LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
2015
Pasien Perawat Dokter

Mikroorganisme

Lingkungan fisik
 STERILISASI
 DISINFEKSI
 ANTISEPSIS
 DEGERMING
 SANITASI
 Jumlah mikroba
 Sifat mikroba
 Pengaruh lingkungan
 Waktu kontak
 KLINIK:
MENCEGAH PENYEBARAN INFEKSI
 LABORATORIUM :
MENCEGAH KONTAMINASI ALAT DAN
MEDIA PERBENIHAN KUMAN
 INDUSTRI :
◦ MENGHAMBAT DEKOMPOSISI OBAT, MAKANAN,
MINUMAN
◦ STERILISASI ALAT KESEHATAN
ASEPSIS :
 Kondisi bebas dari mikroorganisme patogen
(Webster)
 Tehnik untuk menjaga area kerja dan
petugas kesehatan sebebas mungkin dari
mikroorganisme dengan perlindungan
intensif pada pasien dan petugas (Hoeller)
ANTISEPTIK :
Bahan kimia yang digunakan pada jaringan
hidup untuk menghambat atau membunuh
mikroba.
CLEANING (PEMBERSIHAN/PENCUCIAN)
Tindakan membersihkan semua debu,tanah
dan bahan asing yang tampak.
DISINFEKSI
Destruksi bentuk vegetatif menggunakan
bahan kimia
DISINFEKTAN:
Bahan kimia yang digunakan pada benda /
alat untuk membunuh atau mengurangi
pertumbuhan mikroorganisme
STERILISASI :
Tindakan merusak semua bentuk kehidupan
mikroba,vegetative, dan endosporanya.
DEGERMING :
DISINFEKSI TETAPI LEBIH MERUPAKAN
PROSES MEKANIS DARIPADA MEMATIKAN
MIKROBA
Cleaning :Mengurangi bahan organik dan
tanah serta mikroorganisme yang
terkandung didalamnya pada permukaan
lingkungan dan instrumen
SANITASI :
MENURUNKAN JUMLAH MIKROBA SAMPAI
LEVEL YANG AMAN BAGI MASYARAKAT DAN
MEMINIMALKAN KEMUNGKINAN PENULARAN
PENYAKIT
1.Merusak membran sel
a) Perubahan permeabilitas  menurunkan
tegangan permukaan
contoh: Triton K-12; Tween -80)
b) Perubahan permeabilitas akibat denaturasi
protein membran sel
contoh: Phenol group : Lysol , Cresol,
Creolin
2. Mengganggu kerja Enzim
a) Logam berat : Ar,Ag,Hg
b) Bahan – bahan Oksidator :
c : Gol Halogen : iodine tincture, chlorine
H2O2
KMnO4
3. Denaturasi protein akibat coagulasi dan
presipitasi protoplasma
c : alkohol , bahan –bahan asam dan
alkalis
1.Chlorhexidine gluconate 1,5% (Hibiscrub)
Cara kerja : Menurunkan tegangan permukaan
Penggunaan : Pre –op ;Cuci tangan
2.Iodine (Yodium tincture )
Cara kerja : Oxidizing agent : Inaktivasi enzim
Penggunaan: Pre – op ; Vena punctie
3. Iodophore (Betadine)
Cara kerja : = iodine
Penggunaan : Pre-op ; Vena punctie
4. Alkohol 70%
Cara kerja : Memecah lipid
Denaturasi protein
Penggunaan : Vena punctie ; tindkn medis invasive
4. Alkohol 70%
Cara kerja : Memecah lipid
Denaturasi protein
Penggunaan : Vena punctie ; tindkn medis invasive
5.Hidrogen peroksida (H2O2 3%)
Cara Kerja : Mmch ggs –OH raddikal bebas merusak
lemak
Macam-macam disinfektan :
1.Alkaline glutaraldehid2%
Cara kerja : inaktivasi enzim
Guna : disinfektan instrumen dalam bbrp jam
2.Formaldehyde
Cara kerja :inaktivasi enzim
Guna : disinfektan instrumen
3.Chlorin (Sodium hypochlorit 0,5%)
Cara kerja :Oxidizing agent : inaktivasi enzim m.o
(SH –SS)
Guna : disinfeksi ruangan (kontaminasi darah atau
cairan tbh)
4.Phenol (Lysol, Creoline)
Cara kerja : Inaktivasi oksidase dan
dehidrogenase di membran sel
Guna : disinfeksi ruangan

