MAOS-1

Unidad 3
Horas 9,10 y 11

Cadena Respiratoria
(Cadena de Transporte de Electrones)
y

Fosforilación Oxidativa
 OBJETIVO
CONTENIDO
ESPECÍFICO 6

Explicar las 1. Características generales de la cadena

características de la respiratoria.
CADENA 2. Organización y función de los componentes de la
RESPIRATORIA y de cadena respiratoria.
la FOSFORILACIÓN 3. Acoplamiento entre la cadena respiratoria y la
OXIDATIVA. fosforilación oxidativa.
4. Energética de la fosforilación oxidativa. Relación
P/O.
5. Inhibición de la cadena respiratoria, sitios de
inhibición y ejemplos de inhibidores.
6. Inhibición de la fosforilación oxidativa, sitios de
inhibición y ejemplos de inhibidores.
3 horas 7. Mecanismo de acción de los desacopladores de la
cadena respiratoria con la fosforilación oxidativa.
Ejemplos.
LA MITOCONDRIA

CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES
 LA MITOCONDRIA
Partes que la constituyen
Membrana externa (MME):
La MME es muy permeable, a la mayor parte de las moléculas pequeñas
e iones, debido a que contiene muchas copias de una proteína
transportadora llamada Porina, que forma poros que permiten la libre
difusión de moléculas hasta de 10kDa . Estas moléculas entran al EIM,
pero la mayoría no atraviesa la impermeable MMI. Otras proteínas
ubicadas en esta MME incluyen enzimas implicadas en el metabolismo de
los lípidos.
EIM: Es el espacio entre la MME y la MMI. El EIM es químicamente
equivalente al del citosol.
Matriz: este gran espacio interno contiene una mezcla altamente
concentrada de cientos de enzimas, incluyendo aquellas requeridas
para la oxidación del piruvato y los ácidos grasos y las del ciclo del
acido cítrico. La matriz también contiene ADN mitocondrial, ribosomas
mitocondriales ARNt, y varios enzimas requeridas para la expresión de
los genes mitocondriales.
 Membrana Mitocondrial interna (MMI)

Esta plegada formando invaginaciones llamadas crestas, lo que incrementa

grandemente su área total. Es altamente especializada. Contiene una alta
proporción de Cardiolipina un fosfolípido que ayuda a la MMI a ser
especialmente impermeable a iones y moléculas polares. Es permeable
sólo a moléculas pequeñas neutras, como el O2, H2O, y CO2.

Contiene proteínas con 3 tipos de funciones:

1) Las Enzimas que llevan a cabo la reacciones de oxidación de la

cadena respiratoria, las cuales son esenciales para el proceso de
fosforilación oxidativa, el cual genera la mayoría del ATP de la célula
animal.

2) La ATP sintasa que produce ATP en la matriz (fosforilación oxidativa), y

3) Las Proteínas de Transporte (Translocasas), que permiten el pasaje

de metabolitos a través de la MMI.
 Componentes y
funciones
mitocondriales

Fuente: texto Lehninger

Principios de Bioquímica-4ta ed
 la Respiración Celular.
Se divide en 3 etapas para su estudio:
1

La 3 etapas de la
Respiración celular
2

3
Descarboxilación
Oxidativa del
Piruvato

Ciclo
del
Acido Cítrico
Entrada de electrones desde la glicolisis, oxidación del
piruvato, y CAC, a la Cadena respiratoria.
Cadena Respiratoria mitocondrial

Es la fuente principal de energía para

la síntesis de ATP en los animales y
otros organismos eucariontes.
 Membran mitocondrial externa
Membrana mitocondrial interna ATP sintasa

IV III I

CTE
fuera

entra

fuera
CAC

Acetil-CoA

Piruvato Ácidos grasos

Piruvato Ácidos grasos CITOSOL

Moléculas alimenticias del citosol

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/
Texto: biology molecular the cell
 Combustión Oxidación biológica
H2 ½ O2 H2 (*NADH o FADH2 ) ½ O2

Se separan los e- de los H+

2H+ 2e-
La energía es
almacenada
en una
forma útil para
Explosión
la célula, por
Libera energía calórica medio de la
cadena
respiratoria

el hidrógeno (H2) del aire

se mezcla con Oxígeno.
el H2, se oxida a una alta
velocidad, la energía se
H2O libera como calor. 2e- ½ O2
2H+
la reacción de combustión es :
H2(g) + ½ O2(g) → H2O(l) + calor H2 + ½O2 → H2O H2O
1. Características generales de la Cadena respiratoria.

2. Organización y función de los componentes de la

Cadena respiratoria.

3. Acoplamiento entre la Cadena respiratoria y la

fosforilación oxidativa
 Características de la
Cadena Respiratoria (CR)
 Es un conjunto de cuatro (4) complejos enzimáticos firmemente
unidos dentro de la MMI, además de Ubiquinona y Citocromo c,
actuando todos en estrecha asociación, como transportadores
electrónicos.

 El nombre de Cadena Transportadora de Electrones(CTE) hace

énfasis en el hecho de que el sistema es una cadena de
reacciones redox en la que hay interacción sucesiva de
transportadores que transfieren electrones.

 La denominación de CADENA RESPIRATORIA (CR) hace

referencia a que el transportador final de la cadena transfiere los
electrones al oxígeno, es decir el sistema consume oxígeno.
 Características de la
Cadena Respiratoria (CR)
 La CR REOXIDA las coenzimas reducidas NADH y FADH2,
y los electrones que estas transportan , son conducidos ​al
Oxígeno (O2), el ultimo aceptor de electrones.

