Taller de análisis de

artículos científicos
M.C. Jessica Iveth Domínguez Méndez
Alumna de Maestría en Investigación en Salud
 ¿Quién es?
• Acinetobacter baumannii es un
cocobacilo gramnegativo,
aerobio estricto e inmóvil. Su
temperatura óptima de
crecimiento es de 20 °C a 30 °C
• Hasta este momento se han
descrito en torno a 17
genoespecies, entre las que se
incluye A. baumannii, esta
especie es, dentro de su
género, la más
frecuentemente implicada en
infecciones.
¿Qué papel tiene A. baumannii en
las infecciones?
• A. baumannii ha sido implicado en diversos tipos de
infecciones, la mayoría de ellas nosocomiales,
como septicemias, neumonías, infecciones del
tracto urinario, meningitis e incluso endocarditis

• El principal lugar anatómico de colonización e

infección por A. baumannii es el tracto respiratorio.
Se ha demostrado el importante papel que
desarrolla Acinetobacter en las neumonías
nosocomiales, especialmente en pacientes de UCI.
El interés por el A. baumanii
• Como patógeno nosocomial cada vez es mayor; sin
embargo, poco se sabe acerca del reservorio
natural y de su modo de transmisión.

• Algunas cepas pueden sobrevivir en el ambiente

hospitalario durante años debido a su resistencia a
los antibióticos o a la supervivencia en ambientes
secos inanimados, como el equipo médico
reutilizable, almohadas, sábanas y otros
componentes de las camas de los hospitales y
guantes.
Multirresistencia
• Durante los últimos 20 años se ha observado un
aumento de la resistencia en A. baumannii, de
manera• que las infecciones(MDR:
MDR Multidrogorresistente producidas por estos
Multi Drug Resistant,
microorganismos
por sus siglas enresultan muy
inglés) es aquel difíciles
aislado denotratar.
clínico que es
susceptible al menos a 1 fármaco de 3 o más categorías de
• La mayoría presentan resistencia a penicilina,
agentes antimicrobianos.
• XDR con Resistencia extensiva (XDR: Extensively Drug
cefalosporinas de primera y segunda generación, y
Resistant por sus siglas en inglés) es aquel aislado clínico
en muchos casos
susceptible solamentea a cefalosporinas de tercera
1 o dos categorías de agentes
generación, aminoglucósidosantimicrobianos.
y fluoroquinolonas.
• PDR Pandrogorresistente (PDR:Pan Drug Resistant por
sus siglas en inglés) es aquel no susceptible a todas las
categorías de agentes antimicrobianos disponibles.
Mecanismos de resistencia
• Betalactamasas
• Alteración de la permeabilidad celular
• Alteración en proteínas fijadoras de penicilinas
• Mutaciones en el ADN
¿De que técnicas disponemos
para identificar al A. baumanii?
• La tipificación eficaz es de crucial importancia para
caracterizar las cepas de A. baumannii con la
finalidad de diferenciar entre cepas epidémicas y
cepas de aparición esporádica.
• Métodos de tipificaciones fenotípicas
(biotipificación, antibiotipificación) y genotípicas
(perfil de plásmidos, ribotipificación, electroforesis
en campos pulsados y métodos basados en la
técnica de la reacción en cadena de la polimerasa
(PCR)
• Journal of Microbiology, Immunology and Infection (2017) 50, 224e231
• www.sciencedirect.com
 Resumen
Resumen Antecedentes / propósito:
Las bombas de eflujo son uno de los principales mecanismos de resistencia antimicrobiana en el
Acinetobacter baumannii . Este estudio tuvo como objetivo identificar la distribución de diferentes
tipos de genes de bombeo en aislados clínicos de A. baumannii multirresistente (MDRAB) y revelar
la relación entre su presencia y expresión con la resistencia antimicrobiana.

Métodos: se aislaron muestras de MDRAB de cinco hospitales en Taiwán. Diferentes categorías de

genes de bomba, incluyendo• ADEB,
SoloadeJ,
21 aislamientos ?? emra, emrB, y CRAA, eran elegidos, y
MACB, Abem, AbES,
se determinó su presencia• enEn loselaislados
resumen recogidos. Las cepasla de A. baumannii conocidas
no se trasmite
resistentes ATCC 17978 a tigeciclina, imipenem y amikacina también fueron incluido. Las
importancia
expresiones de los genes de bomba de éste
seleccionados estudio utilizando Reacción en cadena
se determinaron
de la polimerasa de transcripción inversa.
• No menciona que estadísticos
utilizó para concluir
Resultados: Se obtuvieron 21 aislamientos clínicos MDRAB de cinco hospitales. Todos los estudios
Los genes de la bomba estaban• La conclusión
presentes en losparece no de MDRAB recolectados, excepto en
aislamientos
un aislado que no tenía la emra como gen. La expresión génica de estas bombas de eflujo fue
contundente
variable entre las cepas. La regulación al alza de los genes ADEB , adeJ y MACB fue responsable de
la resistencia a la tigeciclina. Por otra parte, y el aumento de la expresión de AbES estaba
fuertemente relacionado con la resistencia a la amikacina.

