CADENA RESPIRATORIA y OX-FOX

CO2 (g)
O2 (g)

H2O
Respiración celular
aeróbica
UPAO-BIOCA 2019
DOCENTE: Blga. Dra. MARTHA KARINA LEZAMA
ESCOBEDO

Combustibles Energía REALIZADO POR: Mblgo. Dr. Enrique Martin Alva

C.B.P. : 3582 R.N.B.E : 0090
DOCTOR EN CIENCIAS BIOLOGICAS
(azúcares, grasas, proteínas) celular
OBJETIVO ESPECÍFICO
características de CTE y
CONTENIDO
OXFOX

características de CTE y 1. Características generales de la cadena respiratoria.

OXFOX 2. Organización y función de los componentes de la cadena
respiratoria.
3. Acoplamiento entre la cadena respiratoria y la fosforilación
oxidativa.
4. Energética de la fosforilación oxidativa. Relación P/O.
5. Inhibición de la cadena respiratoria, sitios de inhibición y
ejemplos de inhibidores.
6. Inhibición de la fosforilación oxidativa, sitios de inhibición y
ejemplos de inhibidores.
7. Mecanismo de acción de los desacopladores de la cadena
2 horas respiratoria con la fosforilación oxidativa. Ejemplos.
 MEMBRANA EXTERNA Libremente
permeable Molc. Pequeñas y iones
EIM:químicamente equivalente al citosol.
MEMBRANA INTERNA Enzimas metabolis lípidos.
Impermeable Molc. Cardiolipina
Pequeñas,
iones(H+). Contiene :
Complejos I-IV, Permeable Moleculas neutras :
Translocasas(ADP-ATP, O2, H2O, y CO2
ATPsintasa (F0F1)

MATRIZ
Contiene :
Complejos PDH, Ezm
CK,βoxidación, Oxi AA
,DNA,ribosomas,Intermed
iarios Metabolicos
solubles
ADN mitocondrial, ribosomas mitocondriales ARNt, y
Canales de Porina
enzimas para la expresión de los genes mitocondriales.
Cadena Respiratoria mitocondrial
Entrada de electrones desde la glicolisis, oxidación del
piruvato, y CAC, a la Cadena respiratoria.

Es la fuente principal de energía para la

síntesis de ATP en los animales y otros
organismos eucariontes
 1.- Características de la Cadena Respiratoria(CR)
 (4) complejos enzimáticos unidos dentro de la
MMI, además de Ubiquinona y Citocromo c
¿Que hace?
Cadena Transportadora de Electrones(CTE)
redox transfieren electrones. ¿A QUIEN ?
 CADENA RESPIRATORIA (CR) Aceptor final
O2, es decir el sistema consume oxígeno.
¿Para que ?
REOXIDA las coenzimas reducidas NADH y
FADH2. ¿Para que ?
 NAD+ y FAD para el Metabolismo(CK). ¿Para
que ?
Las Rxs de Oxidorreducción liberan energía
para producir ATP
 2 puntos de entrada a la CTE:
– coenzima NADH (el complejo I) y
– coenzima FADH2 (la CoQ)
 se ordenan según el valor de sus
potenciales de reducción ,extremo izquierdo
( - 0,32 V), y el mas + a la derecha (+0,82 V)
,(O2).
– Por tanto los electrones pasan a través de
los 4 complejos desde los potenciales de
reducción estándar mas bajos hacia los
mas altos.
 Contienen proteínas especiales :
1. FLAVOPROTEÍNAS
2. PROTEÍNAS FE-S
3. CITOCROMOS .
2.-Organización y función de los
componentes de la CTE
 MME

isopreno
Espacio Q , CoQ10
intermembrana Cit c
e¯
e¯
e¯ I III IV
MMI Q
e¯ II
NADH NAD+
FADH2 FAD
1. FMN H2O
2. Centros Fe-S 1. FAD +
2. Centros Fe-S 1. Hemo b ½ O2 2H+
Matriz 3. Hemo
mitocondrial 4. Centros Fe-S
1. Hemo a
MAOS
2. Hemo a3
3. CuA , Cu
B
 Complejos enzimáticos de la CR
No total
Complejo Enzimático Grupos prostéticos de Subunidades

