Aplicação do CL-EM na procura e caracterização

de produtos naturais Médio e baixo peso

molecular
• Compostos polares e termicamente lábeis (Técnicas de ionização
brandas):
• Pressão atmosférica: ESI (Electrospray), APCI (Atmospherical Pressure
Chemical Ionization), APPI (Atmospherical Pressure Photo Ionization), DESI
(Dessorption Electrospray Ionizatino) e EASI (Easy Ambient Sonicspray
Ionization);
• Pouca informação estrutural: baixa energia interna;
• Surgimento do EM/EM sequencial – CID (Dissociação induzida por colisão);

• Pesquisa de fragmentos – 2 desvantagens:

• Reisolamento (recuperação) de compostos conhecidos – atividade diminuída;
• Potencial perda de constituintes – nenhuma atividade x estruturas diferentes;
Aplicação do CL-EM na procura e caracterização
de produtos naturais
• Associação a cromatrografia líquida: CL-IESEM/EM sequencial.

• CL: Diferentes tempos de retenção

• Detecção por UV e EM: Padrão espectroscópico dos compostos de referência.

Estrutura de compostos fenólicos e

saponinas.
Papel do CL-EM no controle de qualidade de
produtos vegetais
• Doses de produtos vegetais – 80-113%;

• Eficácia duvidosa e toxicidade;

• Manufatura irresponsável – Inconformidades frente ao FDA;

• Inclusão do termo “fingerprint” para plantas medicinais – padronização.

Autenticação de plantas por “fingerprint”

• Fingerprint – “impressão digital”: diversas matrizes biológicas;

• CL-MS: Rápida separação e múltipla detecção - Alta sensibilidade e seletividade

combinada;

• Variação: Dados Quantitativos X Dados qualitativos são bastante consistentes;

 Autenticação de plantas por “fingerprint”

Perfil espectroscópico de 14 compostos encontrados em Salvia miltiorrhiza transgênica, provenientes de raízes peludas.

Medicina Tradicional Chinesa: Principais constituintes:

Doenças cardiovasculars diterpenóides e compostos fenólicos
solúveis em água.
Autenticação de plantas por “fingerprint”

Shi M, Luo X, Ju G, Yu X, Hao X, Huang Q, et al. Increased

accumulation of the cardio-cerebrovascular disease
treatment drug tanshinone in Salvia miltiorrhiza hairy roots
by the enzymes 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase
and 1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate reductoisomerase.
Funct Integr Genomics. 2014;14(3):603–15.
Padronização de plantas medicinais

• Demanda pública: seguro, eficaz e alta qualidade.

Detector de UV para quantificar e EM para
identificar
• Método pouco complexo, limpo e reprodutível – Rotinas de
trabalho.

Yoon KD, Chin YW, Ahn MJ, Kim J. Preparative Isolation of Alisol
B and Alisol B 23-Acetate from Alismatis Rhizoma by Centrifugal
Partition Chromatography Coupled with ELSD.
Chromatographia. 2009;69(7–8):791–3.
 Modo de monitoramento de íon selecionado no
EM
• Detector específico – caro : UV não é satisfatório;
• Mode SIM (Selected Ion Monitoring);

Wang M, Park C, Wu Q, Simon JE. Analysis of artemisinin in

Artemisia annua L. by LC-MS with selected ion monitoring. J
Agric Food Chem. 2005;53(18):7010–3.
CL-EM para detecção de componentes tóxicos e
adulterante sintéticos

Stephania tetrandra Aristolochia fangchi

CL-EM para detecção de componentes tóxicos e
adulterante sintéticos
• Associação de métodos:
• Extração em fase sólida;
• Análise em Espectroscopia de massa sequencial;
Papel do CL-EM no metabolismo e nos estudos de
farmacocinética de produtos naturais.
• Limitações para farmacocinética de produtos naturais:
• Complexidade e falta de conhecimento dos princípios ativos.
• Uso de plantas: taxa de detecção ativo em picogramas/L;
• Interferência dos compostos do plasma;
• Intensa metabolização;
Papel do CL-EM no metabolismo e nos estudos de
farmacocinética de produtos naturais.

Picrorhiza kurroa

>60% e >70%, respectivamente

Referências complementares

Shi M, Luo X, Ju G, Yu X, Hao X, Huang Q, et al. Increased accumulation of the cardio-

cerebrovascular disease treatment drug tanshinone in Salvia miltiorrhiza hairy roots by the
enzymes 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase and 1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate
reductoisomerase. Funct Integr Genomics. 2014;14(3):603–15.

Yoon KD, Chin YW, Ahn MJ, Kim J. Preparative Isolation of Alisol B and Alisol B 23-Acetate
from Alismatis Rhizoma by Centrifugal Partition Chromatography Coupled with ELSD.
Chromatographia. 2009;69(7–8):791–3.

Wang M, Park C, Wu Q, Simon JE. Analysis of artemisinin in Artemisia annua L. by LC-MS

with selected ion monitoring. J Agric Food Chem. 2005;53(18):7010–3.