 Este proceso es esencial para el metabolismo ya que

proporciona NAD+ y FAD que se puede dirigir a las vías
metabólicas que los requieren para seguir funcionando,
como por el ejemplo, el Ciclo del Ácido Cítrico.

 Las Reacciones de Oxidorreducción que se dan en la

CR, liberan energía la cual se utiliza para producir
ATP.
 Características de la Cadena Respiratoria

 Existen 2 puntos de entrada a la CTE:

Un Punto de entrada para la coenzima NADH (el complejo I) y
Un Punto de entrada para la coenzima FADH2 (la CoQ)
 Las reacciones de la CTE se ordenan según el valor de sus
potenciales de reducción , encontrándose el menos positivo en el
extremo izquierdo ( - 0,32 V), y el mas positivo a la derecha (+0,82 V)
, por tanto los electrones fluyen sucesivamente a lo largo de la cadena
hasta que finalmente son transferidos al oxigeno (O2).

Por tanto los electrones pasan a través de los 4 complejos desde los
potenciales de reducción estándar mas bajos hacia los mas altos.

 Contienen unas clases especiales de proteínas :

1. FLAVOPROTEÍNAS
2. PROTEÍNAS FE-S
2. CITOCROMOS .
 Componentes

de la

Cadena Respiratoria
 MME

Espacio
intermembrana Cit c
e¯
e¯
e¯ I III IV
MMI Q
e¯ II
NADH NAD+
FADH2 FAD
H2O
½ O2+ 2H+
Matriz
mitocondrial
MAOS
 (I) Flavoproteínas (fp)
En la CR hay 2 flavoproteínas, estas contienen FMN o
FAD fuertemente unidos, las cuales no se disocian de la
enzima durante su oxidación y reducción, por lo que se
comportan como grupos prostéticos. Estas son:

1. La enzima: NADH deshidrogenasa (también

llamada NADH-Q oxidorreductasa o Complejo I) ,
contiene FMN que recibe los hidrógenos del NADH.

2. La enzima: Succinato deshidrogenasa(también

llamada Complejo II), contiene FAD que recibe los
hidrógenos del Succinato.

Las dos enzimas están fijadas a la MMI.

 (II) Proteínas ferrosulfuradas
Proteinas con Centros hierro-azufre (Fe-S)

Proteína

Proteína

Fe2S2 Fe4S4
Los Centros hierro-azufre, son grupos prostéticos no
hemo, consistiendo de átomos de Fe unidos a S inorgánico y
a 4 átomos de S de los residuos cisteína de la proteína.
Éstos centros Fe-S aceptan y liberan electrones, uno a la
vez.
 (III) Coenzima Q
también nombrada como, Ubiquinona, y abreviada: Q , CoQ10

 La estructura de la Ubiquinona consiste en una 1,4

benzoquinona que contiene en los mamíferos una cadena
lateral hidrófoba de 10 unidades de isopreno (Q10) , que
la hace Soluble en los fosfolípidos en la MMI y, es capaz
de difundir y moverse libremente a través de ésta.
 Se le llama Ubiquinona ( por su ubicuidad , es una quinona que se
encuentra en todas partes )
 Los animales pueden sintetizarla
 Es el único transportador de electrones de la CR que no es una
proteína.
 Es un transportador de átomos de hidrógeno (protones + electrones),
desde las flavoproteínas Complejo I y II, hacia los citocromos.
 Coenzima Q 1
(Ubiquinona) Ubiquinona (CoQ)
4
(forma oxidada)

(Unidad de Isopreno
de 5 Carbonos)
e (1)

Semiquinona (CoQ-)
(radical libre O .

CH3

-CH2-CH=C-CH2 -
2H+ + e (2)

(Unidad de Isopreno)
OH
1
Dihidroquinona (CoQH2) 4
(forma totalmente reducida)
OH
 (IV) Los Citocromos
 Un citocromo es una proteína transportadora de
electrones que contienen un grupo prostético hemo,
con un átomo de hierro.
 El átomo de hierro del hemo sufre una oxidorreducción
reversible: Reducción
+ 1e
Fe+3 Fe+2
Hierro oxidado - 1e Hierro reducido
(férrico) Oxidación (ferroso)

 Hay 5 tipos de citocromos en la CR.

 Los electrones se mueven a través de los 5 tipos de citocromos de
la CR en el siguiente orden:
b c1 c a a3
La unidireccionalidad del flujo de electrones en la CR esta dictada
por la propiedad de los citocromos a tener diferentes E’o
 Hemo tipo b Se encuentra en citocromos b del
complejo Ubiquinona-citocromo c
oxidorreductasa

Fe

Hierro (Fe)

Hemo tipo a
Fe
Se encuentra en citocromos
a y a3 de la
Citocromo c oxidasa

Fe

Hemo tipo c
Se encuentra en citocromos c y c1
La Fijación de un grupo hemo al citocromo (proteína) es covalente
A excepción de la CoQ y el Citocromo c
el resto de los
transportadores electrónicos
se asocian en forma de grandes
Complejos enzimáticos
 Complejos enzimáticos de la CR
No total
Complejo Enzimático Grupos prostéticos de
Subunidades
1. FMN
( Complejo I)
2. Centros Fe-S 43
NADH deshidrogenasa
o NADH-CoQ oxidorreductasa
( Complejo II ) 1. FAD 4
Succinato deshidrogenasa 2. Centros Fe-S
( Complejo III) 1. Hemo b
Ubiquinona- Citocromo c 3. Hemo c1 11
oxidorreductasa. 4. Centros Fe-S