1. FMN
( Complejo I)
2. Centros Fe-S 43
NADH deshidrogenasa
o NADH-CoQ oxidorreductasa

( Complejo II ) 1. FAD 4
Succinato deshidrogenasa 2. Centros Fe-S

( Complejo III) 1. Hemo cb

1
Ubiquinona- Citocromo c oxidorreductasa. 3. Hemo 11
4. Centros Fe-S

( Complejo IV) 1. Hemo a

Citocromo oxidasa 2. Hemo a3 8
3. CuA , CuB

CoQ y el Cit c NO FORMAN Complejos enzimáticos

 3.- Organización básica y secuencia de los e- en la CTE
SUCCINATO
 Los componentes de la CR se ordenan según
DESHIDROGENASA
el valor de su E’o
FADH2 (fp)

e- CITOCROMO
NADH CITOCROMO C
DESHIDROGENASA OXIDORREDUCTASA
OXIDASA
e- e- e- e- e- e-
FMN (fp) Q cit b cit c1 cit c cit aa3 O2
CI C IV
C III
e-
E’o = - 0,32 V E’o = -+0,82 V
e- significa electrones
NADH fp = flavoproteína

La CTE esta formada por 4 complejos enzimáticos ( los cuales funcionan como transportadores de electrones y, 3
de ellos funcionan como bombas de protones.
Estos complejos están conectados mediante dos transportadores móviles de electrones, estos son la Q y el
Citocromo c.
 Complejo I, NADH deshidrogenasa:

Cataliza simultáneamente dos procesos acoplados:

1. La transferencia exergónica de 2e- y 1H+ (un ion
hidruro) del NADH y 1 H+ (un protón) de la matriz,
hasta la Ubiquinona (Q).
los 2 electrones fluyen desde el NADH al FMN y luego a
FeS que puede aceptar los electrones , pero uno cada vez,
y de aquí hasta la Q (Ubiquinona).
H+(HIDRURO) + H+(MATRIZ)
2. Ocurre la transferencia endergónica de 4 protones de la
matriz hacia el EIM. Por tanto , el complejo I es una bomba
de protones impulsada por la energía de la transferencia de
los 2 electrones.
 Complejo II, o Succinato deshidrogenasa:

1. La Succinato deshidrogenasa, que comprende el Complejo II de la

CR, es la enzima que oxida una molécula de Succinato a Fumarato en el
Ciclo del Ácido Cítrico, y se encuentra unida a la membrana interna
mitocondrial.

2. Los 2 electrones liberados en la conversión de Succinato a Fumarato

se transfieren primero al FAD, luego a FeS, y finalmente a la CoQ,
formando CoQH2 .

3. Aunque el G’°, para esta reacción es negativa, la energía liberada NO

es suficiente para el bombeo de protones. Por lo tanto NO hay
translocación de los protones a través de la membrana por el Complejo II.
Además de la Succinato deshidrogenasa, otras deshidrogenasas
mitocondriales dependiente de FAD, pasan electrones y protones a la
Ubiquinona , pero No a través del Complejo II.
Glicerol 3-P  Acil-CoA deshidrogenasa FADH2
(1ª.enzima de la -oxidación
de los Ácidos grasos)
 Glicerol 3-fosfato -matriz- EFT- FAD
deshidrogenasa
Cext-MMI  EFT: Ubiquinona Oxidorreductasa
( lanzadera para (FADH2) Cint-MMI
reoxidar el NADH FADH2
citosólico)
Q QH2
EFT = Flavoproteína FADH2
Transferidora de Electrones
Cext = cara externa de la MMI Succinato deshidrogenasa
Cint = cara interna de la MMI (Complejo II)
(ciclo del ácido cítrico)
 Complejo III, Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa:

1. QH2 dona 2 e- al Complejo III. Dentro de este complejo los

electrones se transfieren a una proteína FeS , de aquí a 2
Citocromos tipo b, y luego son transferidos al Citocromo
c1.

