El ciclo del ácido cítrico
Catabolismo (fase destructiva)
• Degradación de moléculas complejas
(carbohidratos, lípidos, proteínas…)
• Formación de moléculas más sencillas
(CO2, H2O, ácido láctico, amoniaco….)
• Liberación de energía que es almacenada
como ATP (adenosín trifosfato)
• Son reacciones oxidativas
• Reacciones exergónicas (se libera energía
en forma de ATP)
Anabolismo (fase constructiva)
• Formación de moléculas más complejas a
partir de moléculas simples (orgánicas o
inorgánicas)
• Se requiere ATP (formación de nuevos
enlaces)
• Son reacciones reducción (se requieren
electrones)
• Reacciones endergónicas (se requiere
energía la cual procede de la hidrólisis del
ATP)
 Sir Hans Adolf Krebs (bioquímico alemán)

 Sus principales trabajos de investigación se centraron en

el análisis del metabolismo de la célula.

 Principalmente en la trasformación de los nutrientes en

energía.
(1900-1981)
 Descubrió que todas las reacciones conocidas dentro de
las células estaban relacionadas entre sí, nombrando a
esta sucesión de reacciones: ciclo del ácido cítrico
(1937).

 Premio novel de Fisiología en el año 1953

El centro del metabolismo
Molécula de acetilo
activado

Se oxida por medio de

las reacciones
enzimáticas sucesivas
del ciclo
 Ruta metabólica que forma parte de la respiración celular para obtener
energía

 Se lleva a cabo en la mitocondria de las células

 8 reacciones enzimáticas

 Vía central del metabolismo aerobio

 Vía oxidativa final carbohidratos, ácidos grasos y aminoácidos

 Fuente intermediarios para biosíntesis

 La acción combinada de este ciclo y de la cadena respiratoria

transportadora de electrones genera la mayor parte de la producción de
energía en forma de ATP
Se lleva a cabo en la matriz mitocondrial
 Complejo piruvato deshidrogenasa
• La oxidación del piruvato a Ac-CoA es catalizada por el complejo
multienzimático de la piruvato deshidrogenasa

• Esta reacción irreversible en tejidos animales, no forma parte del ciclo de

Krebs, pero constituye un paso obligatorio para la incorporación de los
glúcidos al ciclo
Formado por 3 enzimas:

Piruvato deshidrogenasa E1(24 subunidades,

coenzima TTP)
Dihidrolipoil transacetilasa E2 (24 subunidades,
coenzima ácido lipoico, CoA-SH)

Dihidrolipoil deshidrogenasa E3 (12 subunidades,

coenzima FAD, NAD+)
La conversión del piruvato a Acetil-CoA por la acción de la Piruvato
Deshidrogenasa es un punto crítico del metabolismo, particularmente en el
hígado, puesto que disminuye la posibilidad de que el piruvato se
reconvierta en glucosa (GLUCONEOGENSIS) o en ácido láctico (lactato
deshidrogenasa)

La conversión a Acetil-CoA compromete al piruvato a entrar al Ciclo de

Krebs:
 puede ser utilizado como sustrato para la fosforilación oxidativa
ser convertido a citrato para ser exportado al citosol y servir como
sustrato para la biosíntesis de ácidos grasos
1. Citrato Sintetasa
2. Aconitasa
3. Isocitrato Deshidrogenasa
4. α-cetoglutarato
Deshidrogenasa
5. Succinil-CoA Sintetasa
6. Succinato Deshidrogenasa
7. Fumarasa
8. Malico Deshidrogenasa
 La condensación de la acetil-CoA con oxalacetato (último
producto del ciclo) para producir el primero de los ácidos
tricarboxílicos que participan en el ciclo

 Esta reacción de condensación es catalizada por la enzima

Citrato Sintetasa

 El citrato producido por la enzima, es capaz de inhibir

competitivamente la actividad de la enzima (mucho se inactiva)

 En la reacción sucede la hidrólisis del enlace tioéster de la

acetil-CoA (esta reacción es sumamente exoergónica (ΔG'°=-31.4
kJ/mol), motivo por el cual este paso es irreversible)
Enzima: Citrato Sintetasa
 El citrato es convertido en isocitrato por medio de la
enzima aconitasa (aconitato hidratasa)

 La reacción tiene lugar en dos pasos:

Deshidratación hasta cis-aconitato (el cual permanece

unido a la enzima)

Rehidratación hasta isocitrato

El citrato se isomeriza para formar un alcohol secundario
que puede oxidarse fácilmente

Enzima: aconitasa
 El isocitrato es oxidado por deshidrogenación, en una reacción catalizada
por la enzima isocitrato deshidrogenasa

 La enzima requiere NAD+ y Mg++ (facilita la liberación de CO2)

 La reacción se lleva a cabo en dos pasos:

 Deshidrogenación, en la que se forma oxalosuccinato que permanece

unido a la enzima

 Descarboxilación para formar el α-cetoglutarato

 En esta reacción irreversible se produce CO2 y el primer NADH + H+ del

ciclo
El isocitrato se oxida para formar NADH y CO2

Enzima: isocitrato deshidrogenasa

 El ciclo prosigue mediante la actividad de la enzima α-
cetoglutarato deshidrogenasa, la cual convierte el α-
cetoglutarato en succinil-CoA