( Complejo IV) 1. Hemo a

Citocromo oxidasa 2. Hemo a3 8
3. CuA , CuB
Los complejos de proteínas guían a los e- a lo largo de
la Cadena respiratoria , de manera que estos se
mueven secuencialmente desde uno a otro complejo
enzimático.
 Ordenamiento
de la
Cadena Respiratoria
En las mitocondrias que respiran, cada molécula de
NADH libera 2 electrones a la Cadena Respiratoria
; estos electrones en última instancia, reducen a 1
átomo de oxígeno (media molécula de O2), formando
una molécula de agua (H2O).
 NADH Organización básica de la
Cadena respiratoria

NADH
DESHIDROGENASA
I
SUCCINATO
DESHIDROGENASA II
Q

CITOCROMO C III La CTE esta formada por 4 complejos

OXIDORREDUCTASA
enzimáticos ( los cuales funcionan
como transportadores de electrones y,
Cit c 3 de ellos funcionan como
bombas de protones.
Estos complejos están conectados
CITOCROMO
OXIDASA
IV mediante dos transportadores móviles
de electrones, estos son la Q y el
Citocromo c.

O2
 Organización básica y secuencia que siguen los
electrones en la Cadena Respiratoria

FADH2 (fp)

e-

e- e- e- e- e- e-
FMN (fp) Q cit b cit c1 cit c cit aa3 O2
CI CIV
CIII
e-

e- significa electrones
NADH fp = flavoproteína

 Los componentes de la CR se ordenan según el valor de sus potenciales de

reducción , encontrándose el menos positivo en el extremo izquierdo ( - 0,32
V), y el mas positivo a la derecha (+0,82 V) , por tanto los electrones fluyen
sucesivamente a lo largo de la cadena hasta que finalmente son transferidos al
oxigeno (O2).
Reacciones de oxidorreducción
de los complejos enzimáticos
de la Cadena Respiratoria
 Reacción catalizada por el
Complejo I, NADH deshidrogenasa:
Cataliza simultáneamente dos procesos acoplados:
1. La transferencia exergónica de 2e- y 1H+ (un ion
hidruro) del NADH y 1 H+ (un protón) de la matriz,
hasta la Ubiquinona (Q).
los 2 electrones fluyen desde el NADH al FMN y luego a
FeS que puede aceptar los electrones , pero uno cada vez,
y de aquí hasta la Q (Ubiquinona).

2. Ocurre la transferencia endergónica de 4 protones de la

matriz hacia el EIM. Por tanto , el complejo I es una bomba
de protones impulsada por la energía de la transferencia de
los 2 electrones.
 MME
Espacio intermembrana + 4H+

I
MMI FMN
FeS QH2 MMI
2e¯
Q
2e¯

2H+ Matriz
NADH

H+ + NAD+ Reacción redox neta catalizada por el

Complejo I (NADH deshidrogenasa):

NADH + 5H+ + Q NAD+ + QH2 + 4H+

(reducido) matriz (oxidado) (oxidado) (reducido) EIM
 Reacción catalizada por
el Complejo II, o Succinato deshidrogenasa:

1. La Succinato deshidrogenasa, que comprende el Complejo II de la

CR, es la enzima que oxida una molécula de Succinato a Fumarato en el
Ciclo del Ácido Cítrico, y se encuentra unida a la membrana interna
mitocondrial.

2. Los 2 electrones liberados en la conversión de Succinato a Fumarato

se transfieren primero al FAD, luego a FeS, y finalmente a la CoQ,
formando CoQH2 .

3. Aunque el G’°, para esta reacción es negativa, la energía liberada NO

es suficiente para el bombeo de protones. Por lo tanto NO hay
translocación de los protones a través de la membrana por el Complejo II.
 MME
Espacio
intermembrana + 4H+

FMN
FeS I QH2
MMI

2e¯

2e¯ Q
FeS
2e¯
II Matriz
FAD
2H+
NADH
Succinato
H+ + NAD+
Reacción redox neta catalizada por
el Complejo II, Succinato deshidrogenasa:

Succinato + Q Fumarato + QH2

(reducido) (oxidado) (oxidado) (reducido)
Además de la Succinato deshidrogenasa, otras deshidrogenasas
mitocondriales dependiente de FAD, pasan electrones y protones a la
Ubiquinona , pero No a través del Complejo II.
Glicerol 3-P  Acil-CoA deshidrogenasa FADH2
(1ª.enzima de la -oxidación
de los Ácidos grasos)
 Glicerol 3-fosfato -matriz- EFT- FAD
deshidrogenasa
Cext-MMI  EFT: Ubiquinona Oxidorreductasa
(esta enzima es (FADH2) Cint-MMI
parte de una FADH2
lanzadera
para reoxidar el
NADH citosólico)
Q QH2
EFT = Flavoproteína FADH2
Transferidora de Electrones
Cext = cara externa de la MMI Succinato deshidrogenasa
Cint = cara externa de la MMI (Complejo II)
(ciclo del ácido cítrico)
MME
Espacio
intermembrana
Glicerol-3P
Deshidrogenasa Cara
externa
FAD
FMN
FeS I Q
2e¯
EFT-Q
2e¯ II Oxidorreductasa Cara
2e¯ interna
MMI
FAD
FAD

Matriz
La Succinato Deshidrogenasa, la Glicerol-3P Deshidrogenasa, y la
EFT-Q Oxidorreductasa, todas estas transfieren , electrones a la
Coenzima Q, pero no abarcan la membrana y no tienen un
mecanismo de bombeo de protones.
 Reacción catalizada por
el Complejo III, Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa:
1. QH2 dona 2 e- al Complejo III. Dentro de este complejo los
electrones se transfieren a una proteína FeS , de aquí a 2
Citocromos tipo b, y luego son transferidos al Citocromo
c1.

