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Hallazgos
• Conjunto de ensayos preliminares • Familia amplia de bacterias
químicos que se realizan a Gram negativas
los microorganismos • Patrón de tinción de Gram • Carecen de la enzima
• La finalidad es • Caracteres de crecimiento citocromo c oxidasa y por
identificarlos • Permiten asignar la ello son oxidasa negativos
bacteria a una categoría
particular.
Pruebas
Enterobacterias
bioquímicas
PRUEBA TSI
PRUEBA TSI (AGAR HIERRO TRIPLE AZÚCAR)
• Extracto de Levadura
• De Carne Prueba para decidir la ruta de
• Peptona identificación de género y
especie
• Proteosa peptona
• Equilibrado Categorías
pH 7,3
Fermentadores de
glucosa
• Rojo - amarillo
pH 6,8 • Ácidos por
fermentación No fermentadores
de lactosa
• naranja - rojo
Alcalinización Fermentadores de
lactosa/sacarosa
No Fermentadores de lactosa/sacarosa
• K/A
• Amarillo - rojo
• Necesita oxígeno
• 18 – 24 horas
Fermentadores de lactosa/sacarosa
• A/A
• Amarillo.
• Utilización de glucosa
• Aerobia
• Anaerobia
Se evidencia por la
Formación de
Producción de Gas presión que ejerce (+) / (-)
burbujas
dentro del agar.
K/A o A/A y
citocromo oxidasa
(+)
A/A o K/A y prueba
citocromo oxidasa (- • Cepas fermentadas no
pertenecientes a
)
K/K y prueba Enterobacteriaceae.
USOS citocromo (+) • Familia
Enterobacteriaceae
• Preuba para
identificación de Gram
(-)
En la parte inferior
Colonias puras Sembrado en forma
Sembrado pueden existir cepas
aisladas de zigzag.
viables.
Limitaciones 18 – 24 horas
Falsa negativa de no
fermentador.
PRUEBA SIM
SIM: SULFURO INDOL MOVILIDAD
FORMAN
COFACTOR
SISTEMA
ENZIMÁTICO
BUFFER
BALANCE AGENTE
OSMÓTICO SOLIDIFICANTE
Preparación Disolver 24,2g de cultivo en 1 litro de agua.
Calentar a ebullición por 2min. Esterilizar
del medio autoclave 121°C durante 15min
RESULTADOS
POSITIVO NEGATIVO
EL
NO SE OBSERVA
MICROORGANISMO
CRECIMIENTO
CRECE
CAMBIO DE
COLORACIÓN DE PERMANECE VERDE
VERDE A AZUL
PRUEBA UREA
Fuente de N2
Ureasa bacteriana
UREA CO2 + NH3 pH
Indicador
Preparación
Enfriar a 50º C y
Disolver 29 g del agregar la base
polvo en 100 ml de de urea, mezclar
H2O . Autoclavar y dispensar en
los tubos
• Ureasa • Ureasa
negativo positivo
(6,8) (8,4)
3 – 5 días
Resultados válidos en las 2 -6
horas después de incubación
Utilización de peptonas
Falso positivo
Hidrolisis de proteínas V de hidrolisis de urea
PRUEBA OF-LACTOSA
OF – LACTOSA El metabolismo de un glúcido puede seguir la vía
oxidativa o fermentativa.
• Agar
• Peptona
El medio es de color verde (pH 7,1)
• Azul de bromotimol
vira a amarillo cuando el medio se acidifica
como indicador de
pH.
Klebsiella
E. coli
RESULTADOS
Klebsiella E. coli
CONCLUSIONES
Madigan , M., Martinko, J., & Dunlap, P. (2009). Brock Biología de los microorganismos. Madrid: Pearson Education
MacFaddin, J. F. (2016). Pruebas bioquimicas para la identificación de bacterias de importancia clínica . Bogotá :
Panamericana .