 La α-cetoglutarato deshidrogenasa es un complejo

multienzimático, cuya acción es análoga a la piruvato
deshidrogenasa y utiliza los mismos cofactores (pirofosfato de
tiamina (TPP), ácido lipoico, NAD+, FAD y coenzima A)

 La reacción es prácticamente irreversible y en ella se forma el

segundo CO2, que proviene del oxalacetato
El α-cetoglutarato se oxida para formar una
segunda molécula de NADH y CO2

Enzima: α-cetoglutarato deshidrogenasa

 Continúa con la liberación de la CoA y la conversión de succinil CoA en
succinato

 La succinil CoA es un tioéster de alta energía (su ΔG°′ de hidrólisis está en

unos -33.5 kJ mol-1, parecido al del ATP que es de -30.5 kJ mol-1)

 En este punto del ciclo de Krebs se realiza una fosforilación a nivel del
sustrato, y puede generarse ATP

 Sin embargo, la transferencia del enlace de alta energía no se hace

directamente al ADP, sino que se realiza la fosforilación de GDP (guanosín
difosfato) que pasa a GTP (o de IDP, inosina difosfato, que pasa a ITP)

 Ambos nucleótidos pueden ser utilizados para la formación de ATP por

acción de una enzima, la nucleósido difosfato cinasa o fosfocinasa.
La ruptura de la succinil-CoA esta acoplada a una
fosforilación a nivel de sustrato

Enzima: succinil-CoA sintetasa

Enzima: nucleósido difosfato cinasa o fosfocinasa

 Consiste en la reorganización de moléculas de cuatro átomos de carbono
(succinato) hasta la regeneración del oxalacetato

 El grupo metilo presente en el succinato tiene que convertirse en un

carbonilo

 Esta conversión ocurre mediante tres pasos:

una primera oxidación

una hidratación
una segunda oxidación

Estos tres pasos, además de regenerar oxalacetato, permiten la posterior

obtención de energía mediante la formación de FADH2 y NADH
La molécula de 4 carbonos succinato se oxida para
formar fumarato y FADH2
Enzima: succinato deshidrogenasa

Esta enzima utiliza FAD como coenzima, el cual en estado

reducido (FADH2) constituye una fuente directa de electrones
para la cadena respiratoria a nivel de la coenzima Q

Esta es la única enzima del ciclo integrada a la membrana

mitocondrial interna, directamente ligada a la cadena
respiratoria

Se reúnen así, anatómica y fisiológicamente, el ciclo de Krebs el

transporte de electrones y la fosforilación oxidativa
Hidratación del fumarato

Enzima: fumarasa
EL malato se oxida para formar oxalacetato y un
tercer NADH
1. Un grupo acetilo es oxidado a 2 moléculas de CO2 en un
proceso de 4 pares de electrones.

2. Tres moléculas de NAD+ son reducidas a NADH (3 pares de

electrones)

3. Una molécula de FAD es reducida a FADH2 (un par de

electrones)

4. Se forma un grupo fosfato de alta energía (GTP)

 REGULACIÓN
 La regulación del ciclo de Krebs se realiza principalmente por la
disponibilidad de sustrato y por la retro-inhibición por acumulación de los
productos del ciclo

 El aumento en la concentración de NADH, inhibe a la piruvato

deshidrogenasa, a la isocitrato deshidrogenasa y a la citrato sintetasa

 La acetil-CoA inhibe a la piruvato deshidrogenasa

 La succinil-CoA inhibe a la succinil-CoA sintetasa y a la citrato sintetasa

 Los niveles de ATP son consistentemente conservados in vivo y no

cambian más del 10% entre el reposo absoluto y el ejercicio más activo, in
vitro, el ATP es un potente inhibidor alostérico de la citrato sintetasa y de la
α-cetoglutarato deshidrogenasa
 El Calcio también funciona como regulador. Activa tres de las
deshidrogenasas que participan en el ciclo: la piruvato
deshidrogenasa, la isocitrato deshidrogenasa y la α-
cetoglutarato deshidrogenasa y por lo tanto aumenta el flujo
continuo a través del ciclo

 El citrato es un inhibidor de la fosfofructocinasa (la enzima

que es paso limitante de la glucólisis) y actúa eficientemente
disminuyendo el aporte de sustrato inicial, piruvato, para el
ciclo de Krebs
 Regulación del ciclo

I. Disponibilidad de AcetilCoA
II. Control interno

Enzimas clave:
•Piruvato deshidrogenasa
•Citrato sintasa
• Isocitrato deshidrogenasa
• -Cetoglutarato deshidrogenasa
 Citrato sintasa

Activadores Inhibidores
 alto[ADP]  alto[NADH]
Citrato
Succinil CoA
 alto[ATP]

Isocitrato Deshidrogenasa
Ca++ alto [ATP]
alto [ADP]
-Cetoglutarato Deshidrogenasa
Ca++ Succinil CoA
 bajo[ADP]
La proximidad intracelular física y funcional del ciclo del ácido
cítrico y la cadena respiratoria, determina que la actividad de uno
dependa de la otra y viceversa

Ambas vías metabólicas están reguladas por las concentraciones

relativas de ATP/ADP y NADH/NAD