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RECUPERACION Y

PURIFICACION DE PRODUCTOS
BIOTECNOLOGICOS
INDUSTRIALES

Microbiología industrial
I.- PRODUCTOS Y SERVICIOS DE LA
MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL
•Los bioprocesos generan muchos productos útiles que
pueden tener uso comercial.
•Estos difieren mucho unos de otros, pero también tienen en
común que son productos biológicos, generalmente
degradables

•Se pueden agrupar en cuatro bloques:

•1. Producción de células.

•Como levaduras, algas, hongos, con diferentes finalidades:


• -La levadura para la producción de pan.
• -Algas para la producción de biodiesel. Etc.
2. Enzimas y otras proteínas de elevado
alto valor.
•Enzimas de interés industrial (amilasas, proteasas, etc.).
•Las células solo producen las enzimas que necesitan.
•Industrialmente se busca lograr una superproducción de
las enzimas.
•Un método para incrementar la síntesis de una enzima
es el de inducción.
•Los genes que dirigen la síntesis de una enzima inducible,
están normalmente inactivos en ausencia del sustrato para
dicha enzima.
•Sólo cuando se agrega el sustrato requerido o un análogo,
el gen se activa y dicha enzima es sintetizada.
•Asi se logra la producción comercial de proteínas de uso
especial: insulina, interferón.
3. Productos químico industriales.
•Colorantes y gomas: Phaffia rhodozyma, y Haemophilus
pluvialis, producen el pigmento astaxantina.
•Acidos; cítrico e itacónico (aspergillus niger); ácido láctico
(lactobacillus); ácido propiónico (propionibacterias), etc.
•Acetona y butanol a partir de la bacteria clostridium
acetobutylicum
•Polisacáridos (xantanos (xantomonas), Dextranos
(leuconostoc, acetobacter, klebsiella)
•El dextrán es una cadena de moléculas de glucosa que se
utiliza como complemento del plasma en enfermos graves
o bien como mallas moleculares para separar compuestos.
•El xantano, es adecuada para consumo humano y se usa
como estabilizador en alimentos, en la impresión de
textiles, y en la elaboración de cosméticos.
•Bioplásticos: acido polilactico a partir del lactato.
•Glicerol (Saccharomyces cerevisiae)
•Etanol (Saccharomyces cerevisiae)
Industria alimentaria.
•El yogurt se produce por bacterias Lactobacillus bulgaricus
y Streptococcus thermophilus.
•El vinagre por la bacteria Gluconobacter suboxidans;
•Saborizantes por la bacteria Corinebacterium glutamicum.
•La salsa de soya (sillau), se obtiene utilizando la levadura
Saccharomyces rouxii
•La producción de cerveza con levadura Saccharomyces
carlsbergensis.
Industria farmacéutica y de agroquimicos.
•Farmaceuticos:
•Streptomyces, produce la anfotericina B, la kanamicina, la
neomicina, la estreptomicina, las tetraciclinas, entre otras
•Bacillus brevis produce la gramicidina S.

•La insulina, la hormona de crecimiento y el interferón,


pueden ser obtenidos por técnicas de ingeniería genética
utilizando la bacteria Escherichia coli.
•Algunas vitaminas como la B12 es producida por
Pseudomonas denitrificans o el Propionibacterium.

•Agroquímicos.
•La producción de insecticidas biológicos, por: Bacillus
thuringiensis y el Bacillus popilliae.
4. Depuración de residuos.
•Aguas residuales. Se tratan biológicamente, para
eliminar la materia orgánica disuelta, por metabolismo
oxidativo.
•- Residuos sólidos. Procesos de digestión anaerobia, que
reduce el volumen de los residuos, convirtiéndolos a biogás:
CH4 y CO2.
•- Xenobióticos. (Producidos solo por síntesis química),
como los fenoles que pueden degradarse por
cometabolismo.

•Futuro: microorganismos modificados genéticamente para


degradar compuestos recalcitrantes
5. Lixiviación.