2. Por último, los 2 electrones se transfieren desde

el
Citocromo c1 a dos moléculas de la forma oxidada del
Citocromo c, formando Citocromo c reducido .

3. La vía de los electrones por este tramo de la CR es complejo. Pero el

efecto neto es simple: 1 QH2 se oxida a Q, y a la vez 2 Cit c se reducen.

El G’° para esta reacción es lo suficientemente negativo para que 4

protones sean translocados desde la matriz mitocondrial a través de la
membrana interna para cada par de electrones transferidos.
MME
Espacio
intermembrana
4H+ 4H+

2e¯
FMN FeS I QH2
2e¯
FeS Cit b
2e¯
MMI
2e¯ Q Cit c1
2e¯
FeS
III
2e¯

2H+ FAD
NADH II
Matriz
H+ + NAD+ Succinato
Reacción redox neta catalizada por el
Complejo III, Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa:

QH2 + 2 Cit c1 (Fe ) + 2H+ +3

Q + 2 Cit c1 (Fe ) + 4H+ +2

(reducido) (oxidado) (matriz) (oxidado) (reducido) (EIM)

 Reacción catalizada por
el Complejo IV, Citocromo oxidasa:
1. Este Complejo IV transporta electrones desde el Citocromo c al
Oxígeno molecular, reduciéndolo a H2O.

2. En este Complejo se trasporta 1 único electrón a la vez.

3. La transferencia de electrones a través del complejo IV , es como

sigue:
 primero los electrones pasan del Cit c a un par de iones de cobre
(CuA), a continuación, al Citocromo a, luego a un centro Citocromo
a3-CuB, y finalmente a O2, el último aceptor de electrones de la CR.

 Por cada 2 electrones que pasan por el complejo, este utiliza 2 H+

como sustrato y produce1 molécula de agua (H2O).

4. También utiliza la energía de esta reacción redox para bombear 1H+ por
cada electrón que pasa.
5. La transferencia de cada electrón debe ocurrir sin la liberación de
especies reactivas dañinas para la célula.
MME

Espacio 2H+
intermembrana Cit c 2e¯
2H+
2e¯

2e¯ 2e¯ Citc c1

CuA
IV
QH2 FeS Citc b
a
MMI
III a3 CuB
Matriz 2e¯

½ O2+ 2H+
Reacción redox neta catalizada por
H2O
el Complejo IV, Citocromo oxidasa:

2 Cit c (Fe+3) + 4H+ + ½ O2 2 Cit c (Fe ) + 2H+ + H2O

+2

(reducido) (matriz) (oxidado) (EIM)

 La reacción final en la cadena respiratoria, la reducción
de O2 a H2O tiene un potencial de reducción estándar
(E’o) de + 0,816 V, el más positivo en toda la cadena
respiratoria, y por lo tanto esta reacción , también tiende
a ocurrir hacia la derecha.
E’o

½ O2 + 2H+ + 2e- H 2O + 0,816 V

“ 2 protones son tomados de la matriz y 2 electrones que son cedidos por el Cit a3,
se unen a un átomo de oxigeno para reducirlo hasta agua”.

Como se discutió anteriormente, el oxígeno molecular es un aceptor

terminal de electrones ideal, debido a su alta afinidad por los
electrones, proporciona una gran fuerza impulsora termodinámica.
 ¿Se libera energía en la Cadena respiratoria?

¿Cuánta energía se libera?

¿Cómo se conserva de forma eficiente esta energía?

¿En que se utiliza esta energía liberada?

 E’o (V) Cadena respiratoria: flujo de los electrones y potencial de reducción estándar de componentes móviles
(en rojo), y cantidad de energía liberada en cada complejo.
- 0,4
NADH NAD+ + H+ (- 0,320 V)
2e-
Complejo I
- 0,2 E’o = 0,360 V
G´o = - 69,5 kJ/mol
(+0,031V)
Succinato FADH2 Complejo Q (+0,045 V)
0
II

fumarato Complejo III

E’o = 0,190 V
G´o = - 36,7 kJ/mol
+ 0,4
Citocromo c (+ 0,235 V)

+ 0,6 Complejo IV
E’o = 0,580 V
G´o = - 112 kJ/mol
2e-
+ 0,8 ½ O2 + 2H+ H2O
MAOS-
Fuente de los datos
Texto bioquímica de Voet
(+ 0,816 V)
 El flujo de electrones desde el NADH al O2 es un proceso
exergónico que libera la cantidad de 220 kJ/mol (52 Kcal/mol)

NAD+/ NADH……. E’o = - 0,320 V

O2 / H2O………….. E’o = + 0,816 V

REACCIÓN DE OXIDORREDUCCIÓN NETA de la Cadena Respiratoria:

NADH + H+ + ½ O2 NAD+ + H2O

G’o = - n F E’o
G’o = - 2 (96,5 kJ / V. mol) (1,14 V)
G’o = - 220 kJ/mol (de NADH)

“ Esta energía producto de la transferencia de electrones se

conserva eficientemente en un Gradiente de Protones”.
 El flujo de electrones desde el FADH2 (de la oxidación del
succinato a fumarato) al O2 es un proceso exergónico que
libera la cantidad de 150 kJ/mol

Fumarato / Succinato…. = + 0,031 V

O2 / H2O………….. = + 0,816 V

G’o = - n F E’o
G’o = - 2 (96,5 kJ/V. mol) ( 0,847 V)
G’o = - 150 kJ/mol

Esta energía producto de la transferencia de electrones se conserva

eficientemente en un Gradiente de protones.
 Resumen:

