ARN: ESTRUCTURA Y

FUNCIÓN
 El ARN es el producto de la transcripción:
polinucleótido con enlaces fosfodiéster y con
respecto a sus bn, en lugar de T se presenta U.
 Puede presentar plegamientos que se mantienen por
puentes de H: A = U y G ≡ C.
 ARN ribosomal
 Constituye el 65% del ribosoma, el resto son
proteínas. Contiene dos subunidades: en
eucariota 80 S (60 S y 40 S), en procariota 70
S (50 S y 30 S)
 Formas: 23 S, 16 S y 5 S en procariota; 28 S,
18 S y 5 S en eucariota.
ARN de transferencia (ARNt)
 Molécula pequeña (75 a 100 nucleótidos).
 Adopta el aspecto de una hoja de trébol.
 Posee bn modificadas: seudouridina (Ѱ),
ribotimidina (T), dihidrouridina (D), I (inosina).
 En el extremo 3’ se localiza la secuencia
CCA, donde se une el aa.
 Transporta el aminoácido al ribosoma.
 Presenta tres bucles:
* TѰC, lugar de reconocimiento del ribosoma
* D , reconoce al aminoacil-ARNt sintetasa.
* Anticodón, que complementa con el codón
del ARNm.
ARN MENSAJERO (ARNm)
 Contiene solamente las cuatro bn principales.
 La secuencia de bn es complementaria a la
cadena del ADN que está siendo transcrita.
 Contiene el código genético (tripletes o codones).
 Cada triplete es el código de un aa.
 Actúa como matriz en el ribosoma para la síntesis
de proteínas.
 ARN REGULADORES
 miRNA (micro ARN): cadena simple (19-25
nucleótidos), codificados de intrones de genes.
Forman con proteínas complejos de
silenciamiento inducido (RISC) que inhiben la
traducción o degradan el ARNm. Su acción está
relacionados con algunos procesos malignos de
origen hematológicos.
 siRNA (pequeño ARN de transferencia): ARN
bicatenario(20-25 nucleótidos) se une a su ARNm
diana interfiriendo con la expresión del gen,
también interviene como defensa antiviral. Se
origina por actividad de la RNAsa III Dicer .
 piRNA: pequeño ARN asociado a un tipo de
proteina Argonauta llamada Piwi. Forman
complejos RISC que reprimen la traducción. Se
cree que defienden contra los transposones y
que juegan algún papel en la gametogénesis.
TRANSCRIPCIÓN EN
PROCARIOTA

 Requisitos:
* Molde: una de las cadenas del ADN.
* Nucleótidos: ATP. GTP, CTP, UTP.
* Cofactores: Mg⁺⁺, Mn⁺⁺.
* Enzima: ARN polimerasa, con las subunidades 2 α,
β, βʹ, σ
* La subunidad σ reconoce la señal para el inicio
de la transcripción, luego se libera
INICIO DE LA
TRANSCRIPCIÓN
 El promotor procariótico presenta la secuencia
TATATAAG (caja TATA) situada unos 10 nucleótidos
antes del inicio de la transcripción.
 La enzima también reconoce una región del ADN
situado a 25 o 35 bases por detrás del inicio.
ELONGACIÓN y
TERMINACIÓN
 La velocidad de síntesis es de aproximadamente
30 bn/seg.
 La dirección de síntesis es 5ʹ → 3ʹ
 La terminación es cuando la enzima llega a la
señal de detención reconocida por el factor Rho.
 El factor Rho es una enzima que cataliza el
desenrrollamiento del ADN-ARN, impulsado por la
hidrólisis del ATP
 También hay una terminación independiente de
Rho: secuencia de ADN rica en GC, por lo tanto
una región de ARN rica en GC que forma una
horquilla que obliga a la separación del ADN.
TRANSCRIPCIÓN
EUCARIOTES
 Hay tres tipos de ARN polimerasa
 ARN polimerasa I : en nucléolo. Sintetiza ARNr 18 S y 28 S
 ARN polimerasa II : en nucleoplasma. Sintetiza ARNm.
