CINÉTICA ENZIMÁTICA

MECANISMO DE CATÁLISIS
INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
 CINÉTICA ENZIMÁTICA

1. [E]
ESTUDIA LA 2. [S]
VELOCIDAD DE LAS
REACCIONES 3. pH,
ENZIMÁTICAS Y 4. FUERZA IÓNICA
LOS FACTORES QUE
5. TEMPERATURA
LA AFECTAN.
6. INHIBIDORES
7. ACTIVADORES.
 PARÁMETROS CINÉTICOS

Km CONCENTRACIÓN
DE [S] A LA CUAL SE
CONSTANTE DE ALCANZA LA MITAD
MICHAELIS - DE LA Vmax
MENTEN

ES UNA MEDIDA
ES UNA INVERSA DE LA
CONSTANTE DE AFINIDAD DE LA
AFINIDAD DE LA ENZIMA POR EL
ENZIMA POR UN SUSTRATO
SUSTRATO
ESPECÍFICO.
 PARÁMETROS CINÉTICOS
Km PEQUEÑA Km GRANDE
ALTA AFINIDAD DE BAJA AFINIDAD DE
LA ENZIMA POR EL LA ENZIMA POR EL
SUSTRATO SUSTRATO
 PARÁMETROS CINÉTICOS

V max
SE ALCANZA
CUANDO TODOS
LOS SITIOS ACTIVOS
DE LA Enzima
ESTÁN SATURADOS
POR EL Sustrato
SIENDO
[S] >>Km
COMPARACIÓN DE ENZIMA MICHAELIANA
Y NO MICHAELIANA

GLUCOCINASA
Km = 10 mmol / L
V max = 1,5 μmol/min/g
de tejido hepático
EC 2.7.1.2

HEXOCINASA
Km = 0,2 mmol / L
V max = 0,1 μmol/min/g
de tejido hepático
EC 2.7.1.1
ECUACION DE MICHAELIS - MENTEN

MICHAELIS Y MENTEN
ELABORARON UN
MODELO SIMPLE PARA
EXAMINAR LA CINÉTICA
DE LAS REACCIONES

ECUACIÓN DE
MICHAELIS - MENTEN:
PARA LA REACCIÓN
ECUACION DE MICHAELIS - MENTEN
SE BASA EN LAS
SIGUIENTES
SUPOSICIONES

E, S y ES están en
equilibrio rápido

A parte de E Y ES
no hay otras
formas presentes
de enzima LIMITANTE: VALIDO
GENERALMENTE PARA
SISTEMAS ENZIMÁTICOS
La conversión de UNI-REACTIVOS SENCILLOS
ES en E + P es un
paso irreversible
REPRESENTACIÓN DE LINEWEAVER-BURK

SE GRAFICAN LOS VALORES

RECÍPROCOS DE LA V Y LA
⦋S⦌ GENERANDO UNA
GRÁFICA DE DOBLES
RECÍPROCOS

NOS PROPROCIONA UNA

GRÁFICA LINEAL CON LOS
VALORES EXACTOS DE LA
Km Y LA V max
MICHAELIS – MENTEN Y LINEWEAVER-
BURK
CATALISIS
CATALISIS ENZIMÁTICA: TEORIAS

FISCHER 1894 KOSHLAND 1958

CATALISIS ENZIMÁTICA
CATÁLISIS ENZIMÁTICA: TIPOS

ÁCIDO - BASE

COVALENTE

IONES METÁLICOS
SITIO ACTIVO
 CATÁLISIS: ÁCIDO - BASE
LA ENZIMA PROPORCIONA GRUPOS FUNCIONALES
CAPACES DE ACTUAR COMO DADORES O ACEPTORES DE
PROTONES

SE DA POR INCREMENTO O DISMINUCIÓN DEL pH.