Cuando los electrones pasan a través de 3 Complejos

proteicos, que contienen afinidad cada vez mayor por
lo electrones (potenciales de reducción estándar en aumento) en vez
de pasar en forma directa al O2, esto permite que el
gran cambio de energía libre total se divida en 3
paquetes mas pequeños, cada uno de los cuales se
ACOPLA con la síntesis de ATP en un proceso llamado
Fosforilación oxidativa.
 E’o (V) Cadena respiratoria: flujo de los electrones y potencial de reducción estándar de componentes móviles
(en rojo), y cantidad de energía liberada en cada complejo.
- 0,4
NADH NAD+ + H+ (- 0,320 V)

Complejo I ADP+Pi
- 0,2 E’o = 0,360 V
G´o = - 69,5 kJ/mol ATP
(+0,031V)
Succinato FADH2 Complejo Q (+0,045 V)
0
II

fumarato Complejo III ADP+Pi

E’o = 0,190 V
G´o = - 36,7 kJ/mol ATP
+ 0,4
Citocromo c (+ 0,235 V)

+ 0,6 Complejo IV ADP+Pi

E’o = 0,580 V
G´o = - 112 kJ/mol ATP
2e-
+ 0,8 ½ O2 + 2H+ H2O
MAOS-
(+ 0,816 V)
 Inhibidores de la Cadena respiratoria
Inhiben la transferencia de electrones y, como consecuencia de
ello, también interrumpen la fosforilación oxidativa.
Estas sustancias pueden producir rápidamente la muerte

I) Inhibidores del complejo I

 Rotenona: veneno de peces , e insecticida
extraído de plantas
 Amital (barbitúrico)
 Amobarbital (barbitúrico)
 Piericidina A (antibiotico)
II) Inhibidores del complejo III
 Antimicina A: un antibiótico de hongos,
bloquea la Cadena respiratoria en el paso entre
el citocromo b y el citocromo c1
 Inhibidores de la Cadena respiratoria

III) Inhibidores del complejo IV

se unen al Fe+3 de la Citocromo oxidasa , por lo que evita
que el oxigeno pueda unirse a la Citocromo oxidasa .

 Cianuro (CN-)

 N-3 : Azida

 Monóxido de carbono (CO)

 H2S
INHIBIDORES DEL FLUJO DE ELECTRONES HASTA EL OXÍGENO

Inhibidores: Inhibidores:
Rotenona Inhibidor: Cianuro
Amital Antimicina A Azida
Amobarbital Monóxido de carbono

CI Q CIII c CIV
CII ½ O2 + 2H+
MME H2O
ADP + Pi
ATP

Espacio intermembrana

MMI citosol
Formación de especies reactivas de
oxígeno (radicales libres) durante la
reacción del complejo enzimático
Citocromo oxidasa
 MME

Espacio intermembrana
4 H+ 4 H+ 2 H+
e¯ Cit c

e¯
e¯ I III IV
MMI Q
2e¯
NAD+ Matriz
NADH

Generación de especies ½ O2 + 2H+ H2O

reactivas de oxígeno por la
cadena de transporte electrónico
mitocondrial.
Los derivados tóxicos del oxígeno molecular, tales como superóxido radicales son
rescatados por enzimas protectoras

Aunque la citocromo c oxidasa y otras proteínas que reducen el O2 son un éxito notable en
no liberar intermedios, se forman inevitablemente pequeñas cantidades de anión
superóxido y peróxido de hidrógeno.
Superóxido, peróxido de hidrógeno, y las especies que se pueden generar a partir de ellos,
tales como OH · se denominan colectivamente como especies de oxígeno reactivas o ROS.

¿Cuáles son las estrategias de defensa celular contra el daño oxidativo por ROS?
El principal de ellos es la enzima superóxido dismutasa. Esta enzima elimina los radicales
superóxido por catalizar la conversión de dos de estos radicales en peróxido de hidrógeno
y oxígeno molecular.
El principal productor de radicales de oxígeno en los organismos aerobios es la mitocondria
utiliza aproximadamente el 98% del O2 que ingresa en la célula reduciéndolo a agua a nivel
del citocromo a3 de la cadena de transporte de electrones
una pequeña parte del O2 incorporado por la mitocondria, sufre una reducción monovalente y
genera especies reactivas de oxígeno, tales como el radical superóxido (O2 ), el peróxido de
hidrógeno (H2O2), y radical hidroxilo (•OH)

Por tanto, al ser las mitocondrias la fuente más importante de especies reactivas de
oxígeno, es obvio que el DNA mitocondrial se encuentra más expuesto que el DNA
nuclear a sufrir lesiones oxidativas severas que pueden conducir a mutaciones y
supresiones en su propia cadena
El oxígeno molecular (O2) es un birradical que tras la adición secuencial
de 4 electrones y 4 protones en la cadena de transporte electrónico
mitocondrial, genera agua (H2O).
En este proceso, en el que se produce gran cantidad de energía (ATP),
pueden también generarse, como subproductos, moléculas parcialmente
reducidas con 1, 2 y 3 electrones. Estas son, el radical superóxido, el
peróxido de hidrógeno y el radical hidroxilo, respectivamente.
Estos tres , se denominan especies reactivas de oxígeno y causan
lesiones oxidativas a las macromoléculas celulares (lípidos, proteínas y
DNA).
DNA mitocondrial codifica para:
Complejo Enzimático No. total No. de Subunidades
de Subunidades Codificadas por el ADN
mitocondrial
( Complejo I) 43 7
NADH deshidrogenasa
o NADH-CoQ oxidorreductasa
( Complejo II ) 4 0
Succinato deshidrogenasa
o Succinato-CoQ
oxidorreductasa
( Complejo III) 11 1
Ubiquinona-citocromo c
oxidorreductasa.
Citocromo c 13 3
( Complejo IV)
Citocromo oxidasa 8 2
Nota: las laminas desde el 54 al 59 no serán evaluados en el examen parcial de
esta unidad 3
 Fosforilación
Oxidativa
Es el proceso por el cual el NADH y FADH2
producidos por la oxidación de nutrientes SE OXIDAN
y simultáneamente ocurre la SÍNTESIS de ATP .
 Ecuación básica de la Fosforilación oxidativa