•Recuperación de metales a partir de minerales y restos de


minas, con contenidos de metales demasiado bajos, por
acción de Thiobacillus ferrooxidans.
II.- FASES DE LOS PROCESOS
BIOTECNOLOGICOS
•Los bioprocesos comprenden tres fases:
–Aguas arriba. Llamados también procesos previos
(upstream processing) que incluyen: preparación del
inoculo, preparación del medio y esterilización.

–Proceso principal (fermentación o bioreacción)

–Aguas abajo (separación y purificación-SP). Llamadas


también operaciones de separación del producto final
(downstream processing). Estas son las operaciones
unitarias que requiere el cultivo, para la obtención del
producto en condiciones de pureza deseadas
UPSTREAM FERMENTAÇAO DOWNSTREAM

Construçáo
do vetor Lise
0 Celular
Seleçáo
de cepa

Etapas de
Purificaçáo
Otimizaçáo
do meio

Bioproduto
III.- SEPARACION DEL PRODUCTO
•Existen diversos requerimientos de separación.
•En algunos casos los productos industriales son utilizados
sin requerir purificación alguna, como en la producción de
yogurt.
•En las aplicaciones ambientales como el tratamiento de
aguas residuales y la degradación de residuos solidos,
el producto es ya un efluente purificado.

•En el caso de productos que deben ser utilizados puros,


como los productos farmacéuticos y los productos
químicos de uso industrial, es necesario recurrir a técnicas
de purificación.
Productos que requieren ser purificados
•El producto puede ser:
–La célula misma.
–Un compuesto intracelular.
–Un compuesto extracelular.
•Estas operaciones pueden representar un 60% del costo
de producción.
•Los procesos dependen de la calidad requerida.
•Si el producto debe ser purificado, se presentan los
siguientes problemas generales:
•Bajas concentraciones de producto
•Gran número de impurezas
•Termolabilidad de bioproductos
•Estrecho margen de operación de pH y fuerza iónica
•Sensibilidad al esfuerzo cortante.
•Inestabilidad de bioproductos en solventes orgánicos
•Un proceso ideal de bioseparación debe tener alta
selectividad, y asegurar estabilidad del producto.
IV.- SEPARACION DE CELULAS
•Se refiere a las operaciones unitarias que separan las células
del caldo de cultivo.
• Generalmente son separación solido-liquido. Filtración y
centrifugación.
Tecnicas de laboratorio.
En laboratorio se usan técnicas de separación, según el tamaño
y la densidad de las mismas como:
Sedimentación isopícnica Esta técnica permite separar células
en función de su densidad, cuando sus densidades difieren en
más de 0,02 g/ml.
Se puede aplicar gradientes de densidad continua o discontinua.
Discontinuo: Se hace sedimentar las células en un gradiente de
densidad, donde la densidad del medio aumenta con la
profundidad del tubo.
•Elutriación centrífuga Este método separa las células en
función de su tamaño.
•Las células suspendidas, son bombeadas hasta la cámara
de separación, localizada en el interior del rotor, mientras
éste gira. La cámara es más
estrecha en el extremo
más alejado del eje del
rotor, el flujo del medio
es más rápido en esa
zona y genera una
fuerza centrípeta más
intensa.
Como hay células con
distinto tamaño y densidad,
las células tienden a
sedimentar a distintas
velocidades, y cada tipo de
célula alcanza su equilibrio
en distintas posiciones de
Tecnicas industriales.
•a.- Filtración.
•En el caso de productos
biotecnológicos puede
presentar tres problemas:
•Tamaños de partículas muy
pequeños.
•Compresibilidad del solido.
•Carácter no newtoniano de
suspensiones.
•Los filtros mas usados son:
•De tambor rotatorio. Se
usan en industria
alimentaria, y farmacéutica. •Filtro prensa. Utiliza presión
•Filtro prensa. Se usan en la
para impulsar la suspensión a
industria cervecera, vinícola,
y en la recuperación de través de las placas filtrantes,
bacterias y hongos. que son desmontables.
b.- Filtro de tambor rotatorio
•Poseen una tela sobre un
cilindro rotatorio, la cual filtra
el flujo que pasa a través de
éste.
•Dicha tela esta unida sobre
la periferia de uno de los
tambores sobre el que se
lleva a cabo el proceso de
filtrado, aplicando la fuerza
de vacío.
•Su operación no asegura
condiciones estériles
c.- Centrifugación.
•Los factores de separación son:
–el tamaño de partícula,
–la diferencia de densidad con el
medio,
–la viscosidad del caldo.
•Para separar partículas
pequeñas, existen centrifugas
que generan 14000 a 15000 g.
•El esfuerzo que se produce,
limita el tamaño máximo de la
centrifuga a 300 a 500 L/h, con
partículas de 0.5 um
•El gran esfuerzo generado,
obliga a construir equipos
refrigerados
•El tipo de centrifuga mas usado
es el tipo de discos.
V.- SEPARACIÓN Y PURIFICACIÓN
DE METABOLITOS
•La selección de las técnicas a emplear depende de:
•1. Naturaleza del producto: Localización del producto:
Variará si es intra- o extracelular; Características físicas y
químicas del producto: si tiene carga, PM; Características
biológicas: se altera con facilidad
•2. Concentración en la que se encuentra
•3. Presencia de productos colaterales
•4. Destino del producto: el grado de purificación será
diferente si se trata de un producto medioambiental,
alimentario o farmaceutico.
•5. Precio del producto: si el producto tiene un precio bajo,
se usarán técnicas que no incrementen los costos.
5.1. SEPARACION DE METABOLITOS
EXTRACELULARES.

