PRUEBA DE LA

ANTIGLOBULINA DE
COOMBS

Dra. Ana Esther Aguilar Cárdenas Laboratorio de Investigación en Inmunología

 Obtener paquete celular Lavar paquete celular Paquete de eritrocitos
de la muestra por con SSI lavados, preparar
centrifugación. del paciente, del suspensión al 2% en
testigo(+) y del medio salino.
testigo(-)

Coombs directa Coombs testigo positivo Coombs testigo negativo

Coombs autotestigo

2 gotas de la suspensión al 2 gotas de la suspensión

Eritrocitos del paciente
en su propio plasma
2 gotas suspensión al al 2% de eritrocitos no
2% eritrocitos del 2% eritrocitos sensibilizados
con IgG anti D y 2 gotas de sensibilizados con
paciente y 2 gotas de anticuerpo y 2 gotas de
suero de Coombs suero de Coombs
suero Coombs

Agitar tubos, centrifugar

a 1000 rpm 1 minuto.
Realizar lectura
resuspendiendo Los resultados de los tubos
el botón celular. testigos validan la prueba.

Reacción de aglutinación demuestra

la presencia de anticuerpos unidos a
las determinantes antigénicas de los
eritrocitos

Dra. Ana Esther Aguilar Cárdenas Laboratorio de Investigación en Inmunología

 Obtener plasma o
suero de la muestra
por centrifugación

Coombs indirecta Coombs testigo positivo

Coombs testigo negativo
2 gotas de suero del paciente y 2 gotas de la
2 gotas de suspensión al 5% suspensión al 2% de 2 gotas de la suspensión al
de GRO y con el fenotipo del eritrocitos 2% de eritrocitos sin
grupo del sistema sanguíneo sensibilizados con sensibilizar con anticuerpo
que reconoce el anticuerpo IgG
que se investiga
+
+ 2 gotas de suero de Coombs
Agitar tubo, centrifugar
a 1000 rpm. 1 minuto Realizar lectura 2 gotas de suero de Coombs
resuspendiendo el
botón celular.

Reacción de aglutinación Lavar con SSI a 2500

demuestra la presencia rpm, 5 minutos.
Después del último Agitar c/ tubo
de anticuerpos que
lavado retirar suavemente
reconocen las
sobrenadante y centrifugar a 1000 Realizar lectura
determinantes antigénicas
resuspender en SSI rpm. 1 minuto resuspendiendo el
de los eritrocitos
remanente botón celular

Si no se observa
+ Reacción de aglutinación
2 gotas de suero de Coombs demuestra la existencia en
incubar 37° C
el paciente de anticuerpos
durante 30
que reconocen los
minutos
antígenos presentes en los
eritrocitos
Dra. Ana Esther Aguilar Cárdenas Laboratorio de Investigación en Inmunología