ATP sintasa
ADP + Pi ATP + H2O
G’o = + 30,5 kJ/mol

La energía libre requerida para sintetizar 1mol de ATP a

partir de ADP + Pi es de 30,5kJ (*), en condiciones
bioquímicas estándares.
Si la energía libre estándar producto de la oxidación del
NADH al O2, esta acoplada a la síntesis de ATP, es por lo
tanto suficiente para conducir la formación de varios moles
de ATP.

(*) en condiciones intracelulares reales es de 50kJ/mol)

 Mecanismo que explica el
Acoplamiento energético del
Transporte de electrones a la Síntesis de ATP

Teoría quimiosmótica del Dr. Peter Mitchell (1961)

Premio Nobel de química en 1978

quimiosmótico: este término describe las reacciones enzimáticas en

las que interviene simultáneamente una reacción química y un
proceso de transporte.
 Mecanismo que explica el Acoplamiento energético del
transporte de electrones a la Síntesis de ATP:

1. La energía libre de la transferencia de electrones, se

utiliza para un bombeo de Protones ( H+ ) desde la matriz
de la mitocondria hacia el EIM.
2. Este movimiento de protones genera:
 un Gradiente de concentración de protones (es decir, una
diferencia de pH) a través de la MMI.

 Un Gradiente de carga electrica (es decir, una diferencia de

cargas) a través de la MMI. Siendo positivo (+) el lado
externo de la MMI y negativo (-) el lado interno.
3. Juntos estos dos gradientes (de concentración de H+ y de cargas)
ALMACENAN la energía libre resultante de la transferencia
de electrones, y es llamada fuerza protón motriz.
4. El regreso de los protones hacia la matriz a través
de Complejo de la ATP sintasa , esta ACOPLADO a la
Síntesis de ATP. Proporcionando este flujo, la
energía necesaria para unir un Pi al ADP .

5. La membrana interna mitocondrial es impermeable

a los Iones H+ . De otro modo se disiparía el gradiente
de concentración de protones.

¿ Como se acopla la energía libre de la transferencia

de protones a la síntesis de ATP?
MME

Espacio intermembrana
4H+ 4H+ 2H+
Cit c
+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + +
e¯
MMI
e¯ I Q III IV
2e¯

NAD+
NADH
MATRIZ ½ O2 + 2H+ H2O

Durante el transporte de electrones:

los Complejos enzimáticos I , III y IV, bombean Protones ( H+ )
desde la matriz de la mitocondria, hacia el espacio intermembrana
(flechas verdes).
 El bombeo de H+ es un proceso endergónico.
 La moléculas NADH y FADH2 transfieren electrones a la CR, y se
libera energía durante el proceso , parte de ésta es utilizada para
bombear protones desde la matriz al EIM.
Este bombeo de H+ tiene dos consecuencias:
1. Se genera un Gradiente de concentración de protones (ΔpH) a
través de la MMI, con el pH más alto (mas alcalino) en la matriz, que
en el EIM.
2. Se genera un Gradiente de carga (Δ) (= diferencia de potencial) a
través de la MMI, con el interior negativo y el exterior positivo (como
resultado de la salida neta de iones positivos).
 En conjunto la pH y la   constituyen un
gradiente electroquímico , el cual almacena la energía
del
. transporte de electrones.
3. A esta energía almacenada en este gradiente electroquímico se le
denomina FUERZA PROTON MOTRIZ.
Letra del alfabeto griego  (Psi)
 La perdida de protones de la Matriz por el bombeo al
Espacio Intermembrana (EIM) , vuelve a la
Matriz mas negativa y al EIM mas positivo.

Alta [ H+ ]  El EIM es Mas ácido

H+
H+ H+
H+ H+ H+ H+ Espacio
H+ H+ H+ intermembrana

+++++++++++++++++++++++++++
MMI
OH- OH- OH- - -
OH- OH OH OH- Matriz
OH-
H+ H+
H+ H+ H+

potencial de membrana=
 La Matriz Mas alcalina
diferencia de carga eléctrica a
( el pH es 0,75 unidades mayor que el EIM)
través de una membrana
Para que se pueda mantener este gradiente
electroquímico a través de la membrana interna , se
deben dar las siguientes condiciones.

1. Que la membrana mitocondrial interna se mantenga

intacta y no se haya hecho permeable con agentes
físicos o químicos.

2. Que la transferencia de electrones sea continua, es

decir que sustratos como el NADH, el FADH2 y el
oxigeno se hallen disponibles.
 ATP sintasa
Es una ATPasa de tipo F . El tipo “F” proviene de la identificación de
esta ATPasa como un Factor de acoplamiento de energía.
Es un complejo enzimático de la membrana interna mitocondrial
que cataliza la síntesis de ATP a partir de ADP y Pi,
acompañado por el flujo de protones desde el EIM a la matriz.

Esta compuesta por 2 componentes funcionales Fo y F1.