Conclusión: los genes de la bomba de eflujo de salida están presentes en los aislados de MDRAB
clínicos recolectados. La regulación de los genes ADEB , adeJ , MACB y AbES está más relacionada
con la resistencia a los antibióticos.
Introducción
• Acinetobacter baumannii ha evolucionado desde ser un bacterias
comensales en instalaciones de salud para constituir uno de los
microorganismos más importantes responsables de Infecciones
nosocomiales y brotes hospitalarios en las últimos décadas.
• Las razones del éxito de A. baumannii pueden estar relacionadas con el
potencial de este organismo para lograr una reorganización dinámica y
rápida evolución de su genoma. Incluyendo la adquisición y expresión
de genes exógenos de resistencia a antibióticos. Un estudio de vigilancia
global de A. baumannii ha refiere aumentos significativos en la
resistencia antimicrobiana desde 2004 hasta 2009.
• Los aislamientos recogidos de Asia y la costa del Pacífico en un estudio
anterior demostró Incrementos en la resistencia para todos los
antimicrobianos, que van desde un aumento del 19,1% en la resistencia
a la ceftazidima y 38,9% a la levofloxacina.
• En otra colección mundial entre 2005 y 2009 la resistencia al imipenem
(IPM). alcanzó tasas de resistencia> 50%.
Principales mecanismos de
resistencia de A. Baumanii
• B- lactamasas
• Enzimas modificadoras de aminoglucósidos
• Defectos de bombas de salida de múltiples
fármacos
• Alteración de sitios de destino
Bombas de eflujo
Cada bomba de eflujo consta de tres componentes:
• El transportador de membrana interior
• El canal de membrana exterior
• La lipoproteína periplásmica.

Las bombas de salida de múltiples fármacos

son generalmente codificadas en
cromosomas, y sus expresiones
frecuentemente resultan de mutaciones en
genes reguladores.
Categorías de bombas de eflujo
• Resistencia Familiar (RND),
• Facilitador principal Superfamilia (MFS)
• Extrusión de múltiples fármacos y compuestos
tóxicos (MATE)
RND y MFS han sido las más estudiadas - AdeABC, está asociada con
• Familiaresistencia
de a los aminoglucósidos,
transportistas AdeFGH y con resistencia
AdeIJK también está a
involucrado en el nivel de susceptibilidad a muchos otros antibióticos,
múltiples fármacos
incluyendo (SMR)
tigeciclina (TGC). Mediando la resistencia a diferentes tipos
de antibióticos se incluye TetA, CmlA, CraA, y AmvA,.
SMR - AbeS, exhibe eritromicina y resistencia al cloranfenicol
MATE - AbeM, confiere resistencia a fluoroquinolonas e IPM.
Objetivo
• Estudio destinado a entender la distribución de
diferentes tipos de genes de bomba en aislados
clínicos de A. baumannii y revelar la relación entre
su presencia y expresión con resistencia
antimicrobiana.
• Y proporcionar una base para el desarrollo de
nuevos objetivos para futuras terapias.
Método:
• Recogida de muestras e identificación de cepas. Los aislamientos de
MDRAB se recolectaron de cinco hospitales en Taiwán. Cada aislado fue
muestreado de un paciente diferente y clasificado como género
Acinetobacter utilizando el sistema Vitek (Biomerieux Vitek, Inc.,
Hazelwood, MO, EE. UU.). A. baumannii se identificó además por
reacción en cadena de polimerasa (PCR).
• Se determinaron las susceptibilidades a los agentes antimicrobianos.
utilizando el método de microdilución Los agentes probados incluyeron
ampicilina / sulbactam (SAM), piperacilina / tazobactam, cefazolina,
cefmetazol, cefotaxima, ceftazidima, cefepima (FEP), IPM, meropenem
(MEM), AMK, gentamicina, ciprofloxacina, levofloxacina, trimetoprim /
sulfametoxazol y TGC
• El ADN plasmídico se preparó con el ADN plásmido FavorPrep
• La amplificación por PCR se realizó en un Termociclador térmico Thermo
Hybaid PXE 0.2 HBPX02 (Thermo Scientific, Redwood, CA, EE. UU.)
Análisis estadístico
• La diferencia de susceptibilidad fue analizada
utilizando t de Student .
• Las diferencias entre dos grupos de aislamientos
fueron considerado significativo a p <0.05. Entrada
de datos y análisis. se realizaron utilizando SPSS
versión 15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, EE. UU.).
Resultados
Resultados
Conclusión
• Actualmente, poco se sabe sobre la epidemiología de
varias bombas de eflujo en A. baumannii, la presencia
de otros genes de bomba no han Ha sido explorado
todavía.
• La alta tasa de prevalencia de la diferentes genes de la
bomba de eflujo en los aislados clínicos de MDRAB en
el presente estudio sugirió que MDRAB puede ser
equipado con más maquinaria para adaptarse a su
entorno y sobrevivir.
• El número de aislamientos clínicos en este estudio es
limitada, que puede no ser representativa de los
aislamientos clínicos de la población general. Por lo
tanto, es necesario un estudio a escala para verificar
nuestra hipótesis en el futuro.