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HEMOPARÁSITOS

OBJETIVOS

• Aprender a realizar técnicas; hematológicas


para determinar los parásitos presentes en sangre.
• Tener el conocimiento de las técnicas que se utilizan en
la actualidad para determinar parásitos presentes en
sangre.
• Familiarizar al alumno con el manejo de muestras
sanguíneas para su posterior análisis.
¿QUÉ SON?
• Protozoarios o helmintos que viven en
torrente sanguíneo o dentro de Eritrocitos

• Trypanosoma cruzi
• Plasmodium spp
• Microfilarias
TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO
• D. clínico diferencial.
• D. parasitológicos directos
• D. parasitológicos indirectos
• D. Serológicos
DIAGNÓSTICOS CLÍNICOS
DIFERENCIALES

Cardiomegalia Megacolon Megaesófago


DIAGNÓSTICOS PARASITOLÓGICOS
DIRECTOS

• Gota gruesa
• Gota fina
• Recuento de
trypanosoma
• Biopsia
• Microstrout (Bennett)
PELÍCULA HÚMEDA
• Útil en casos de parasitemia
elevada (fase aguda)
Toma de
muestra

Extender la Desfibrinación del


muestra material

Cubrir con otra


laminilla

Buscar parásitos
GOTA GRUESA
Permite la detección de hemoparásitos.

Toma de
muestra

Extender la Desfibrinación del


muestra material

Permitir el
sacado

Teñir con
solución
Giemsa al 10%
GOTA FINA
Facilita la observación de las
Toma de características morfológicas
muestra de los parásitos

Realizar
extendido

Permitir el
secado

Fijar con
metanol (3seg)

Teñir con solución


Giemsa al 10%
TINCIONES
Wright y Giemsa
• Tinción policromática (ácido y básico)
• Se basa en la relación de las
características básicas o ácidas de lo
compuestos con los colorantes.
Eosina: afinidad por componentes
alcalinos
Azul de metileno: afinidad por
componentes ácidos

Citoplasma rosa (eosina)


Núcleos morados (azul de metileno)
Colorante Composición Muestras a teñir
Wright * Eosina Y * Diferenciación de
Para tinciones vitales y * Azul de metileno células sanguíneas
supravitales. * Azul B * Cromosomas
Glicerol * Cortes histológicos

Giemsa * Eosina * Frotis sanguíneos


Para tinciones no * Azul de metileno * Cortes histológicos
vitales. Azur B * Examen para
protozoos
DIAGNÓSTICOS PARASITOLÓGICOS
INDIRECTOS
• Cultivo
• Inoculación en animales
• Xenodiagnóstico
XENODIAGNÓSTICO
Permite la detección de parásitos cuando las extensiones de sangre periférica son negativas

Permitir que se
Ninfas exentas alimenten
de infección aprox. 20 min

Obtener Observar
muestra de bajo
heces microscopio
DIAGNÓSTICOS SEROLÓGICOS
Basadas en una reacción antígeno-anticuerpo.

• FC (Fijación del complemento)


• IFI (Ensayo de inmunofluorescencia)
• ELISA
ELISA (PRUEBA POR INMUNO ABSORCIÓN
LIGADO A ENZIMAS)

• Reacción serológica que utiliza conjugados para poder visualizar la


reacción ANTIGENO-ANTICUERPO.
• El ELISA, se basa en el uso de anticuerpos marcados con una enzima
(generalmente la peroxidasa), de forma que los conjugados resultantes
tengan actividad tanto inmunológica como enzimática.
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico

Trypanosoma cruzi Sangre, intracelular Triatoma infestans, Examen directo de


F.I. Amastigotes T. pallidipennis y sangre
T. barberi. Hemocultivo
Inoculación en
animales
de laboratorio
Xenodiagnóstico
Corte histológico
Exámenes
inmunológicos
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico

Plasmodium falciparum, Sangre, intracelular Anopheles sp. Frotis y gota gruesa


P. malarie, en los eritrocitos. (antes del paroxismo
P. vivax y F.I. Esporozoito palúdico)
P. ovale. Inmunoflourescencia
indirecta
Hematoaglutinación
indirecta
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico
Toxoplasma gondii Intracelular en Felis silvestris catus Demostración del
cualquier tipo de Sus scrofa Toxoplasma en líquido
célula Ovis orientalis aries cefalorraquídeo,
sobre todo en humor
intestino acuoso, sangre,
(excepto eritrocitos). esputo,
F. I. Ooquiste biopsia de ganglios,
esporulado impronta de medula
o
placenta.
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico
Leishmania donovani, Intracelulares en Lutzomia sp, Tinción de frotis
L. mexicana, macrófagos Phlebotomus sp. sanguíneo.
L.tropica, F. I. Promastigote Impronta en las
L. brasiliensis. metacíclico lesiones
de leishmaniosis
temprana.
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico

Babesia sp. Intracelulares en Garrapata (família Frotis sanguíneo


Eritrocitos. Ixodoidea) teñido
F. I. Esporozoitos
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico

Wuchereria bancrofti Vasos sanguíneos y Culex Encuentro de


Linfáticos F.I. Larvas quinquepasciatus microfilmarías en
filariales (3er estadio ) movimiento en sangre
periférica de una
muestra tomada en la
noche.
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico

Brugia malayi Sangre periférica Anopheles sp. Frotis sanguíneo


F.I. Larvas filariales (3er Mansonia sp. teñido
estadio ) Aedes sp. de una muestra
tomada
por la noche
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico

Mansonella ozzardi Sangre periférica F.I. Culicoides furens Frotis sanguíneo


Larvas filariales teñido
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico

Loa loa Ojo y en la Chrysops sp. Frotis sanguíneo


circulación teñido
(día), pulmones de una muestra
(noche) F.I. Larvas tomada
filariales durante el día
Técnica de
Ubicación en el
Vector diagnostico
cuerpo humano
Agente etiológico

Mansonella perstant Sangre periférica Culicoides milnei, Frotis sanguíneo


(Dipetalonema F.I. Larvas filariales C. grahamii. teñido
perstant)
Tinción de Giemsa
Sumergir los
portaobjetos en Añadir colorante
Dejar secar el
un recipiente con Giemsa durante
frotis al aire.
metanol durante 10’.
20’

Lavar con
Observar a 10X, solución
40X, 100X. amortiguadora
por 5’

Si se llega a sobre
teñir, repetir
lavado.
Tinción de Wright
Añadir colorante Lavar con
de Wright sobre el solución Escurrir para
frotis durante 5 amortiguadora de eliminar restos de
minutos fosfatos durante 5 colorantes
minutos

Observar a 10X, Enjuagar con


40X y 100X agua de la llave

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