Fo : Es una proteína integral ubicada en la MMI, que forma un

poro (canal) transmembrana para protones. La letra del
subíndice “o” indica su inhibición por la OLIGOMICINA .

F1 : Es una proteína periférica de membrana, que mira hacia el

interior de la matriz, contiene el sitio catalítico para la síntesis
de ATP . El subíndice 1 indica que fue el primer factor identificado
como necesario para la fosforilación oxidativa.
 Estructura de
la ATP sintasa
también llamada
Fo - F1 ATPasa,
o Complejo V
MATRIZ
MITOCONDRIAL

MEMBRANA INTERNA

ESPACIO INTERMEMBRANA
DIAGRAMA QUE REPRESENTA LA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES
Y LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

MME

ESPACIO
INTERMEMBRANA

MMI

MATRIZ
ATP
SINTASA

Fuente: texto de Lehninger 4ta Ed.

 Sistemas de transporte a través de la
Membrana mitocondrial interna

1. Adenina- Nucleótido Translocasa.

Es una proteína transportadora. El ADP es cotransportado con el ATP
en direcciones opuestas por esta proteína . (El ADP hacia dentro y el
ATP hacia fuera de la matriz).
Este translocador es inhibido por un glucósido tóxico llamado
Atractilósido (de la planta Atractylis gummifera) y el Ácido bongkrékico
(antibiótico producido por un hongo que descompone la leche de coco).

2. Transportador de Fosfato
 Translocasas de la membrana mitocondrial interna(MMI)
que transportan ADP , ATP , y Fosfato inorgánico
Espacio
intermembrana
Matriz

ATP ATP
ANT
ADP ADP

Gradiente de ATP
concentración
de protones
H+ sintasa H+
H2PO-4 H2PO-4
H+ FT H+

ANT = Adenina-Nucleótido Translocasa FT = Fosfato Translocasa

H2PO-4 = Fosfato inorgánico = Pi MAOS
 Importancia del transporte mitocondrial

En los tejidos aeróbicos casi todo el ATP se sintetiza

dentro de la mitocondria. Sin embargo este se utiliza
fuera de ella.
 Relación P/O

Es la proporción de ATP sintetizado por átomo de

Oxigeno reducido a H2O .

Esta relaciones P/O están sujetas a revisión

 ¿Cuántos protones han de entrar a través del
Complejo Fo F1 (ATP sintasa) para impulsar la
síntesis de ATP?
 El valor consenso de los protones que se bombean
hacia afuera por cada 2 e- es: de 10 para el NADH y
de 6 para el Succinato.

 El número de protones necesarios para impulsar la

síntesis de una molécula de ATP es de 4 (de estos 1
se gasta en transportar Pi y ADP a través de la MMI).

 La razón P/O cuando un NADH es el dador de

electrones, es de 2,5 (10/4) y 1,5 (6/4) cuando lo es el
Succinato.

 Los valores 2,5 y 1,5, y los valores 3 y 2 para la razón

P/O, se utilizan en los textos de bioquímica.
Fuente: texto de Lehninger 4ta Ed.
La oxidación de un NADH se acopla a la síntesis de ATP, y
genera la síntesis aprox. de 3 ATP.
En consecuencia la eficiencia termodinámica de la
fosforilación oxidativa es 3 x 30,5 kJ/mol x 100/220 kJ/mol =
42% bajo condiciones bioquímicas estándares.

Sin embargo bajo condiciones fisiológicas en las

mitocondrias activa (donde las concentraciones de los
reactivos y los productos así como el pH se alejan de las
condiciones estándares), se cree que esta eficiencia
termodinámica es de 70%. En comparación la eficiencia de
un motor de automóvil típico es de < 30 %.

Texto de Bioquímica
Autor. Voet-Voet 3ra. Edición. cap 22.pag.835
Si solo se utiliza aproximadamente el 42 % de la energía
de la oxidación del NADH o FADH2 para La síntesis de
ATP, ¿Qué sucede con el resto de la energía?
Parte de esta energía se pierde en forma de calor.
Por consiguiente la cadena respiratoria es nuestra principal
fuente de calor
 Nota:
Si la eficiencia en el proceso de síntesis de ATP
acoplada con la oxidación de NADH , fuera de 100%
, seria en teoría posible sintetizar 7,51 moles de ATP
por cada mol de NADH oxidado a NAD+ , bajo
condiciones estándares.
 LA ENERGÍA SE GASTA EN :

1) Bombeo de protones desde la matriz a EIM

(por c/ 2 electrones transferidos al O2 se bombean 4 protones por el CI;
4 por el CII, y 2 por el CIV).

2) La Síntesis de ATP.

3) El transporte de Piruvato, ADP y Pi desde el EIM

hacia la matriz

4) El transporte de ATP desde la matriz hacia el EIM.

 Regulación de la fosforilación oxidativa
El control de la velocidad de la Fosforilación oxidativa esta ligada a la
demanda de energía celular.
El consumo de O2 (tasa respiratoria) esta controlado por la
concentración de ADP, la cual es una medida del estado energético
de la célula.