5. Alkohol 70%
Cara kerja : memecah lipid ,denaturasi
protein
Guna : disinfeksi stetoskop,termometer
METODE FISIS:
1. PEMANASAN :
 PEMANASAN KERING :
PRINSIP KEMATIAN MIKROBA:
PROSES OKSIDASI (ENDOSPORA TIDAK MATI)
1.1 FLAMING :
 SCALPEL, PINSET, WASKOM, BENGKOK
1.2 RED HEAT/INCINERATION (PEMIJARAN):
 OSE, BAHAN YANG TERKONTAMINASI

1.3 HOT AIR STERILIZATION :

 MENGGUNAKAN ALAT OVEN
 SUHU TINGGI : 160 – 170oC 1-2 JAM
 UNTUK BAHAN MINYAK, BEDAK, ALAT GELAS
 INGAT : ALAT LOGAM RUNCING, DIPATERI,
TEKSTIL/KAPAS
 PEMANASAN BASAH :
PRINSIP KEMATIAN MIKROBA :
DENATURASI PROTEIN
 SUHU < 100oC:
◦ PASTEURISASI:63oC 30’ (utk ASS)
◦ TYNDALISASI : 65oC 30’- 3 HARI BERTURUT-TURUT
ENDOSPORA MATI
 SUHU = 100oC:
◦ ALAT DIREBUS DALAM AIR SELAMA 10-15’
 SUHU > 100oC:
◦ ALAT : OTOKLAF
◦ SUHU 121oC SELAMA 15 MENIT, ENDOSPORA MATI
◦ STERILISASI ALAT/BAHAN/MEDIUM PERBENIHAN
KUMAN
◦ INGAT : TERJADI KONDENSASI AIR
2. FILTRASI
 BAHAN CAIRAN YANG TIDAK TAHAN PANAS
 UDARA
 MENGGUNAKAN ALAT PENYARING (MEMBRAN)
DENGAN UKURAN PORI-PORI TERTENTU

3. PENDINGINAN (SUHU RENDAH)

 SUHU 0-7oC ATAU < 0oC
 PERTUMBUHAN DIHAMBAT
 INGAT : BAKTERI PSIKHROFILIK!!
4. PENGERINGAN (DESICCATION)
 BAKTERI TIDAK TUMBUH & TETAP HIDUP
 LYOPHILIZATION  MENGAWETKAN MIKROBA
 INGAT : KONTAMINASI DEBU DI RUMAH SAKIT

5. TEKANAN OSMOSE
 PRINSIP KEMATIAN MIKROBA :
 PLASMOLISIS
 UNTUK : MAKANAN/BUAH-BUAHAN
(FUNGI TETAP TUMBUH)
6. RADIASI
6.1 RADIASI PENGIONISASI ( SINAR X,  )
PRINSIP KEMATIAN MIKROBA:
 IONISASI MOL.AIR  RADIKAL BEBAS
HIDROKSIL  DNA RUSAK
 DAYA PENETRASI TINGGI, ENDOSPORA MATI
 UNTUK :
◦ ALAT FARMASI
◦ ALAT KEDOKTERAN DISPOSABLE
6.2 RADIASI NON PENGIONISASI (SINAR UV)
PRINSIP KEMATIAN SEL :
 IKATAN THYMINE DIMERS PADA RANTAI DNA
 PENETRASI RENDAH
 TOKSIK TERHADAP MATA & KULIT
 UNTUK :
◦ RUANGAN, PERMUKAAN MEJA OPERASI

6.3 SINAR MATAHARI :

 KARENA MENGANDUNG SINAR UV
 TERBENTUK RADIKAL BEBAS OKSIGEN
 UNTUK :
◦ MENGAWETKAN MAKANAN/BUAH-BUAHAN
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
2015
 ANTIMIKROBA  TERMASUK CHEMOTHERAPY

