Microscopia óptica

Equipo 1°
Anguiano Saldaña Luis Ángel
Arredondo Chavarría Alan Uziel
Barboza Rendón Mario Alberto
Benítez Lozano Jesús
Contreras Berino Diego Alain
Díaz Rodríguez Blanca Vanessa
Espericueta Martínez Luis Eduardo
Flores Ramírez Jesús Ángel
Hernández Sánchez Rafael
 Principios.
Refracción.(Fig. 1 y 2)

Fig. 1 refracción de las Fig. 2 refracción de las

ondas de luz en un cristal. ondas de luz en una
lente.
 Principios.
Orientación (Fig. 3) y aumento (Fig. 4 y 5).
Fig. 3 Orientación de la
imagen tras pasar la luz
por un lente

Fig. 5 Diferencias en el
Fig. 4 Tamaño aparente desempeño de lentes
de un objeto tras pasar simples y compuestos.
la luz por una lente.
 Concepto.
La microscopia óptica (Fig. 6) es una técnica
empleada para ver de cerca una muestra
con el aumento de una lente con la luz
visible. Ésta es la forma tradicional de la
microscopia, que primero fue inventada
antes de los 18th siglo y es todavía
funcionando hoy.
Un microscopio óptico, Se basa en el uso de
lentes para aumentar los rayos de luz que
atraviesan una muestra de tejido.
Fig. 6 Microscopia óptica.
 Concepto.
Es también conocido a veces como microscopio liviano (Fig.
7), utiliza una o una serie de lentes para magnificar
imágenes de pequeñas muestras con la luz visible. Las
lentes se colocan entre la muestra y el aro del espectador
para magnificar la imagen para poderla examinar
minuciosamente.

Fig. 7 Microscopia óptica.

 Equipos y partes.
Microscopio óptico (Fig. 8).
Existen gran variedad de equipos de
acuerdo a su aplicación y condiciones de
operación; como son:
 * Microscopio óptico de campo brillante o
campo luminoso
 * Microscopio de campo oscuro
 * Microscopio de contraste de fase
 * Microscopio de luz polarizada
 * Microscopio de interferencia Fig. 8 Diversos tipos de microscopios ópticos, de
 * Microscopio de contraste diferencial izquierda a derecha: 1) Microscopio compuesto
antiguo. 2) Microscopio de campo oscuro.
interferencial 3) Microscopio digital. 4) Microscopio estereoscópico.
5) Microscopio invertido.
 * Microscopio de Luz Ultravioleta (UVA)
 Equipos y partes.
 Sistema de iluminación: Lo integran aquellos componentes encargados de colectar la luz y
dirigirla a través del preparado por ejemplo: espejo, condensador, diafragma (Fig.9.).

Fig. 9 Sistema de iluminación de un microscopio óptico.

 Equipos y partes.
 Sistema de Mecánico: Está formado por aquellas piezas que no intervienen en la
formación de la imagen ni en el cambio de la luz (Fig.10).

Fig. 10 Sistema mecánico de un microscopio óptico.

 Equipos y partes.
Sistema de lentes (Fig. 11):
 Oculares: Los oculares están construidos generalmente por dos lentes, dispuestas
sobre un tubo corto.
 Objetivos: Producen aumento de las imágenes de los objetos y organismos.

Fig. 11 Sistema de lentes y partes de un microscopio óptico.

 Características de la muestra.
En caso de la microscopia óptica las muestras deben tener un grosor de 5 a 8 μm (Fig.
12) aproximadamente es necesario por tanto cortar el material que ha de ser estudiado
en lascas muy finas y considerar los siguientes criterios:
 Asegurar que la muestra a observar es representativa del material, objeto u
organismo de procedencia que se desea estudiar.
 Hacer que las características de interés sean accesibles al sistema de imagen del
microscopio.
 Cuando sea necesario, aumentar el contraste entre los elementos estructurales de los
materiales y el fondo.

Fig. 12 Cabello humano

(entre 15 micrómetros y
170 micrómetros.) como
referencia para el
tamaño de las muestras.
 Características de la muestra.
Corte y Montaje
 Las muestras se deben separar, usando para ello un bisturí al cual se le
calienta la hoja. Cada material debe ser preparado antes de fijarse al
soporte del micrótomo (Fig. 13).
 Este tipo de micrótomo es graduable entre 3 y 30 µm para el espesor de
los cortes. La ventaja de este equipo es que cada corte se pega al
anterior formándose una cinta (Fig. 14).