2. Por último, los 2 electrones se transfieren desde

el
Citocromo c1 a dos moléculas de la forma oxidada del
Citocromo c, formando Citocromo c reducido .

3. La vía de los electrones por este tramo de la CR es complejo. Pero el

efecto neto es simple: 1 QH2 se oxida a Q, y a la vez 2 Cit c se reducen.

El G’° para esta reacción es lo suficientemente negativo para que 4

protones sean translocados desde la matriz mitocondrial a través de la
membrana interna para cada par de electrones transferidos.
 Complejo IV, Citocromo oxidasa:

1. Este Complejo IV transporta electrones desde el Citocromo c al

Oxígeno molecular, reduciéndolo a H2O.

2. En este Complejo se trasporta 1 único electrón a la vez.

3. La transferencia de electrones a través del complejo IV , es como

sigue:
 primero los electrones pasan del Cit c a un par de iones de cobre
(CuA), a continuación, al Citocromo a, luego a un centro Citocromo
a3-CuB, y finalmente a O2, el último aceptor de electrones de la CR.

 Por cada 2 electrones que pasan por el complejo, este utiliza 2 H+

como sustrato y produce1 molécula de agua (H2O).

4. También utiliza la energía de esta reacción redox para bombear 1H+ por
cada electrón que pasa.
5. La transferencia de cada electrón debe ocurrir sin la liberación de
especies reactivas dañinas para la célula.
La reacción final en la cadena respiratoria, la reducción de O2 a H2O tiene un
potencial de reducción estándar (E’o) de + 0,816 V, el más positivo en toda la cadena
respiratoria, y por lo tanto esta reacción , también tiende a ocurrir hacia la derecha.

E’o

½ O2 + 2H+ + 2e- H 2O + 0,816 V

“ 2 protones son tomados de la matriz y 2 electrones que son cedidos por el Cit a3,
se unen a un átomo de oxigeno para reducirlo hasta agua”.

Como se discutió anteriormente, el oxígeno molecular es un aceptor terminal de electrones

ideal, debido a su alta afinidad por los electrones, proporciona una gran fuerza impulsora
termodinámica.
 ¿Se libera energía en la Cadena respiratoria?

¿Cuánta energía se libera?

¿Cómo se conserva de forma eficiente esta energía?

¿En que se utiliza esta energía liberada?

E’o (V) Cadena respiratoria: flujo de los electrones y potencial de reducción estándar de componentes móviles (en rojo), y cantidad de
energía liberada en cada complejo.
- 0,4
NADH NAD+ + H+ (- 0,320 V)
2e-
Complejo I
- 0,2 E’o = 0,360 V
G´o = - 69,5 kJ/mol
(+0,031V)
Succinato FADH2 Complejo Q (+0,045 V)
0
II

fumarato Complejo III

E’o = 0,190 V
G´o = - 36,7 kJ/mol
+ 0,4
Citocromo c (+ 0,235 V)

+ 0,6 Complejo IV
E’o = 0,580 V
G´o = - 112 kJ/mol
2e-
+ 0,8 ½ O2 + 2H+ H2O
Fuente de los datos
Texto bioquímica de Voet
(+ 0,816 V)
  El flujo de electrones desde el NADH al O2 es un proceso
exergónico que libera la cantidad de 220 kJ/mol (52 Kcal/mol)

NAD+/ NADH……. E’o = - 0,320 V

O2 / H2O………….. E’o = + 0,816 V

REACCIÓN DE OXIDORREDUCCIÓN NETA de la Cadena Respiratoria:

NADH + H+ + ½ O2 NAD+ + H2O

G’o = - n F E’o
G’o = - 2 (96,5 kJ / V. mol) (1,14 V)
G’o = - 220 kJ/mol (de NADH)

“ Esta energía producto de la transferencia de electrones se conserva eficientemente en un

