PROF: CARLOS A LUCENA

DESCRIBE LAS
CARACTERÍSTICAS
MICROSCÓPICAS,
ULTRAESTRUCTURALES
Y LAS TÉCNICAS PARA EL
PROCESAMIENTO, OBSERVACIÓN
Y DIAGNÓSTICO HISTOLÓGICO
DE LAS CÉLULAS Y TEJIDOS
BÁSICOS.
1- EXAMEN INMEDIATO O IN
VIVO:

A) OBSERVACIÓN DE CÉLULAS
EN EL ORGANISMO VIVO:
ESPERMATOGRAMA.

B) OBSERVACIÓN DE CÉLULAS
QUE SE MANTIENEN VIVAS
LUEGO DE SER QUITADAS
DEL ORGANISMO

2- EXAMEN MEDIATO O POST-

MORTEN:

REQUIERE DE LA MUERTE
CELULAR Y SUPONE SEGUIR
UNA SERIE DE PASOS, LAS
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
SON LOS DIFERENTES
PROCEDIMIENTOS, QUE SE
USAN PARA MANTENER, EN LO
POSIBLE, EL ASPECTO DE LAS
ESTRUCTURAS HISTOLÓGICAS
DEL ORGANISMO VIVO,
TRANSFORMÁNDOLAS EN
DELGADOS CORTES
COLOREADOS QUE PUEDAN
POSTERIORMENTE SER
OBSERVADOS AL
MICROSCOPIO.
 FIJACIÓN
 DESHIDRATACIÓN
 ACLARAMIENTO
 INFILTRACIÓN E
INCLUSIÓN
 SECCIÓN O
CORTE
 COLORACIÓN
 MONTAJE
EN ESTE PROCEDIMIENTO SE INTRODUCE EL TEJIDO EN
SUSTANCIAS QUE RETARDAN SUS ALTERACIONES Y
CONSERVAN SU CONFIGURACIÓN NORMAL.
FORMALDEHIDO AL 10%.
CONSISTE EN INTRODUCIR EL TEJIDO FIJADO EN
FRASCOS DE ALCOHOL ABSOLUTO A
CONCENTRACIONES ASCENDENTES Y TIEMPOS
DETERMINADOS. PARA ELIMINAR EL AGUA.

70% 80% 95% 100% 100% 100%

30´ 45´ 45´ 60´ 60´ 60´

ESTE PASO SUSTITUYE EL ALCOHOL POR EL XILOL
(VUELVE TRANSPARENTE AL TEJIDO), QUE ES
UN LÍQUIDO MISCIBLE CON LA PARAFINA.

XILOL XILOL

45´ 45´
ES LA FORMACIÓN DEL BLOQUE DE PARAFINA
(MEDIANTE LA INCLUSIÓN DEL TEJIDO EN
ÉSTA) RECIBIENDO EL NOMBRE DE TACO
CONSISTE EN CORTAR EL TEJIDO EN
SECCIONES LO SUFICIENTEMENTE
DELGADAS PARA PERMITIR EL PASO DE LA
LUZ, EL CORTE SE REALIZA CON UN
MICRÓTOMO.
EL CORTE ES LLEVADO A UN RECIPIENTE
BAÑO DE FLOTACIÓN (40º C)
LOS CORTES SE COLOCAN SOBRE UN
PORTAOBJETOS Y LUEGO SE TIÑEN MEDIANTE
COLORACIONES HIDROSOLUBLES QUE
PERMITEN DIFERENCIAR LOS DIVERSOS
COMPONENTES CELULARES.
SE COLOCA EN UNA LAMINA PORTA OBJETO
Y SE LLEVA A LA ESTUFA DURANTE 15 a
20´ A 80ºC
EXTRAER PARAFINA HIDRATAR COLOREAR

5 Veces in/out

5´ 5´ 5´ 5´

15´

2 tubos 100% 100% 100% 70% 70%

70% 100% 100%

UNA VEZ COLOREADA LA LAMINA, SE USA MARTEX

SE COLOCA UN CUBREOBJETO Y EL TEJIDO QUEDA

LISTO PARA OBSERVARLO AL MICROSCOPIO

MARTEX
 LA HEMATOXILINA ES
UN COLORANTE BÁSICO
QUE TIÑE DE COLOR
AZULOSO A LOS
COMPONENTES ÁCIDOS
DE LA CÉLULA.

 LA EOSINA ES UN
COLORANTE ACIDO QUE
TIÑE DE COLOR
ROSADO A LOS
COMPONENTES
BÁSICOS DE LA CÉLULA.

CORTE DE RIÑÓN H-E

Ovario De Gata Hematoxilina - Ganglio Raquídeo Plata
Eosina

Hígado Carmín de
Best
 Raíz de cebolla
Hematoxilina Férrica

Riñón
Hematoxilina-Eosina
 UN MICROSCOPIO ES UN DISPOSITIVO
ENCARGADO DE HACER VISIBLES
OBJETOS MUY PEQUEÑOS.
 ES EL INSTRUMENTO MAS IMPORTANTE
EN LA HISTOLOGÍA , DEBIDO AL TAMAÑO
DE LAS ESTRUCTURAS ANALIZADAS.
 SE CLASIFICA SEGÚN EL TIPO DE FUENTE
LUMINOSA QUE UTILICE.
LA CALIDAD DE LA IMAGEN AL MICROSCOPIO
NO SÓLO DEPENDE DE LA CAPACIDAD DE LA
LENTE PARA AMPLIFICAR
SINO DE SU RESOLUCIÓN QUE ES LA
CAPACIDAD DE LA LENTE PARA MOSTRAR QUE
DOS OBJETOS DISTINTOS ESTAN SEPARADOS
POR UNA DISTANCIA
ÓPTICO
•ÓPTICO SIMPLE
•ÓPTICO
COMPUESTO

