Reconoce los complejos Ag-Ac., también polisacáridos y se une a ellos.
• Genera moléculas que al unirse a la membranas de bacterias, actúan como opsoninas para activar la
fagocitosis.
• Lisa células, bacterias, virus y parásitos.
• Unión a receptores del complemento en células del sistema inmunitario desencadenando inflamación.
• Induce la desgranulación de mastocitos.
• Depura de la circulación los complejos inmunitarios.
• Potencializa la producción de Acs.
PRUEBAS DE INMUNOENSAYO
• Es una prueba que usan complejos antígeno: anticuerpo Analito es todo lo que
(también denominados inmunocomplejos) para medir la se mide en una
presencia de un analito¹ específico en una muestra. “Inmuno” prueba de laboratorio.
se refiere a una respuesta inmunológica que hace que el En el inmunoensayo,
cuerpo genere anticuerpos, y “ensayo” se refiere a una prueba. el analito puede ser
Entonces, un inmunoensayo es una prueba que utiliza tanto un Ac como un
inmunocomplejos cuando hay una unión Ag-Ac. Ag.
• Los Inmunoensayos se diferencian de otros tipos de pruebas de
laboratorio (como las pruebas colorimétricas) ya que usan
complejos Ac-Ag para generar una señal que pueda medirse.
• Los Acs son la base de los inmunoensayos, ya que poseen una
alta especificada y afinidad para un Ag específico. Es esta unión
lo que permite la detección de analitos por medio de una
variedad de técnicas de inmunoensayo.
RADIOINMUNOENSAYO
• Esta técnica se utiliza para detectar y cuantificar sustancias que se encuentran en cantidades muy
pequeñas y mezcladas con muchas otras. Es por tanto una técnica muy sensible y muy específica.
Utilizando anticuerpos de gran afinidad se pueden detectar hasta picogramos de antígeno.
El fundamento es muy sencillo:
• Se mezcla una cantidad constante de antígeno marcado radioactivamente y una cantidad
constante de un anticuerpo para ese antígeno
• Se produce la reacción entre antígeno (Ag) y anticuerpo (Ac)
• se separa la fracción de antígeno que se ha unido de la que permanece libre (hay varias formas
de hacerlo. En la figura inferior se utiliza un 2º anticuerpo dirigido contra el primero)
• se determina la radioactividad
• Si la muestra contiene además antígeno frío (no marcado), éste competirá con el marcado para
unirse al anticuerpo, y se observará un descenso en la medida de la radioactividad
• Este descenso es proporcional a la concentración de antígeno frío en la muestra
 la radiactividad
en el precipitado
se mide

Conocer la cantidad cantidad fija de la adición de anticuerpos anti-

de antígeno marcado anticuerpo específico se inmunoglobulina precipita el
radiactivamente agrega complejo de antígeno
marcado con anticuerpos

la diferencia entre
las actividades de
radiación en el
control y la
muestra
desconocida es
proporcional a la
cantidad de
conocer la cantidad de el antígeno no además de anti- antígeno no
antígeno marcado marcado compite con inmunoglobulina marcado en la
radiactivamente el antígeno marcado precipita el complejo muestra
mezclado con una para el anticuerpo anticuerpo-antígeno que desconocida
cantidad desconocida de contiene antígeno
antígeno no marcado marcado y no marcado
 RADIOINMUNOENSAYO ENZIMATICO:
Se utiliza para detectar y cuantificar sustancias que se encuentran en
cantidades muy pequeñas y mezcladas con muchas otras. Es por tanto
una técnica muy sensible y muy específica. Utilizando anticuerpos de gran
afinidad se pueden detectar hasta picogramos de antígeno. (1 pg = 10-12 g).

Se mezcla una cantidad constante de antígeno marcado radioactivamente y una

cantidad constante de un anticuerpo para ese antígeno.
Se produce la reacción entre antígeno (Ag) y anticuerpo (Ac).
Se separa la fracción de antígeno que se ha unido de la que permanece.