Gradiente de Protones”.
 El flujo de electrones desde el FADH2 (de la oxidación del
succinato a fumarato) al O2 es un proceso exergónico que
libera la cantidad de 150 kJ/mol

Fumarato / Succinato…. = + 0,031 V

O2 / H2O………….. = + 0,816 V

G’o = - n F E’o
G’o = - 2 (96,5 kJ/V. mol) ( 0,847 V)
G’o = - 150 kJ/mol

Esta energía producto de la transferencia de electrones se conserva

eficientemente en un Gradiente de protones.
 E’o (V) Cadena respiratoria: flujo de los electrones y potencial de reducción estándar de componentes móviles
(en rojo), y cantidad de energía liberada en cada complejo.
1.- Electrones pasan x - 0,4
NADH NAD+ + H+ (- 0,320 V)
3 Complejos afinidad >
Complejo I ADP+Pi
e- (E’o aumento) no
- 0,2 E’o = 0,360 V
directo al O2 G´o = - 69,5 kJ/mol ATP
(+0,031V)
Succinato FADH2 Complejo Q (+0,045 V)
2.- G´o total se divida 0
II

en 3 paquetes, cada fumarato Complejo III ADP+Pi

uno de los cuales se E’o = 0,190 V
G´o = - 36,7 kJ/mol ATP
+ 0,4
3.- ACOPLA con la Citocromo c (+ 0,235 V)

síntesis de ATP en un
proceso llamado + 0,6 Complejo IV ADP+Pi
E’o = 0,580 V
Fosforilación G´o = - 112 kJ/mol ATP
2e-
oxidativa. + 0,8 ½ O2 + 2H+ H2O
MAOS-
(+ 0,816 V)
 INHIBIDORES DEL FLUJO DE ELECTRONES HASTA EL OXÍGENO
Inhibidores: Bloquea Cit b Inhibidores:
Inhiben la transferencia y el Cit c1  Cianuro (CN-)
Rotenona
de e- y, e interrumpen la Piericidina A Inhibidor:  N-3 : Azida
fosforilación oxidativa. Amital Antimicina A  (CO)
se unen al Fe+3 de la
Pueden producir Amobarbital  H2S Citc oxidasa , evita que
rápidamente la muerte el O2 pueda unirse a la
Citoc oxidasa .

CI Q CIII c CIV
CII ½ O2 + 2H+
MME H2O
ADP + Pi
Inhibicion ATP
competitiva:
malato, ácido Espacio intermembrana
oxálico y glutarato

Inhibicion No competitiva:
MMI N-etilamida, cloruro de mercurio, EDTA citosol
 Formación de especies reactivas de oxígeno (radicales libres) durante
MME
la reacción del complejo enzimático Citocromo oxidasa

Espacio intermembrana
4 H+ 4 H+ 2 H+
e¯ Cit c

e¯
e¯ I III IV
MMI Q
2e¯
NAD+ Matriz
NADH

Generación de especies ½ O2 + 2H+ H2O

reactivas de oxígeno por la
cadena de transporte electrónico
mitocondrial.

Daño a
macromoleculas
 DNA mitocondrial codifica para:
Complejo Enzimático No. total No. de Subunidades
de Subunidades Codificadas por el ADN
mitocondrial
( Complejo I) 43 7
NADH deshidrogenasa
o NADH-CoQ oxidorreductasa
( Complejo II ) 4 0
Succinato deshidrogenasa
o Succinato-CoQ
oxidorreductasa
( Complejo III) 11 1
Ubiquinona-citocromo c
oxidorreductasa.
Citocromo c 13 3
( Complejo IV)
Citocromo oxidasa 8 2

mitocondrias fuente más importante de ROS es obvio que el DNA mit es más expuesto
que el DNA nuclear a lesiones oxidativas severas que conducen a mutaciones y
supresiones en su propia cadena
 Fosforilación Oxidativa
Proceso por el cual el NADH y FADH2 producidos por la oxidación de nutrientes
SE OXIDAN y simultáneamente ocurre la SÍNTESIS de ATP .