•Ejemplos de metabolitos extracelulares incluyen a los


aminoácidos, el ácido cítrico, alcohol, algunos enzimas
(amilasas y proteasas) y la mayor parte de los antibióticos
(penicilina, estreptomicina).
5.2- SEPARACION DE METABOLITOS
INTRACELULARES
–Previo a la separación de los metabolitos, estos deben
ser extraídos del interior de la célula, por ruptura o
disrupcion celular.
–Separación de restos celulares: filtración y
centrifugación.
–Concentraciones típicas de algunos productos
biotecnológicos a la salida del reactor
5.2.1.- Disrupción de células
•Es el proceso por el cual se produce la ruptura de las
células para liberar el producto acumulado en su interior.
5.2.1.1.- Métodos de disrupción

•La elección del método depende de las características de


las células y la estabilidad de los productos.
•Se debe conocer, las características de la pared celular y la
membrana celular.

•Orden de dificultad para la disrupción: Células animales,


micelios, bacilos Gram (-), Bacilos Gram (+), células
vegetales, levaduras, cocos Gram (-), esporas.

•Los métodos pueden ser:


–Mecánicos.
–No mecánicos (físicos, químicos, enzimáticos)
a.- Métodos mecánicos

• Se basan en la aplicación de fuerzas de corte que


deforman la cubierta de las células hasta su
rompimiento.
• Características:
– Suelen ser mas efectivos que los químicos
– Son inespecíficos.
– Generan elevadas temperaturas.
– Requieren mucha energía.
– Pueden dañar productos lábiles.
• Métodos: homogenización, molinos de bolas,
sonicadores,
Homogenización.
•Se somete la suspensión de
células a presiones de 400 a
500 bar, y se hace pasar a
través de una válvula.
•Se crean así velocidades de
corte muy altas, que rompe las
células.
•Esta operación eleva la
temperatura en 1.5 oC por
cada 70 bar de presión.
•Se debe usar una suspensión
celular al 50%, en solución
tampón adecuada
•La suspensión debe recibir un
pre y un post enfriado.
Molino de bolas.
•Consiste en un agitador de discos
montado, que gira en una cámara,
cargada con esferas de vidrio, metal
u otro material.
•Las esferas pueden tener diámetros
de 0.2 a 1.5 mm
•La eficacia del rompimiento celular
depende de la concentración celular,
y de las bolas de vidrio.
•La concentración celular ideal se
encuentra entre 30-60% (Scragg)
•La concentración de las bolas debe
ser del 70 al 90% del volumen del
molino.
•La operación genera calor, por lo que
se requiere sistemas de refrigeración.
Sonicadores
•Se utiliza ultrasonido con
frecuencias de 20 a 50 KHz.
•Las ondas de ultrasonido
crean microburbujas en la
suspensión celular, que
colapsan implosionando
durante el periodo de
compresión de la onda.
(Cavitación)
•La cavitación, produce un
shock de ondas muy intenso,
con un fuerte estrés local,
ocasionando la deformación
y ruptura de las células.
b.-Métodos no mecánicos