Se determina la radioactividad.
Si la muestra contiene además antígeno frío, éste competirá con el marcado para
unirse al anticuerpo, y se observará un descenso en la medida de la radioactividad.
INMUNOENSAYO POR POLARIZACION DE
FLUORESCENCIA (FPIA):
• Inmunoensayo por Polarización de Fluorescencia (FPIA) es un tipo de
inmunoensayo homogéneo competitivo por fluorescencia. Con la
unión competitiva, el antígeno de una muestra y el reactivo marcado
antígeno-fluoresceína (AgF) compiten por los puntos de unión en el
anticuerpo. Como inmunoensayo homogéneo, la reacción se lleva a
cabo en una solución de reacción simple, y el complejo Ab-AgF no
requiere un paso de lavado para separarlo de la marca AgF “libre”.
• El reactivo FPIA incluye:
– S: Reactivo para anticuerpo: Antisuero para Analito
– T: Indicador radioactivo (Tracer): Analito marcado fluoresceína
– P: Detergente para pretratamiento: facilita la liberación de la droga de las
proteínas del suero.
Los resultados de FPIA se muestran como una curva inversa por cuanto a valores
bajos de analito del paciente producen una señal más alta (en este caso, la señal es
luz polarizada). Una señal alta a niveles bajos de analitos del paciente dan como
resultado un ensayo muy sensible.
 RADIOINMUNOENSAYO QUIMIO
LUMINISCENTE:
• Los compuestos quimioluminiscentes también pueden usarse para
marcar analitos. Los compuestos quimioluminiscentes son distintos
de los marcados radioactivos, fluorescentes, y enzimáticos. Una
marca quimioluminiscente produce luz cuando se lo combina con un
reactivo “trigger”. Aunque muchos instrumentos en el laboratorio
clínico se basan en la tecnología quimioluminiscente, el tipo
específico de marca varía y a menudo está patentado, y por ello
puede variar la performance.
• En el caso de Abbott ARCHITECT ® (De Abbott Laboratories, Chicago,
Illinois, Estados Unidos), por ejemplo, la marca es un derivado de
acridina patentado. Esta marca produce una alta emisión de luz, y por
consiguiente alta sensibilidad (Es más fácil medir una gran
concentración de luz).
• Las técnicas de MEIA y CMIA usan micropartículas para fijar
anticuerpos, pero existen otras similitudes y diferencias también
(Tabla 2-11). La marca, la etapa de separación y la tecnología de
medición difieren entre estas dos técnicas.
SISTEMA INMUNE CELULAR:
• Factor Reumatoide:

Este examen es posiblemente uno de los más antiguos en el diagnóstico

reumatológico. Se basa en la detección de inmunoglobulina, generalmente de
tipo IgM dirigidos contra fragmento Fc de la IgG. Se han descrito también factor
reumatoide IgA e IgG cuyo rol diagnóstico no es claro. Las técnicas mediante las
cuales se realiza han ido evolucionando con el tiempo y hoy día se realizan
mediante técnicas de ELISA cuantitativas o mediante técnicas de precipitación,
las cuales se expresan como dilución (títulos de dilución).
• Una vez establecido el diagnóstico de AR, el FR no tiene un rol importante
en el seguimiento de la enfermedad y no hay buenas razones para solicitar
este examen más allá de establecer el diagnóstico. En otra enfermedad en
que frecuentemente se ve elevado el FR, como es el síndrome de Sjögren,
una caída en los títulos de FR puede ser un aviso de la aparición de una
enfermedad linfoproliferativa en este contexto.
ANTICUERPOS ANTINUCLEARES:

Homogéneo: Que es el más inespecífico, pero el más común de observar. [REV. MED. CLIN. CONDES -
2012; 23(4) 371-376] 373 Periférico: Es infrecuente, pero su presencia debe orientar fuertemente a un
lupus eritematoso sistémico.

Moteado: El cual orienta a la presencia de anticuerpos dirigidos contra proteínas no DNA del núcleo, y
asociado muchas veces con la presencia de otros anticuerpos denominados anticuerpos contra antígeno
extractables nucleares o ENA. Se pueden observar en muchas condiciones pero su asociación más
habitual es con lupus o síndrome de Sjögren.

Nucleolar: Es infrecuente y su presencia orienta a cuadros como las polidermatomiositis.