ATP sintasa ATP + H2O

ADP + Pi
G’o = + 30,5 kJ/mol
G’o = - 220 kJ/mol (de NADH)
La energía libre requerida para sintetizar 1mol de ATP a partir de ADP + Pi
es de 30,5kJ (*), en condiciones bioquímicas estándares.
Si la G’o de oxidación del NADH al O2, esta acoplada a la síntesis de ATP, por
lo tanto suficiente para conducir la formación de varios moles de ATP.

(*) en condiciones intracelulares reales es de 50kJ/mol)

Teoria Quimiosmotica : Acoplamiento energético del transporte de
Dr. Peter Mitchell (1961) electrones a la Síntesis de ATP:
reacción química y un proceso de transporte
1. La G’o de transferencia de e-, se utiliza para un bombeo de Protones ( H+ ) desde la matriz hacia el EIM.

2. Este movimiento de protones genera:

 un Gradiente de concentración de protones ΔpH (es decir, una diferencia de pH) a través de la MMI.
 Un Gradiente de carga electrica Δ (es decir, una diferencia de cargas) a través de la MMI.
 Siendo positivo (+) el lado externo de la MMI y negativo (-) el lado interno.

3. Juntos estos dos gradientes (de concentración de H+ y de cargas)ALMACENAN la energía libre

resultante de la transferencia de electrones, y es llamada fuerza protón motriz.

4. El regreso de los protones hacia la matriz a través de Complejo de la ATP sintasa , esta ACOPLADO a
la Síntesis de ATP. Proporcionando este flujo, la energía necesaria para unir un Pi al ADP .

5. La membrana interna mitocondrial es impermeable a los Iones H+ . De otro modo se disiparía el

gradiente de concentración de protones.

¿ Como se acopla la energía libre de la transferencia

de protones a la síntesis de ATP?
 Este gradiente electroquímico(FMP) REQUIERE :
1. Que la MMI se mantenga intacta y no permeable con agentes físicos o químicos.
2. Que la transferencia de e- sea continua, (sustratos DISPONIBLES NADH, el FADH2 y O2

Es una ATPasa de tipo F . Factor de acoplamiento de energía.

 El EIM esEs
Mas
un ácido
complejo enzimático de la membrana interna mitocondrial
ΔpH) Alta [ H+ ]
que cataliza la síntesis de ATP a partir de ADP y Pi,
acompañado por el flujo de protones desde el EIM a la matriz.
 El EIM es Mas positivo
(Δ)
Esta compuesta por 2 componentes funcionales Fo y F1.

Fo : Es una proteína integral ubicada en la MMI, que forma un

poro (canal) transmembrana para protones. La letra del
subíndice “o” indica su inhibición por la OLIGOMICINA .

F1 : Es una proteína
 Masperiférica
alcalinade membrana, que mira hacia el
interior de la matriz,
( el pH escontiene
0,75 < queelel sitio
EIM) catalítico para la síntesis
ATP
de ATP . El subíndice 1 indica que fue el primer factor identificado SINTASA
como necesario para la fosforilación oxidativa.
 SISTEMA DE TRANSPORTE de la (MMI)
Translocasas( transportan ADP , ATP , y Fosfato inorgánico
Espacio
4 Prot/1 ATP
intermembrana
Matriz (1 se gasta en
transportar Pi y
Inhibidor Transporte
ATP ATP ADP).
ANT
Atractilósido y el ADP P/O NADH 2,5
Ácido bongkrékico
ADP
(10/4) y 1,5 (6/4)
Succinato.
Gradiente de ATP
concentración
de protones
H+ sintasa H+
H2PO-4 H2PO-4
Inhibidor OxFox H+
Oligomicina
FT H+

ANT = Adenina-Nucleótido Translocasa FT = Fosfato Translocasa

H2PO-4 = Fosfato inorgánico = Pi MAOS
 eficiencia termodinámica de la fosforilación oxidativa es 3 x 30,5 kJ/mol x
100/220 kJ/mol = 42% bajo condiciones bioquímicas estándares.