• Rompen las cubiertas celulares induciendo la lisis


celular a través de medios químicos, físicos o
enzimáticos.
• Características:
– No generan daños en la célula facilitando su
posterior separación.
– Suelen ser poco eficientes.
– Son mas específicos.
– Son difícilmente escalados
b.1.- Tratamientos químicos
•Tratamiento con solventes
orgánicos. (cloroformo, tolueno)
•Permeabilizan las membranas
celulares, disolviendo componentes
hidrófobos de la pared y los
fosfolípidos de las membranas
•Tratamiento con álcalis. (hidróxido
de sodio e hipoclorito)
•Producen saponificación de los
lípidos de la membrana. Es una
técnica muy severa, pero efectiva y
de bajo costo, siempre y cuando el
producto de interés sea resistente a
pH elevado.
•Agentes caotrópicos (urea,
clorhidratos de guanidina)
•Interfieren con los enlaces no Quelantes (EDTA). Secuestra los
covalentes (puentes de hidrogeno, iones Ca2+ y Mg 2+, que unen las
fuerzas de Van der Walls), haciendo proteínas y fosfolípidos de la
menos hidrofílica, debilitando las membrana, en Gram (-)
interacciones soluto-soluto.
•Tratamiento con detergentes.
•Los detergentes son
anfipáticos.
•Forman micelas con los lípidos
de las membranas,
desestabilizandolas.
•Se clasifican en tres tipos:
•Aniónicos (sales de tetra-alquil-
amonio, pH básico)
•Catiónicos (SDS, pH acido)
•No iónicos (triton-X)
b.2.- Tratamientos físicos.

•Shock osmótico,
congelamiento/descongel
amiento, descompresión,
termólisis,

•Shock osmótico.
•Se produce cuando las
células son sometidas a
medios hipertónicos ó
hipotónicos
•Las células con pared
celular, son mas difíciles
de romper.
Congelamiento/descongelamiento
•Los cristales de hielo que se forman y crecen durante el
congelamiento, si se desarrollan en el citoplasma,
rompen la membrana celular de eucariotas.
•La congelación lenta es mas efectiva que la rápida.
b.3.- Métodos enzimáticos.
•Disrupción enzimática.
•Es un método muy preciso pero requiere una clara
comprensión de la estructura de la pared celular de las
células que se quiere lisar.
•La principal limitación del método es el costo
•Ejemplo: enzima Lisozima (muramidasa)

•Autolisis:
•Método en el cual las células inducen su propia
disrupción, por que se producen señales que inducen la
liberación de enzimas que degradan los organelos y
membranas celulares.
•Es un método lento.
•Se inducen mutaciones en la célula, introduciendo genes
que codifican antibióticos o enzimas que degradan sus
propios organelos y membrana celular
5.2.1.2.- Medida de la Eficiencia de la
disrupción

•Metodos directos
•Se cuenta las células destruidas y las intactas, por
recuento en cámara, recuento en placa.

•Metodos indirectos.
•Determinación del grado de liberación de un metabolito al
medio externo.
5.2.2.- ETAPAS EN LA SEPARACION DE
METABOLITOS
–Separación solido-liquido. Filtración y centrifugación
–Ruptura celular.
–Separación de restos celulares: filtración y
centrifugación.
–Concentración: los métodos dependen de: la
concentración del metabolito, y su solubilidad.
– Purificación del producto: Se busca separar las
impurezas mas abundantes y eliminar la mayor cantidad
de agua.
5.2.2.1.- Concentración del producto.
•Separación de compuestos insolubles.
•Existen técnicas basadas en diferentes principios, ya sean
el tamaño, la carga, el peso.
–a. Sedimentación: es el método más fácil y barato. Si el
producto es estable, se deja sedimentar en el propio
fermentador, pero puede requerir tiempos, de 24 a 48 horas.
–b. Floculación: Las partículas sedimentan si son mayores a
3 μm, caso contrario se añade un floculante, provocando que
aumenten de tamaño y sedimenten. Si lo que sedimenta es
residuo no hay problema, pero si es el producto llevará el
floculante, pudiendo contaminar.
–c. Filtración: es un método efectivo, pero requiere equipos y
gasto de energía.
–d. Centrifugación: es un proceso más rápido que la
sedimentación, pero es de mayor costo por los aparatos que
usa y los gastos de energía.
Separación de compuestos solubles