ANTICUERPOS ANTIANTÍGENOS
EXTRACTABLES NUCLEARES (ENA):
ANTICUERPOS ANTI DNA:
ANTICUERPOS ANTICITOPLASMA DE
NEUTRÓFILOS (ANCA):
Anti Ro, asociado a Sjögren y Lupus Anti La asociado a
Sjögren y Lupus Anti Sm muy especifico de Lupus Anti RNP
marcador de la Enfermedad Mixta del Tejido Conectivo Anti
SCL-70 se asocia fuertemente con esclerodermia difusa. Anti
Jo-1, asociado a una variante de las dermatomiositis
denominado síndrome antisintetasa. La presencia de estos
anticuerpos tiene mayor valor diagnóstico que los ANA, ya
que la presencia de falsos positivos es mucho más rara.
La presencia de estos anticuerpos se hace generalmente por
medio de IFI. Sin embargo existen otras dos técnicas en uso,
la de ELISA y la por radioinmunoensayo, denominada para
este caso técnica de Farr. La IFI ha sido validada ampliamente
y es la técnica standard en la determinación de los anti-DNA.
Se pueden determinar por medio de IFI, técnica que permite
identificar dos patrones de fluorescencia, un patrón
perinuclear, denominado consecuentemente ANCAp y uno
citoplasmático denominado ANCAc.
CITOMETRIA DE FLUJO:
• La citometría de flujo (CMF) constituye una técnica de avanzada,
automatizada, objetiva y altamente sensible, muy útil para el estudio
del inmunofenotipo de las células normales y anormales.

Los especímenes más utilizados en hematología, inmunología y hemoterapia

para su inmunofenotipaje son variados y habitualmente incluyen: aspirados de
médula ósea (MO), sangre periférica (SP) y sangre de cordón
umbilical.4 Pueden emplearse también los productos de leucoféresis y
transfusión como los concentrados de hematíes, de plaquetas y el plasma.
Se estudian, además, especímenes procedentes de tejidos linfoides como
ganglio linfático, bazo y timo; y de tejidos no linfoides, como por ejemplo: piel,
hígado, mucosa gástrica e intestino. En este caso, pueden haberse obtenido
por procedimientos quirúrgicos, biopsia o punción-aspiración con aguja fina
(PAAF).
 CITOCINAS
Son proteínas segregadas por células no endocrinas que influyen sobre las
funciones biológicas de células del entorno.
Son el medio por el que se regulan las respuestas inmunes celulares, son
mediadores que actúan a corto plazo y que son elaborados por algunas células
y pueden actuar sobre muchos tipos celulares diferentes .
 MOLECULAS DE ADHESION
o Son glucoproteínas que promueven la unión física entre las células

o Participan en el reconocimiento antigénico y en la migración celular.

o Atraviesan la membrana celular y se une al citoesqueleto facilitando el

desplazamiento celular. Son los siguientes:

Selectinas.- Presente el los leucitos y endotelio .

Provoca adhesion celular débil
(E-selectinas, P-selectinas y L-selectinas).
Integrinas .-esta presente en numerosas células se clasifican en 3
subfamilias : β1, β2, β3
Adhesinas .- son moléculas de la superfamilia de las inmunoglobulinas
LUPUS EROTIMATOSO SISTEMICO (LES)
Es una enfermedad crónica inflamatoria multisistemica en la que existe
una producción exagerada de autoanticuerpos que pueden dañar
prácticamente cualquier órgano o sistema con curso y pornostico
variable.
Afecta frecuentemente a la piel pulmón vasos sanguíneos hígado
riñones y sistema nervioso
anticuerpos en el LES

Los anticuerpos nucleares Los anticuperos anti-adn se

Los anticuerpos mas correlaciona con la actividad de
Se presentan en el 98% de
específicos son lo anti-sm la nefritis
los pacientes
CRITERIOS INMUNOLÓGICOS
1.- ANTICUERPOS ANTI NUCLEARES (por encima del rango de
referencia)
2.- ANTI-ADN DE DOBLE CADENA
3.- ANTI-SM
4.- ANTICUERPOS ANTIFOSFOLÍPIDOS -Anticoagulante lúpico -VDRL
falsamente positivo -Anticardiolipinas a títulos intermedios o altos -Anti
Beta 2 glicoproteína 1
5.- HIPOCOMPLEMENTEMIA 6.- COOMBS DIRECTO POSITIVO (en
ausencia de anemia hemolítica
 ANTICUERPOS ANTINUCLEARES (ANA)

Son anticuerpos circulantes contra antígenos nucleares de las propias celulas del organismo.

• Los títulos altos o moderados frente al ADN de

cadena simple (desnaturalizado) y, sobre todo,
Anticuerpos anti-ADN frente al ADN de doble cadena («natural») son muy
específicos para el LES.

• Aparecen en el LES (70%] y en el lupus inducido por

Anticuerpos frente a fármacos (estos últimos no suelen desarrollar
histonas anticuerpos contra proteínas nucleares distintas a
las histonas, lo cual les distingue del LES).