Si se usa 42 % de energía de la oxidación del NADH o FADH2 para síntesis de ATP,

¿Qué sucede con el resto de la energía?
Parte de esta energía se pierde en forma de calor.
Por consiguiente la CTE es nuestra principal fuente de calor

LA ENERGÍA SE GASTA EN :
1) Bombeo de protones desde la matriz a EIM
2) La Síntesis de ATP.
3) Transporte Piruvato,ADP y Pi desde EIM a la matriz
4) El transporte de ATP desde la matriz hacia el EIM.
Regulación de la fosforilación oxidativa
UN AUMENTO EN LA UTILIZACIÓN DE ATP POR LA CÉLULA
ESTADO ENERGETICO

PRODUCE UN AUMENTO DE LA CONCENTRACIÓN DE ADP

AUMENTA LA FOSFORILACIÓN DEL ADP POR LA ATP SINTASA

AUMENTA EL FLUJO DE PROTONES DE REGRESO A LA MATRIZ

AUMENTA EL FLUJO DE ELECTRONES, Y EL BOMBEO DE PROTONES

HACIA EL EIM

Y POR TANTO AUMENTA EL CONSUMO DE OXIGENO

TASA RESPIRATORIA
 INHIBIDORES DE LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

Oligomicina antibiótico (hongo )se une F0 impidiendo movimiento de

protones hacia la matriz.
Bloquea completamente la oxidación y la fosforilación en las
mitocondrias Intactas.
INHIBIDORESTRANSPORTE DE NUCLEÓTIDOS DE ADENINA EN LA MMI

1. Atractilósido : glucósido vegetal

2. Ácido bongkrekico: antibiótico producido

por un hongo.
DESACOPLAMIENTO DE LA FOSFORILACION OXIDATIVA
(NO FISIOLOGICO)
Desconectan fosforilación oxidativa de la transferencia de e-
Puede funcionar la cadena respiratoria sin tener lugar la síntesis de ATP , por
tanto la ENERGIA se pierde en forma de calor.
VELOCIDAD DE LA
CADENA RESPIRATORIA
DESACOPLANTE (OXIDACIÓN)

FOSFORILACIÓN DE ADP

 2,4 - dinitrofenol (DNP)

 Carbonil-cianuro-p-trifluorometoxifenilhidrazona (FCCP)
 Dicumarol
Ambos son ionóforos, ácidos liposolubles débiles que se unen a los H+ en el EIM,
difunden a través de la membrana, y los liberan en la matriz.
 Efectos fisiológicos de los Desacoplamiento fisiológico entre CTE y FO

desacopladores :
Termogénesis adaptativa

1. Tasa metabólica,  Respuesta al frio

2. el Consumo de O2  Periodos de Hibernación

3. Producción de calor (fiebre).

 Ingestión de alimentos

4. Causa Perdida de Peso Lugar : exclusivamente en tejido

adiposo marrón
“Estos dan por resultado una respiración
no controlada, La concentración de ADP ya no
limita la velocidad de la respiración”

La TERMOGENINA Proteína desacopladora 1 (UCP-1) ubicada en la MMI del adipocito marrón ,

forma una canal por donde los protones son conducidos de regreso a la matriz , sin pasar a través
de la ATP sintasa, desacoplando la CTE de la Fosforilación Oxidativa, esto permite la oxidación
continua de combustible, sin síntesis de ATP , y disipando la energía en forma de CALOR.
 Mecanismo de termogénesis
Mitocondria desacoplada en el tejido adiposo marrón
1
Noradrenalina FRIO Adipocito
TAG
marrón
2
+ Ácidos Grasos Libres
(AGL) 3
CALOR

H+ UCP1
H+
H+
Desacoplamiento
+ (canal de protones)
Acoplamiento ADP+Pi 5
(Fosforilación Oxidativa)
Disminuye ATP FADH2 AGL
NADH -Oxidación
Esta vía H+ 4
matriz
CTE
H+
H+
H+ MMI
H+