 ARN polimerasa III: en nucleoplasma. Sintetiza ARNt, ARNr 5S,
pequeños ARN nucleares y citosólicos.
 Son enzimas complejas, contiene 12 subunidades pequeñas.
 Los promotores de la ARN polimerasa II presenta la caja TATA
o Hognes en posición
-25, -30.
Hay promotores en posición -80: caja CAAT y GC en -50 y -100.
CONTROL DE LA
TRANSCRIPCIÓN EN
PROCARIOTA.
 Inducción: Se induce la síntesis de proteínas
adecuadas , lo que ocurre solo en minutos
porque hay acoplamiento entre transcripción y
traducción.
 Represión catabólica: la presencia de glucosa
reprime la síntesis de proteínas que catabolizan
otros compuestos como la lactosa, galactosa,
arabinosa (operón).
CONTROL DE LA
TRANSCRIPCIÓN EN
EUCARIOTES
 Relación con la etapa del ciclo celular y la
diferenciación celular.
 Se tienen en cuenta por ejemplo a los factores de
crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF),
epidérmico (EGF), transformante (TGFB).
 Dichos factores forman un complejo
multiproteico capaz de iniciar la síntesis de ARN
en lugares adecuados.
INHIBIDORES DE LA
TRANSCRIPCIÓN
 Rifamicinas. Actua sobre la ARN polimerasa en la
subunidad β. Inhibe la elongación, no el inicio ni
el reconocimiento.
 Estreptomicina. Actúa sobre la subunidad 30 S
(proteina 12 S).
 α amamitina. Inhibe la ARN polimerasa de
eucariote.
 Actinomicina D y bromuro de etidio, se intercalan
en ADN, evitando el alargamiento.
De igual forma la cromomicina, daunomicina y
antramicina.
PROCESO
POSTTRANSCRIPCIÓN
 El ARN sintetizado es modificado posteriormente
comprendiendo la eliminación de nucleótidos,
modificación de las bases y separación de
diferentes secuencia de ARN por acción de
nucleasas.
 Finalmente el ARN en eucariote debe ser
exportado del núcleo al citoplasma.
MODIFICACIONES DEL
ARNt
 El transcrito primario es recortado por la ARNasa y
se adiciona la secuencia CCA en 3ʹ.
 Por último se elimina el intrón.
 Hay modificaciones de nucleótidos , metilaciones
simples o derivados como la seudouridina (Ѱ),
ribotimidina (T), inosina (I), dihidrouridina (D),
metilguanina (meG)
MODIFICACIÓN DEL ARNr
 El transcrito es un ARN 45 S y que contiene
secuencia de ARN 28 S, 5,8 S y 18 S.
 La maduración se realiza en el nucléolo.
 Se requiere los complejos pequeños de
ribonucleoproteína nucleololar (snoRNP)
MODIFICACIÓN DEL
ARNm
 El transcrito en ARN hn. Se eliminan los intrones: el pre ARNm
se une la ribonucleoproteína nucleares pequeñas o snRNPs
(small nuclear ribonucleoprotein) que se encargan del
empalme (splicing) del ARN: corte del intrón en el sitio dador
5ʹ y empalme de la secuencia del lado 5ʹ y 3ʹ del exón.
 Los intrones tienen la secuencia GU en inicio y AG en el final.
BIOSÍNTESIS DE PROTEÍNAS
 Se realiza en los ribosomas. Cada ribosoma está
formado de 2 subunidades que contienen ARNr.
 En procariote: 70S (50 S, ARN 23 S y 5 S; 30 S, ARN 16
S)
 En eucariote: 80 S (60 S, ARN 28 S, 5,8 S, 5 S; 40 S,
ARN 18 S)
 En mitocondria: 55 S – 60 S (40-45 S, ARN 16 S; 30 S,
ARN 12 S).
CÓDIGO GENÉTICO

 El lenguaje genético se escribe mediante un

alfabeto de 4 letras : A, G , C, T.