Anticuerpos frente a
proteínas nucleares distintas
a las histonas y frente a
complejos ARN-proteínas
(ribonucleoproteínas):
• Sm: muy específico del LES, predice un LES con
afectación renal grave.
• Ro/SSA y La/SSB: Lupus cutáneo subagudo y lupus
neonatal.
 ¿CÓMO SE REALIZA?
La mayoría de los laboratorios emplean células HEp2 (Human epithelial cell tumor
Une)  nucléolos evidentes y sensibilidad de detección de anticuerpos frente a
antígenos nucleares presentes durante la división celular.
Se incuban las células HEp2 fijadas con acetona con el suero del paciente y,
después, se expone esta mezcla con anticuerpos antiglobulinas humanas marcados
con fluoresceína
Se mira la preparación al microscopio fluorescente; en caso de positividad
(inmunofluorescencia indirecta) se observa un patrón nuclear verde manzana.
Se estudia el patrón de fluorescencia y la dilución a la cual la fluorescencia
desaparece (valor).
Algunos anticuerpos específicos pueden ser interpretados directamente como los
anticentrómeros. Sin embargo, para determinar la presencia del resto de
autoanticuerpos es necesario realizar otras pruebas (ELISA, inmunofluorescencia).
son positivos en: INTERPRETACION
99% de pacientes con Lupus Eritematosos Sistémico
40%-80% con otras enfermedades del tejido conectivo
20% con tiroiditis autoinmune y enfermedades hepáticas
En 5% de adultos sanos, principalmente de edad
Una prueba negativa virtualmente elimina el LES
No tienen valor en la evaluación de la actividad
 ESCLERODERMIA
enfermedad autoinmune fibrosantesdel tejido conjuntivo que afectan
principalmente a la piel, pero que también pueden implicar estructuras
subyacentes, como la grasa, las fascias, los músculos, los huesos, diversos órganos
internos (tracto gastrointestinal, pulmón, riñón, corazón y otros), la membrana
sinovial y los vasos sanguíneos.existen dos tipos:

La sistémica (esclerosis sistémica, SSc), que por

lo general afecta a la piel y los órganos o
sistemas internos del cuerpo.

La localizada, que afecta solamente a un área

local de la piel en forma de placas (morfea),
una franja a lo largo de un brazo o una pierna
(esclerodermia lineal)
NO HAY AFECCION VISCERAL
 ANTICUERPOS ANTI-PEPTIDO CITRULINADOS
(a –CCP)
La citrulina es una modificación del aminoácido arginina

Peptidos y proteínas citrilados se liberan y entran en contacto con el sis. Inmune

promoviendo la formación de anticuerpos contra ellos

Los a-CCP son equivalentes a los anticuerpos antifilagrima que detectaban en suero
de pacientes con artritis reumatoide estudiados por inmunofluorecencia indirecta

Su SENSIBILIDAD en el diagnostico de A.R. Es superior al 70% y su especificidad es 98%

El valor predictivo positivo de la presencia conjunta de factor reumatoide y a-CPP es

prácticamente al 100%
El término ENA se refiere a “antígenos nucleares extractables”:
• Ro (SS-A),
• La (SS-B),
• Sm,
• RNP,
• Scl-70,
• Jo-1.
 CASO CLINICO
LUPUS ERITEMATOSO SISTÉMICO
• Paciente varón de 18 años, mestizo, natural y procedente de Andahuaylas, previamente
sano, sin antecedentes patológicos, personales y familiares de importancia. Inició su
cuadro clínico 8 meses antes del ingreso, con dolor y tumefacción en ambas rodillas, que
se intensificaban luego de actividad física
• Al ingreso refería hiporexia y disminución ponderal de 10 kg en los últimos 4 meses. Las
funciones vitales fueron: frecuencia cardiaca de 90 latidos por minuto, 22 respiraciones
por minuto, presión arterial de 100/60 mmHg, peso de 52 kg e índice de masa corporal
de 18,42 kg/m2. Ectoscópicamente, el paciente no tenía facies característica, estaba
hidratado y adelgazado, colaborando con el examen. Piel pálida, lecho ungueal con
cianosis y frialdad acral, además de lesiones purpúricas palpables en tercio inferior de
ambas piernas, con leve edema en tercio inferior de pierna derecha.
• Al examen del sistema osteomioarticular, se encontró dolor, tumefacción de partes
blandas y limitación funcional bilateral, en articulaciones metatarsofalángica (MTF),
interfalángicas proximales (IFP), muñecas, codos, tobillos y rodillas; además, se evidenció
desviación cubital en ambas muñecas