•- extracción liquido-liquido: en etanol, butanol, acetona.


•- precipitación: en proteínas por precipitación salina,
estreptomicina con sulfato de amonio
•- adsorción de solutos: como proteínas, y ácidos orgánicos
pequeños (carboxílicos) que se pueden adsorber en carbón
activado, o resinas de intercambio iónico.
–Técnicas de membrana: se separan moléculas solubles de
pesos moleculares bajos como ácidos orgánicos, usando la
diálisis, la ultrafiltración y la osmosis inversa.
Concentraciones típicas de algunos productos
biotecnológicos a la salida del reactor
5.2.2.2.- Procesos de purificación
a.- Métodos de laboratorio. Cromatografía.
•En cromatografía, las moléculas
se distribuyen entre dos fases
distintas, y la separación tiene
relación directa con su diferencia
de afinidad en cada fase.
•Los compuestos mas afines a la
fase móvil que a la fase
estacionaria recorren una
distancia mayor que los demás.
•Los diversos métodos
cromatográficos difieren con
respecto a la fase móvil (líquido
o gas), la fase estacionaria
(papel, gel o empaque sólido) y
la fuerza que impulsa a la fase
móvil (presión, gravedad o un
campo eléctrico).
–Cromatografía de adsorción: se usa carbón activado o
similar, para purificar el producto, por interacciones de
adsorcion.
–Cromatografía de intercambio iónico: el producto con
carga eléctrica, se hace pasar por una columna de resina
catiónica o aniónica, según la carga del producto.
–Cromatografía de exclusión molecular: se usan
polisacáridos, como dextranos o sephadex, que actúan
como receptáculos para moléculas de determinado
tamaño, ni más grandes ni más pequeñas.
– Cromatografía de afinidad: es la más fina, pero también
la más cara. Se usa columna con sustrato muy afín al
producto, como puede ser la relación antígeno –
anticuerpo, o enzima – sustrato.
Precipitación
•Se concentra el soluto de
una solución convirtiéndolo
en sólido mediante la acción
de un agente precipitante.

•Ventajas:
•1. Operación que se adapta
fácilmente a gran escala
•1. Puede realizase en
forma continua
•2. El equipo que se utiliza
es sencillo
•3. Se dispone de diversos
agentes precipitantes: sales,
isoeléctrica, con solventes.
Precipitación salina (Salting-out)
•En altas concentraciones
salinas (o alta fuerza iónica)
algunos solutos como proteínas
ó polímeros precipitan debido al
aumento de las interacciones
hidrofóbicas entre ellos.
•La concentración salina y el
tipo de sal requerida para la
precipitación varían con el
soluto.

•Mecanismo: La adición de
sales elimina el agua de la
proteína hidratada, dejando las
regiones hidrofóbicas en
libertad de combinarse
intermolecularmente y presipitar
Ecuación de la precipitación con sales
•Log S = A−m[Sal]
•Donde: S = Solubilidad de la proteína a un valor dado de
concentración salina.
•A = Constante que depende la proteína, del pH y la temperatura.
(toma un valor mínimo en el punto isoeléctrico)
•m = Pendiente de la curva de solubilización por salado. Ésta es
independiente del pH y la temperatura, pero varía con el tipo de
sal y de proteína.
•Las sales con aniones polivalentes como sulfatos y fosfatos
tienen m mayores que las sales univalentes, y los cationes
polivalentes como calcio y magnesio disminuyen el valor de m
•Naturaleza de la sal:
•Los aniones son más efectivos en el siguiente orden (Series de
Hofmeister):