EL CATALIZADOR ACTÚA COMO ACEPTOR O DADOR DE

PROTONES

PROPORCIONA UN MEDIO PARA EFECTUAR LA CATÁLISIS

A pH NEUTRO (EN EL QUE LAS CONCENTRACIONES DE H+
Y DE OH- SON MUY BAJAS)

LAS REACCIONES QUÍMICAS DE OTRO MODO

NECESITARÍAN CONCENTRACIONES MUY ELEVADAS DE
ESOS IONES.
CATALISIS ÁCIDO - BASE
ENZIMAS: MECANISMO DE CATALISIS
CATALISIS COVALENTE
CATÁLISIS POR IONES METÁLCIOS
CATÁLISIS POR IONES METÁLICOS
 ISOENZIMAS

SON DIVERSAS FORMAS MOLECULARES

CATALIZAN LA MISMA SECUENCIA DE AA
REACCIÓN SEMEJANTES, NO IDENTICAS

PRESENTAN DISTINTAS PROPIEDADES CINÉTICAS,

REGULADORAS, ANTIGÉNICAS E INCLUSO DISTRIBUCIÓN
CELULAR. LACTATO DESHIDROGENASA, CICLOOXIGENASA
ISOENZIMAS
 INHIBIDORES
SON SUSTANCIAS QUÍMICAS PEQUEÑAS
(IONES O MOLÉCULAS) QUE PARTICIPAN EN
LA REGULACIÓN ENZIMÁTICA.

SUMINISTRAN INFORMACIÓN IMPORTANTE

ACERCA DE LA ESTRUCTURA Y/O GRUPOS
FUNCIONALES DEL SITIO ACTIVO.

PERMITE CONOCER LA ESPECIFICIDAD DE

LA ENZIMA POR UN TIPO DE REACCIÓN O
SUSTRATO.

MUCHOS AGENTES TERAPÉUTICOS EJERCEN

SU ACCIÓN FARMACOLÓGICA ACTUANDO
COMO INHIBIDORES ENZIMÁTICOS.
TIPOS DE INHIBICIÓN ENZIMÁTICA

REVERSIBLE IRREVERSIBLE

COMPETITIVA
NO COMPETITIVA
 INHIBICIÓN IRREVERSIBLE
LA UNIÓN E-I ES MUY FUERTE
REACCIONAN CON UN GRUPO
QUÍMICO DE LA ENZIMA

ALTAMENTE TÓXICOS:
ORGANOFOSFORADOS
CIANURO
METALES PESADOS

PARÁMETROS CINÉTICOS: E + I  EI
DISMINUYE Vmax
NO VARÍA Km
 INHIBICIÓN IRREVERSIBLE

LA ACETILCOLINESTERASA
ES UNA ENZIMA DEL
SISTEMA NERVIOSO QUE
HIDROLIZA AL
NEUROTRANSMISOR
ACETILCOLINA.

LOS ORGANOFOSFORADOS
LA INHIBEN
IRREVERSIBLEMENTE.
PACIENTE PUEDE MORIR.
INHIBIDORES COMPETITIVOS

SU ESTRUCTURA ES SEMEJANTE AL SUSTRATO.

EL INHIBIDOR SE UNE AL SITIO ACTIVO DE LA ENZIMA.

AL AUMENTAR LA CONCENTRACIÓN DEL «S» SE

REVIERTE LA INHIBICIÓN.

SE FORMA UN COMPLEJO E-I.

PARÁMETROS CINÉTICOS: Vm NO VARÍA

Km AUMENTA
INHIBICIÓN COMPETITIVA

V MAX ES IGUAL

Km ES MAYOR CON
INHIBIDOR
INHIBICIÓN COMPETITIVA
INHIBICIÓN COMPETITIVA
 INHIBICIÓN NO COMPETITIVA

• ACTÚAN EN UN LUGAR
DEL ENZIMA DISTINTO
AL CENTRO ACTIVO,
LLAMADO SITIO
ALOSTÉRICO.

• CAUSA UNA
MODIFICACIÓN
ESTRUCTURAL QUE
IMPIDE QUE EL
SUSTRATO SE PUEDA
UNIR AL CENTRO
ACTIVO.
INHIBICIÓN NO COMPETITIVA