SYARAT ANTIMIKROBA YANG BAIK

 TOKSISITAS SELEKTIF TINGGI
 TIDAK MENIMBULKAN REAKSI HIPERSENSITIF
 KELARUTAN BAIK SEHINGGA PENETRASI KE
JARINGAN TUBUH BAIK
 METABOLISME DAN EKSKRESI LAMBAT
 RESISTENSI LAMBAT
 TIDAK MERUSAK NORMAL FLORA NORMAL
 RELATIF MURAH
 PERBEDAAN STRUKTUR & FUNGSI SEL
ANTARA HOST DENGAN MIKROBA
 DINDING SEL, RIBOSOM, KOMPONEN
MEMBRAN SEL, KEBUTUHAN SEL TERHADAP
NUTRISI TERTENTU :
OBAT ANTIBAKTERI
 TOKSISITAS SELEKTIF TINGGI
OBAT ANTIFUNGI
 TOKSISITAS SELEKTIF RENDAH
OBAT ANTIPROTOZOA
OBAT ANTICACING ---//---
OBAT ANTI VIRUS
 SINTETIK: DIBUAT DI DALAM LAB.
CONTOH : SENY. SULFONAMID,QUINOLON
 ALAMIAH : DARI MIKROORGANISME
CONTOH : ANTIBIOTIKA
 SEMI SINTETIK : MENGGUNAKAN RUMUS
DASAR AM ALAMIAH DAN DIMODIFIKASI
DI LAB, DGN TUJUAN :
 MEMPERBAIKI FARMAKOKINETIK
 MENINGKATKAN AKTIVITAS/MEMPERLUAS SPEKTRUM
 MENINGKATKAN STABILITAS
 MENURUNKAN TOKSISITAS
 --SIDAL (CONTOH : GOL. PENISILIN, IMIDAZOL)
 --STATIKA
(CONTOH:TETRACYCLINE, SULFONAMIDE, GRISEOFULVIN)
 SPEKTRUM SEMPIT :
MEMPENGARUHI SEBAGIAN MIKROBA, BAKTERI GRAM
POSITIF ATAU GRAM NEGATIF SAJA
CONTOH : ERYTHROMYCIN, PENICILLIN G
 SPEKTRUM LUAS :
MEMPENGARUHI BERBAGAI JENIS MIKROBA, BAKTERI
GRAM POSITIF DAN GRAM NEGATIF
CONTOH : AMOXICILLIN, TETRACYCLINE, SULFONAMIDE
PEMAKAIAN LAMA  SUPERINFECTION
1. MENGHAMBAT SINTESIS DINDING
SEL (PEPTIDOGLYCANS)
 PADA SAAT BAKTERI MEMBELAH
PENICILLIN
1. ALAMIAH  DARI Penicillium notatum
◦ DIPECAH OLEH ENZIM PENICILLINASE
◦ RUSAK OLEH ASAM LAMBUNG
◦ SPEKTRUM SEMPIT
◦ CONTOH PENICILLIN-G, PENICILLIN-V
2. SEMI SINTETIK
 TAHAN TERHADAP ASAM:
 PER ORAL : AMPICILLIN, AMOXICILLIN
 TAHAN ENZIM PENICILLINASE: METHICILLIN,
CLOXACILLIN, OXACILLIN
 SPEKTRUM LUAS : AMPICILLIN, AMOXICILLIN
2. MERUSAK MEMBRAN SEL
 MENGIKAT FOSFOLIPID :
 Polimiksin B
BAKTERI GRAM NEGATIF
TOKSIK  PEMAKAIAN TOPIKAL
 MENGIKAT ERGOSTEROL :
◦ AMPHOTERICIN B, NYSTATIN (SENYAWA POLIENE)
◦ SEBAGAI ANTIFUNGI
 MENGHAMBAT PROSES SINTESIS ERGOSTEROL:
◦ KETOCONAZOLE, MICONAZOLE (SENYAWA IMIDAZOLE)
◦ TERBINAFINE (SENYAWA ALKYLAMINE)
 SEBAGAI ANTIFUNGI
3. MENGHAMBAT SINTESIS PROTEIN
PADA PROSES TRANSLASI :