 En el ARNm el alfabeto también tiene 4 letras y
donde el U reemplaza a la T.
 Por convención las secuencias nucleotídicas se
escriben y leen en dirección 5ʹ→3ʹ y las proteínas
desde el extremo amino (N) al carboxilo (C).
 Los codones son palabras de 3 letras, lo que
permite 4³ = 64 combinaciones.
 Los codones especifican a un aa. El código
es universal (excepción en la mitocondria).
 Los aa están representados por 2, 3, 4 ó 6
codones distintos (degeneración del
código).
 Unicamente 2 aa tienen un solo codón:
metionina (AUG) y triptófano (UGG)
 Señal de inicio: AUG. Señal de término:
UAG. UAA y UGA (codones sin sentido).
CÓDIGO GENÉTICO
 INTERACCIÓN CODÓN-
ANTICODÓN
 La traducción implica la interacción entre el codón del ARNm y el
anticodón del ARNt.
 El anticodón puede establecer interacción con distintos codones, lo
que se explica por la hipótesis del balanceo (wobble).
 Es decir un mismo anticodón puede establecer interacción con
distintos codones que se diferencian en la 3ª base.
 La 1ª base del anticodón (5ʹ) es menos selectiva y puede establecer
con la 3ª base del codón (3ʹ) un par distinto:
G con C ó U en el codón
U con A o G en el codón
I con A, C o U en el codón.
INICIO DE LA TRADUCCIÓN
 Se requiere la formación del complejo de la sub unidad
pequeña con el aminoacil-tRNA y el ARNm.
 Luego la asociación a la subunidad mayor para iniciar el
complejo de inicio sobre el ribosoma 80 S.
 Se requiere factores de inicio: eIF-2 (eucariote) y IF-2 (procariote).
 El eIF-2a se une al GTP y a un aminoacil-ARNt de
metionina. En procariota la met está modificada
por formilación de su grupo amino (fmet).
 La subunidad 40S se asocia a la proteína eIF-3
formándose el complejo que incluye el eiF-2a. Met-
tRNAi-GTP, el eIF3.40 S, además el eIF-4c y otros
factores proteicos adicionales.
 El complejo se une al ARNm y su ubicación es
favorecido por el factor eIF-4f, localizando la
secuencia AUG de inicio.
 El complejo se asocia a la subunidad 60 S,
originando el ribosoma 80 S.
 El GTP es la fuente de energía.
PROCESO DE
ALARGAMIENTO
 Se requiere la peptidiltransferasa (ribozima) que
transfiere la metionina inicial hasta el grupo alfa
amino del aa que forma parte del aminoacil-
tRNA especificado por el siguiente codón.
 Hay factores de alargamiento que aseguran la
selección de la especie adecuada de aminoacil-
tRNA y para desplazar al mensajero y los tRNA
asociados
 En el ribosoma 80 S queda establecido el sitio P ocupado por
el residuo dador y el sitio A ocupado por el aminoacil-tRNA
especificado por el codón siguiente.
 El factor EF-1 α forma un complejo con el aminoaciltRNA y el
GTP que se une al ribosoma.
 Formado el complejo ya es posible la formación del enlace
peptídico.
 El factor EF2 (translocasa) desplaza al ARNm y al dipeptidil-
tRNA manteniendo la interacción codón-anticodón desde el
sitio A al P.
 El ribosoma puede participar ahora en un nuevo ciclo.
 Ciclos sucesivos de unión de aminoacil-tRNA, formación de
enlace peptídico y translocación dan lugar al alargamiento
secuencial del polipéptido hacia el que será el extremo
carboxilo.
TERMINACIÓN DE LA
SÍNTESIS PROTEICA
 La presencia de un codón de termino UAG, UAA , UGA en el
sitio A del ribosoma no facilita la unión de ningún ARNt.
 El factor de liberación eRF interacciona con el ribosoma.
 Se facilita la salida del polipéptido sintetizado.