•Los cationes son efectivos en el siguiente orden:


Precipitación isoeléctrica
•Esta técnica se basa en la
disminución de la solubilidad
en el punto isoeléctrico

•Mecanismo
•Las proteínas por su
naturaleza anfotérica
presentan una carga neta
negativa a pH altos y una
carga neta positiva a pH
bajos.
•En el pH isoeléctrico, la
carga neta de la proteína es
cero.
•A este pH la repulsión entre
moléculas es mínima y se
produce agregación.
Precipitación con solventes
•Constantes dieléctricas a 20 oC
•Disminución de la solubilidad
por adición de un solvente
orgánico ligeramente polar
•Mecanismo
•El agua se caracteriza por su
alta constante dieléctrica, lo cual
significa que los iones en
solución acuosa presentan
interacciones débiles entre si.
•Un solvente orgánico (etanol o
acetona), tienen menor •logS= logSo + K/D2S
constante dieléctrica que la del •S = Solubilidad de la proteína
agua, lo cual produce una •DS = Constante dieléctrica de la
disminución en la solubilidad de mezcla solvente-agua.
ésta. •K = Constante dieléctrica
original del medio acuoso.
•So = Es la solubilidad
extrapolada
b.- Técnicas de membrana.
•(microfiltración, ultrafiltración, y
osmosis inversa).
•a.1.- Ultrafiltración (o filtración de
flujo cruzado)
•Se usa en la separación de células,
restos celulares o proteínas.
•La desventaja principal es el
ensuciamiento de la membrana.

Aplicación:
-Clarificación de jarabe de maíz
como dextrosa y fructosa
-Concentración del agua de
lavado de almidón
- Enriquecimiento de dextrosa
a.2.- Osmosis inversa (RO)
•Osmosis. Proceso natural •R.O. Se revierte el flujo de
mediante el cual moléculas de moléculas de agua a través de la
membrana semipermeable, como
agua fluyen a través de una
resultado de aplicar presión a la
membrana semipermeable, solución de mayor concentración.
desde una solución de baja •Es posible obtener agua pura a
concentración a otra de mayor partir de una solución de alta
concentración. concentración.
Algunas aplicaciones
•Industria Azucarera
•La industria de azúcar, adiciona cal y floculan, para clarificar el
jugo y remover impurezas como ceras, dextrinas y gomas, previo
al refinamiento del jugo para su evaporación y cristalización.
•La filtración por membranas puede clarificar el jugo natural,
eliminando el uso de químicos y mejorando la calidad y el
rendimiento del jugo.