 PADA SUB UNIT 50S RIBOSOME:

CHLORAMPHENICOL:
ERYTHROMYCIN :

 PADA SUB UNIT 30S RIBOSOME:

STREPTOMYCIN
TETRACYLCINE
LINEZOLID
4. MENGHAMBAT SINTESIS ASAM
NUKLEAT
 PADA PROSES TRANSKRIPSI DNA
MENJADI mRNA
RIFAMPIN
 PADA PROSES REPLIKASI DNA
FLUOROQUINOLONE
5. MENGHAMBAT SINTESIS METABOLIT ESENSIAL
SENYAWA SULFONAMIDE

TRIMETHOPRIM, PYRIMETHAMINE
KOMBINASI
SULFONAMIDE +
TRIMETHOPRIM/PYRIMETHAMIN
 EFEK SINERGIS
GOL. PENICILLIN:
 PENICILLIN G, PENICILLIN V:
bakterisidal untuk Gram positif
 AMPICILLIN, AMOXICILLIN (+ CLAVULANIC ACID)
bakterisidal, spektrum luas
 METHICILLIN, OXACILLIN :
bakteri Gram positif penghasil enzim
penicillinase

OXAZOLIDINONES
□ LINEZOLID  Gram positif, MRSA
GOL. AMINOGLIKOSIDA:
 GENTAMYCIN, NETILMICIN, AMIKACIN
bakterisidal, spektrum luas (termasuk
Pseudomonas spp.)
 NEOMYCIN:
bakterisidal, spektrum luas, topikal
GOL. TETRACYCLINE :
□ bakteriostatik
□ TETRACYCLINE, OXYTETRACYCLINE,
DOXYCYCLINE:
spektrum luas termasuk Rikettsia dan
Chlamydia
GOL. MAKROLIDA :
ERYTHROMYCIN, CLARITHROMYCIN:
Bakteriostatik, sebagai alternatif penicillin
CHLORAMPHENICOL :
Bakteriostatik, spektrum luas, pilihan
utama untuk demam tifoid (S.typhi).
NALIDIXIC ACID DAN QUINOLONE :
Bakterisidal, spektrum luas,
NALIDIXIC ACID  antiseptika saluran
kemih

SULFONAMIDE + TRIMETHOPRIM :
Bakteriostatika, spektrum luas.
TUBERKULOSIS
 Perlu kombinasi obat, karena mudah
resisten
 Isoniazid, rifampin, pyrazinamide  tx
awal
 Ethambutol, streptomycin  tx tambahan

LEPRA
 DDS (4,4 – diamino diphenyl sulfone)
 rifampin
AMPHOTERICIN B
ANTIBIOTIKA POLIENE
• SUMBER : Streptomyces nodosus
• UNTUK INFEKSI JAMUR SISTEMIK
• BENTUK LIPOSOME : TOKSISITAS

GOL. AZOLE :
CLOTRIMAZOLE, MICONAZOLE
• UNTUK INFEKSI JAMUR SUPERFICIAL
KETOCONAZOLE, FLUCONAZOLE, ITRACONAZOLE,
• UNTUK INFEKSI JAMUR SISTEMIK & SUBKUTAN,
CANDIDIASIS KUKU
• KURANG TOKSIK DIBANDING AMPHOTERICIN
GRISEOVULFIN:
 SUMBER : PENICILLIUM GRISEOVULVUM
 INFEKSI JAMUR SUPERFISIAL
 MENGHAMBAT SINTESIS DINDING SEL HIFA
 MENGHAMBAT SINTESIS ASAM NUKLEAT

NYSTATIN:
 SUMBER : STREPTOMYCES NOURSEI
 UNTUK INFEKSI JAMUR SUPERFISIAL PADA
KULIT DAN MEMBRAN MUKOSA OLEH
DERMATOPHYTA DAN YEAST
1. GOL. ANALOG NUKLEOTIDA:
 MENGHAMBAT SINTESIS DNA ATAU RNA
ANALOG GUANINE :
 ACYCLOVIR  UNTUK HERPES VI
 RIBAVIRIN  UNTUK ROTA VI (PADA BAYI)
 GANCICLOVIR  UNTUK CYTOMEGALO VI,
HERPES VI
ANALOG THYMIDINE :
 TRIFLURIDINE  UNTUK HERPES MATA YANG
RESISTEN ACYCLOVIR
 AZIDOTHYMIDINE (AZT)  UNTUK HIV
2. ENZIM INHIBITORS:
 NEVIRAPINE :
MENGHAMBAT ENZIM REVERSE
TRANSCRIPTASE PADA HIV