Fig. 13 Fig. 14 Cinta

Micrótomo. de muestras
resultantes
del
micrótomo.
 Procedimiento.
Recomendaciones que se debe tener presente para el uso de
microscopio óptico
 Para evitar que se des calibre el microscopio se debe sujetar
con una mano el soporte o brazo y con la otra mano sostener la
base o pie durante su traslado, al girar los tornillos macro y
micro métricos se debe realizar suavemente para evitar romper
los lente de los objetivos laminas porta objetos y laminas cubre
objetos, debemos evitar el contacto de los dedos con los lentes
del ocular, de los objetivos y del condensados antes de usar la
laminas cubre objetos y las laminas porta objetos debemos
verificar que estén limpios.
Pasos a seguir para el uso de microscopio óptico
 Encendido del micro: este permite encender la fuente Fig. 15 Colocación de la
luminosa del microscopio para ello se debe colocar siempre el muestra.
objetivo de menor aumento.
 Colocación de la muestra (Fig. 15): una vez colocada la
muestra en la lámina portaobjeto cubrir la muestra con la
lamina cubre objeto, luego ubicamos sobre la platina estando
sujetado con las pinzas.
 Procedimiento.
 Enfoque con menor aumento: se inicia con el enfoque
panorámico de 4x y mirando lateralmente subir la platina
con el tornillo macro métrico hasta que el lente objetivo
se encuentre a medio centímetro del objeto o muestra,
hasta que la imagen se agá distinguir y luego mover el
tornillo micrométrico lentamente hasta obtener la imagen
nítida.
 Enfoque de mayor aumento: para observar con el lente
objetivo de inmersión (Fig. 16) es necesario colocar una
gota de aceite de cedros sobre la laminilla de la muestra
preparada y luego centrar el lente de inmersión para
obtener la imagen aumentada.
 Retiro de la preparación: concluida la observación de la Fig. 16 Observación
muestra el lente objetivo de mayor aumento vuelve al con el lente objetivo.
lugar inicial se, retira el portaobjetos y finalmente se
debe limpiar los objetivos para lo cual utilizaremos un
hisopo de algodón conteniendo alcohol isopropilico.
 Materiales.
 El estudio bajo un microscopio óptico es una fuente muy importante de
información para la caracterización y estudio de muestras de pintura (Fig. 17 y
18), piedra, morteros, acabados, metales (Fig. 19), madera, cerámica, etc.

Fig. 17 Fotomicrografías de una Fig. 18 Fotomicrografías de una sección Fig. 19 Picaduras de

sección de la portada principal de la de la portada principal de la Lonja de corrosión en fluoruro de
Lonja de Mercaderes adquirida en Mercaderes con iluminación en campo litio.
iluminación de campo oscuro. claro.
 Materiales.
 La miniaturización de los sistemas de captación de imagen y el desarrollo de
LEDs (Fig. 20) de elevada intensidad de emisión permiten una buena
aproximación (Figs. 21 y 22) no destructiva al estado y heterogeneidad de una
superficie y de esta manera lograr información que de otra forma requeriría una
compleja infraestructura.

Figs. 21 y 22 Fotomicrografías con diferentes

Fig. 20 Microscopio con sistema
configuraciones ópticas y distintos aumentos de fibras de
de iluminación led
lino de la tela de la obra "Ciencia y caridad" de Picasso
 Análisis de resultados.
 La inspección microscópica de la superficie aporta, en muchos
casos, una valiosa información sobre la rugosidad (Fig. 23),
distribución del color, presencia de capas de acabado (barnices,
pátinas ...), revela características de la muestra que no son
perceptibles para el ojo humano (Fig. 24).

Fig. 23 Microscopía óptica de la pieza de aluminio Fig. 24 Limite de resolución del ojo humano,
en la que se aprecia el tamaño de grano. Microscopio óptico y microscopio electrónico.
 Análisis de resultados.
Análisis de superficies en materiales
metálicos (Fig. 25).
 Cuando se exponen a la luz
incidente en un microscopio
óptico, las cavidades no reflejan la
luz tan intensamente como el
resto del material granulado.
Debido a la menor reflexión de
luz, las diminutas cavidades
aparecen como líneas oscuras,
revelando así los límites del grano. Fig. 25 Efecto del ataque de una superficie
pulida de una muestra de acero sobre la
Microestructura observada en el microscopio
óptico.
 Análisis de resultados.
 En (a) (Fig. 25) se observa que en la
muestra pulida no se contempla la
microestructura característica.
 En (b) (Fig. 25), después del ataque de un
acero muy bajo en carbono, solamente se
han atacado de manera importante los
límites de grano y aparecen como líneas
oscuras en la microestructura óptica.
 En (c) (Fig. 25), luego del ataque de una
muestra pulida de un acero medio en
carbono, en la microestructura se observan Fig. 25 Efecto del ataque de una superficie
dos regiones, una oscura (perlita) y otra pulida de una muestra de acero sobre la
clara (ferrita). La perlita oscura ha sido Microestructura observada en el microscopio
óptico.
más fuertemente atacada por el reactivo y
por lo tanto no refleja mucha luz.
 Análisis de resultados.
RESULTADOS DE UN ANALISIS DE MICROSCOPIA A SLODADURA.
Los resultados que obtienen son las propiedades del
material, por ejemplo, en el caso de las muestras con éxito
(Fig. 26), se mide la profundidad de la soldadura. Con este
análisis inclusive se certifica las máquinas soldadoras y así
se brinda la seguridad de que el proceso esté bien realizado.
De obtener resultados diferentes a los esperados, se pueden
cambiar las propiedades de los materiales por diferentes
procesos como, tratamientos térmicos, rolados, entre otros.
Este estudio es clave e importante para el estudio de los Fig. 26 Muestra de soldadura
materiales que han llegado a la obtención de las propiedades analizada por microscopia
óptica.
de estos, con tamaños de grano, profundidades de
soldaduras, espesores, recubrimientos, porcentajes de áreas
de diferentes aleaciones, tamaños de partículas, entre
otros.
 Conclusión.

La microscopia óptica aunque es realmente útil y ayuda

a la percepción de características de los materiales que
a simple vista seria imposible analizar, también cuenta
con muchas limitantes por lo que hemos concluido que
se utilice esta técnica siempre y cuando no se cuente
con una microscopia electrónica o dichos procesos no
sean capaces de identificar las características de los
materiales que son criticas para nuestros
procedimientos.