•Industria Farmacéutica /Biotecnología


•La filtración por membranas reemplaza a los métodos de
separación como los filtros rotativos al vacío o la centrifugación,
mejorando en forma significativa el rendimiento del proceso.
•Otras aplicaciones incluyen:
•Purificación y concentración de aminoácidos
•Recuperación y purificación de péptidos y proteínas
•Concentración y desmineralización de plasma sanguíneo
•Industrias Química y Ambiental
•La filtración por membranas puede usarse para procesar
efluentes líquidos para reducir DBO (Demanda Biológica de
Oxigeno) produciendo agua limpia.
c.- Destilación.
•Es la operación de separar una mezcla líquida, por vaporización
y condensación en los diferentes componentes, aprovechando los
diferentes puntos de ebullición de cada una de las sustancias.
•Se usa para la concentración de productos biotecnológicos no
lábiles como etanol.
•La destilación azeotrópica es una de las técnicas usadas para
romper un azeótropo en la destilación. Un caso común es la
mezcla etanol-agua, que al 95/5 % etanol/agua, los coeficientes
de actividad del agua y del etanol son iguales, entonces la
concentración del vapor de la mezcla también es de 95/5 %
etanol-agua (azeotropo), y la destilación no es efectiva.
•El azeótropo 95/5 % debe romperse para lograr una mayor
concentración.
•Un método consiste en adicionar un material agente de
separación. Por ejemplo, benceno a la mezcla, que cambia la
interacción molecular y elimina el azeótropo.
•La desventaja, es la necesidad de otra separación para retirar el
benceno.
•Destilación al vacío.
•La estabilidad de un azeótropo
depende de la presión en la que los
coeficientes de actividad se cruzan.
•El azeótropo se puede saltar
cambiando la presión.
•Comúnmente, la presión se fija de
forma tal que el azeótropo quede cerca
del 100 % de concentración, para el
caso del etanol, operando con vacío,
este se puede ubicar en el 97 %.
•Método de tamiz molecular.
•El azeotropo 95/5 %, se hace pasar
por un lecho de moléculas que
absorben el agua de la mezcla. Luego el
tamiz se calienta para eliminar el agua y
puede reutilizarse.
d.- Absorción.
•Consiste en la separación de uno o
más componentes de una mezcla
gaseosa con la ayuda de un solvente
líquido con el cual forma solución (un
soluto A, se absorbe y pasan a la fase
líquida).
•Un ejemplo es la absorción de
amoníaco A del aire B por medio de
agua líquida C.
•Las torres de relleno, utilizadas para el
contacto continuo del líquido y del gas,
son columnas verticales rellenas con
empaques de superficie grande.
•El líquido se distribuye sobre éstos y
escurre hacia abajo, a través del lecho
empacado, de tal forma que expone
una gran superficie al contacto con el
gas.
Precipitado industrial
•En el diseño de un proceso de precipitación debe tomarse como
base el comportamiento cinético de las partículas en solución. El
conocimiento de este comportamiento permite hacer la selección
adecuada de la geometría en la que se realizará el proceso.
•Se puede idealizar la precipitación como un mecanismo de 6
etapas:
•1. Mezclado inicial: La alimentación conteniendo el soluto es
mezclada con el no-solvente o la sal
•2. Nucleación: Aparecen pequeñas semillas e inicia la
precipitación
•3. Crecimiento limitado por difusión: El precipitado crece por
difusión
•4. Crecimiento influenciado por flujo: Nuevo crecimiento es
ayudado por mezclado
•5. Floculación: Partículas coloides se agregan en flóculos
grandes
•6. Centrifugación: Los flóculos son separados por los métodos
ya descritos Alguno de estos procesos ocurrirán
simultáneamente, pero se discutirán como si ocurriesen
secuencialmente
VI.- TERMINADO DEL PRODUCTO
• Etapa final del proceso.
• El producto se lleva a su concentración final, por
cristalizacion i/o secado, y se agregan
conservantes y se envasa.
Cristalización
•Usualmente es el ultimo paso en productos de alta pureza
como los antibioticos.
•Se hace a bajas temperaturas, para minimizar la
degradación térmica de los materiales termolábiles.
•Las condiciones optimas de separación, se determinan
experimentalmente con ayuda de los diagramas de fase
específicos.
Secado
•Se para remover agua de los productos húmedos como
cristales.
•Las técnicas de secado deben tener en cuenta, las
características de ls materiales y el calor sensible
requerido.
•Las técnicas mas usualmente usadas son:
•-secado al vacío, para productos farmacéuticos.
•-liofilización, donde el agua se remueve por congelación
y sublimación, para antibióticos, enzimas y células.
•- secadores de tambor rotatorio, donde al agua es
removida por acción del calor superficial.
•- secadores spray, que emplean la atomización de
soluciones, en cámaras con acción del calor.
REFERENCIAS
•Espinel, Esperanza; López, Elizabeth. PURIFICACIÓN Y
CARACTERIZACIÓN DE a-AMILASA DE PENICILLIUM
COMMUNE PRODUCIDA MEDIANTE FERMENTACIÓN EN
FASE SÓLIDA Revista Colombiana de Química, vol. 38,
núm. 2, 2009, pp. 191-208 Universidad Nacional de
Colombia Bogotá, Colombia.
•Garcia Llanos H. Gabriel. Aislamiento, modificación
estructural y evaluación biológica de metabolitos
secundarios de Withania aristata (Solanaceae),
endemismo canario. Tesis doctoral. Curso 2009/10
CienCias y teCnologías/6 i.s.B.n.: 978-84-7756-936-7

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