ELECTRÓNICO
•ELECTRÓNICO DE
TRANSMISIÓN
•ELECTRÓNICO DE
BARRIDO
ULTRAMICROSCOPIO.
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE
FASE.
MICROSCOPIO DE INTERFERENCIA.
MICROSCOPIO CONFOCAL.
MICROSCOPIO DE POLARIZACIÓN.
MICROSCOPIO DE FUERZA ATÓMICA.
CONSISTE EN UNA
FUENTE
LUMINOSA, UN
CONDENSADOR
QUE ENFOCA LOS
RAYOS DE LUZ
SOBRE LA
MUESTRA, UNA
PLATINA EN LA
CUAL SE COLOCA
LA MUESTRA, UN
OBJETIVO Y UN
OCULAR .
 SISTEMA ÓPTICO

 SISTEMA DE
ILUMINACIÓN

 SISTEMA
MECÁNICO
 OCULAR

OBJETIVOS

CONDENSADOR
FUENTE DE LUZ
LENTE
SITUADA
CERCA DE LA
PREPARACIÓN.
AMPLÍA LA
IMAGEN DE
ÉSTA 4X,
10X,40X,100X.
SE ENCARGA DE
CONCENTRAR EL
HAZ DE LUZ
SOBRE LA
PREPARACIÓN.
CABEZAL

BRAZO
COLUMNA

PLATINA

BASE
 TORNILLO
MACROMÉTRICO

REVOLVER

PLATINA

TORNILLO
MICROMÉTRICO
 TORNILLO
MACROMÉTRICO

TORNILLO
MICROMÉTRICO
USA UN HAZ DE
ELECTRONES,PARA
PRODUCIR LA IMAGEN.
ESTO PERMITE OBTENER
UNA MAYOR
AMPLIFICACIÓN Y
RESOLUCIÓN. LA
IMAGEN PUEDE
PLASMARSE EN UNA
PELÍCULA Y PRODUCIR
MICROGRAFÍAS EN
BLANCO Y NEGRO.
 PROPORCIONA UNA
IMAGEN
TRIDIMENSIONAL DEL
ESPÉCIMEN.
 EL HAZ DE
ELECTRONES NO
ATRAVIESA EL OBJETO,
POR LO QUE NO ES
NECESARIO UTILIZAR
CORTES ULTRA FINOS.
 LA IMAGEN OBTENIDA
ES OBSERVADA EN UNA
PANTALLA DE TV

MICROSCOPIO ÓPTICO
•LAS LENTES ÓPTICAS ENFOCAN UN
HAZ DE FOTONES
•BUENA AMPLIFICACIÓN Y
RESOLUCIÓN
•PARA OBSERVAR LOS TEJIDOS SE
USAN COLORANTES HIDROSOLUBLES
•REQUIERE DE CORTES DELGADOS
•LA IMAGEN QUE SE OBSERVA ES
BIDIMENSIONAL
•LA IMAGEN SE PROYECTA EN EL OJO
A TRAVÉS DE LOS LENTES Y SE
VISUALIZA SEGÚN LOS COLORANTES
UTILIZADOS
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE
TRANSMISIÓN
•LOS ELECTROMAGNETOS ENFOCAN
UN RAYO DE ELECTRONES
•MAYOR AMPLIFICACIÓN Y
RESOLUCIÓN QUE EL M.O
•PARA OBSERVAR LOS TEJIDOS SE
USAN TÉCNICAS DE PRECIPITADOS
DE METALES PESADOS
•REQUIERE DE CORTES
EXTREMADAMENTE DELGADOS
•LA IMAGEN QUE SE OBSERVA ES
BIDIMENSIONAL
•LA IMAGEN SE PROYECTA EN UNA
PANTALLA Y POR MEDIO DE UNA
VENTANA DE OBSERVACIÓN SE VE
LA IMAGEN EN BLANCO Y NEGRO
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE
BARRIDO
•LOS ELECTROMAGNETOS ENFOCAN
UN RAYO DE ELECTRONES
•MAYOR AMPLIFICACIÓN Y
RESOLUCIÓN QUE EL M.O PERO
MENOR QUE EL M.E.T
• SE DEPOSITA EN LA SUPERFICIE DEL
ESPÉCIMEN A OBSERVAR UNA CAPA
DELGADA DE UN METAL PESADO
•NO REQUIERE DE CORTES DELGADOS
•LA IMAGEN QUE SE OBSERVA ES
TRIDIMENSIONAL
• LA IMAGEN SE REPRESENTA
FOTOGRAFIÁNDOLA O
DIGITALIZÁNDOLA EN UNA
COMPUTADORA Y SE OBSERVA A
TRAVÉS DE UNA PANTALLA DE TV.
M.O M.E.T M.E.B
 MICROSCOPIO
MACROSCÓPICO ÓPTICO

MICROSCOPIO
ELECTRÓNICO DE
BARRIDO
 CONOCER LA ESTRUCTURA ,
ORGANIZACIÓN Y FUNCIONAMIENTO
DE CÉLULAS, TEJIDOS, ÓRGANOS, NOS
PERMITIRÁ COMPRENDER EN UN
FÚTURO, EL ORIGEN DE LOS CUADROS
PATOLÓGICOS DE NUESTROS
PACIENTES, LOS QUE SE INICIARAN
CON ALTERACIONES A NIVEL CELULAR.
GRACIAS