La velocidad de la respiración celular aumenta si la concentración

de ADP es alto, como sucede cuando los requerimientos de energía
por la celular son altos, hay un aumento de la velocidad en la
degradación ATP a ADP +Pi, por tanto hay mayor disponibilidad de
ADP para la Fosforilación oxidativa y aumenta la velocidad de la
Cadena respiratoria, y la fosforilación de ADP, lo que da lugar a la
regeneración de ATP.
El ATP de forma a la misma velocidad en que es requerido por la
actividades celulares, ,
 UN AUMENTO EN LA UTILIZACIÓN DE ATP POR LA CÉLULA

PRODUCE UN AUMENTO DE LA CONCENTRACIÓN DE ADP

AUMENTA LA FOSFORILACIÓN DEL ADP POR LA ATP SINTASA

AUMENTA EL FLUJO DE PROTONES DE REGRESO A LA MATRIZ

AUMENTA EL FLUJO DE ELECTRONES, Y EL BOMBEO DE PROTONES

HACIA EL EIM

Y POR TANTO AUMENTA EL CONSUMO DE OXIGENO

 INHIBIDORES DE LA
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

La oligomicina un antibiótico producido por un

hongo se une a la proteína F0 de la ATP sintasa,
impidiendo el normal movimiento de protones hacia
la matriz.
Bloque completamente la oxidación y la
fosforilación en las mitocondrias Intactas.
 INHIBIDORES DEL TRANSPORTE DE LOS
NUCLEÓTIDOS DE ADENINA EN LA
MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA

1. Atractilósido : glucósido vegetal

2. Ácido bongkrekico: antibiótico producido

por un hongo.
Desacoplamiento entre la Cadena respiratoria
y la Fosforilación Oxidativa
por químicos desacoplantes
( desacoplamiento de tipo no fisiológico)

Los desacopladores son compuestos que aumentan la

permeabilidad de la membrana a los protones.
DESACOPLAMIENTO DE LA FOSFORILACION OXIDATIVA

Mecanismo de acción:
Los desacopladores tienen como efecto desconectar la
fosforilación oxidativa de la transferencia de electrones.
Por tanto puede funcionar la cadena respiratoria sin tener lugar la
síntesis de ATP , en esta situación la energía que normalmente se hubiera
conservado en la formación del ATP, se pierde ahora en forma de calor.

ejemplo de dos desacopladores químicos:

 2,4 - dinitrofenol (DNP)
 Carbonil-cianuro-p-trifluorometoxifenilhidrazona
(FCCP)
 Dicumarol
Ambos son ionóforos, ácidos liposolubles débiles que se unen a los H+ en el
EIM, difunden a través de la membrana, y los liberan en la matriz.
 VELOCIDAD DE LA
CADENA RESPIRATORIA
DESACOPLANTE (OXIDACIÓN)

FOFORILACIÓN DE ADP
 Efectos fisiológicos de los desacopladores :

1. Aumenta la Tasa metabólica,

2. Aumenta el Consumo de oxigeno

3. Aumenta la Producción de calor (fiebre).

4. Causa Perdida de Peso

“Estos dan por resultado una respiración no controlada, La concentración

de ADP ya no limita la velocidad de la respiración”
 Desacoplamiento fisiológico
entre la Cadena respiratoria y la
Fosforilación Oxidativa

Termogénesis adaptativa
Condiciones en las que ocurre:
 En respuesta al frio
 En periodos de Hibernación
 Ingestión de alimentos
Lugar : exclusivamente en tejido adiposo marrón
Generación de calor (termogénesis) en el Tejido adiposo
marrón. Las Mitocondrias desacopladas del tejido adiposo marrón
producen calor, bajo control hormonal,
Para mantener la temperatura corporal
calor
en los : calor

1. Animales Recién nacidos de algunas especies, que nacen sin

pelaje (incluyendo al humano)
2. Animales hibernantes ( distribución de la grasa marrón: en su
cuello y parte superior de la espalda)

3. Animales de hábitat frio

4. Seres humanos adultos, en poca cantidad (distribución de la
grasa marrón: parte dorsal del tórax, parte inferior de los omóplatos, alrededor de
las adrenales, riñones, corazón, región perianal e inguinal).
“ La función fisiológica del TEJIDO ADIPOSO MARRÓN (grasa parda),
es generar calor ” .

es un tejido con una gran cantidad de triacilglicéridos, es rico en

mitocondrias cuyos citocromos le confieren el color marrón. Contiene
proteínas de desacoplamiento (UCP).
M

LV= gota de grasa

M= mitocondria
N= núcleo
M
Adipocito
Adipocito
de grasa blanca
de grasa parda

La TERMOGENINA también llamada Proteína desacopladora 1 (UCP-1)

esta ubicada en la MMI del adipocito marrón , forma una canal por donde
los protones son conducidos de regreso a la matriz , sin pasar a través de
la ATP sintasa, desacoplando la CTE de la Fosforilación Oxidativa, esto
permite la oxidación continua de combustible, sin síntesis de ATP , y
disipando la energía en forma de CALOR.

UCP = Uncoupling protein

 Histología del ADIPOCITO MARRÓN y presencia de la
Termogenina (UCP1) en la mitocondria

M M

M B)

A)
UCP1
A) El citosol del adipocito marrón es caracterizado por numerosas mitocondrias y
gotitas de grasa. B) Ampliación de una mitocondria de un adipocito marrón, se
muestran Crestas en paralelo y la UCP1 (puntos negros).
http://journal.frontiersin.org/Journal
 Mecanismo de termogénesis
Mitocondria desacoplada en el tejido adiposo marrón
1
Noradrenalina FRIO Adipocito
TAG
marrón
2
+ Ácidos Grasos Libres
(AGL) 3
CALOR

H+ UCP1
H+
H+
Desacoplamiento
+ (canal de protones)
Acoplamiento ADP+Pi 5
(Fosforilación Oxidativa)
Disminuye ATP FADH2 AGL
NADH -Oxidación
Esta vía H+ 4
matriz
CTE
H+
H+
H+ MMI
H+
 FIN DE LA UNIDAD 3

CO2 (g)
O2 (g)

H2 O
Respiración celular
aeróbica

Combustibles Energía
(azúcares, grasas, proteínas) celular