3. INTERFERON:
 MERANGSANG PRODUKSI PROTEIN YANG
MENGHAMBAT SINTESIS RNA, MRNA DAN
MENGUBAH MEMBRAN SEL
 UNTUK VIRUS HEPATITIS B DAN C
 UNTUK VIRUS PENYEBAB CONDYLOMA
ACUMINATUM
 USAHA MIKROBA AGAR TETAP ‘SURVIVE’

MEKANISME TERJADINYA RESISTENSI:

1. PRODUKSI ENZIM YANG MERUSAK OBAT
Mis. Staphylococcus  enz  lactamase
Kuman Gram neg.  Chloramphenicol-
acetyl transferase, fosforilase dll.
2. MERUBAH PERMEABILITAS THD. OBAT
Mis.Resistensi thd. tetracycline, aminoglycosida

3. MERUBAH STRUKTUR TARGET SITE DARI OBAT

Mis. Resistensi thd erythromycin  merubah
reseptor pada 50S sub unit ribosome
Resistensi thd penicillin  perubahan PBP
4. MEMBUAT JALAN METABOLISME BARU
Mis. resistensi thd. sulfonamide 
E. coli tidak mampu memproduksi asam
folat sendiri
5. PRODUKSI BAHAN METABOLIT YANG BERSIFAT
ANTAGONIS KOMPETITIF TERHADAP OBAT
Mis. S. aureus  meningkatkan sintesis
PABA
 Resistensi

Non Resistensi
Genetik
Genetik silang

Natural Diperoleh

Ekstra
Kromosomal
kromosomal

Induksi
Transformasi Transduksi Konjugasi Transposisi
mutasi
USAHA MENGURANGI KEMUNGKINAN
TERJADINYA RESISTENSI
1. MEMPERTAHANKAN OBAT DALAM JARINGAN PADA
KONSENTRASI MENGHAMBAT KUMAN
PENGGUNAAN YANG ADEKUAT BAIK DOSIS OBAT
MAUPUN LAMA PEMBERIAN
2. PEMBERIAN KOMBINASI OBAT YANG TIDAK
MEMBERIKAN RESISTENSI SILANG
MIS. RIFAMPICIN + INH UTK TX TBC
3. MEMBATASI PENGGUNAAN
1. OVERUSE DAN MISUSE DARI ANTIMIKROBA
OLEH PARA DOKTER
2. PENGGUNAAN BEBAS ANTIMIKROBA OLEH
MASYARAKAT UNTUK PENGOBATAN
COMMON COLD
3. PENGGUNAAN ANTIMIKROBA PADA
PENDERITA IMUNOSUPRESI UNTUK
MENCEGAH INFEKSI
4. KEGAGALAN PENDERITA MENYELESAIKAN
REGIMEN PENGOBATAN ANTIMIKROBA
5. PENGGUNAAN YANG LAMA DENGAN
DOSIS RENDAH PADA PENGOBATAN
ACNE.
6. PENGGUNAAN ANTIMIKROBA DI DALAM
BIDANG PETERNAKAN.
7. PERPINDAHAN BAKTERI YANG RESISTEN
KE DALAM AREA LOKASI YANG BARU
 UNTUK MENGETAHUI KEPEKAAN
ANTIBIOTIKA/KEMOTERAPETIKA TERHADAP
BAKTERI

 ADA 2 CARA :
1. DISK DIFFUSION METHOD (difusi cakram)
2. TUBE DILUTION METHOD (dilusi tabung)
METODE DIFUSI CAKRAM
(Kirby Bauer)
 UJI KEPEKAAN ANTIBIOTIKA

Metode Dilusi Tabung