República Bolivariana de Venezuela.

Ministerio del Poder Popular para la Salud

Universidad Nacional Experimental Francisco de Miranda
Extensión Tucacas.

Repaso IV
Dr. Domenico Capretta

Tucacas, Agosto 2011

 Glucólisis y
la oxidación de
piruvato
 Importancia medica
Casi todos los tejidos tienen al menos ciertos
requerimientos de glucosa. En el cerebro, esa
demanda es considerable.
La glicólisis, la principal vía para el metabolismo
de la glucosa, ocurre en el citosol de todas las
células.
Puede funcionar de manera aerobia o
anaerobia, según la disponibilidad de oxigeno y la
cadena de transporte de electrones.
 Los eritrocitos, que carecen de mitocondrias,
dependen por completo de la glucosa como
combustible metabólico y la metaboliza mediante
glucólisis anaeróbica.
Sin embargo, oxidar glucosa más allá del
piruvato requiere tanto oxígeno como sistemas
mitocondriales: el complejo de piruvato
deshidrogenasa, el ciclo del ácido cítrico y la
cadena respiratoria.
 La capacidad de la glucólisis para proporcionar
ATP en ausencia de oxigeno tiene especial
importancia, porque esto permite al músculo
esquelético tener un nivel alto de desempeño
cuando el aporte de oxígeno es insuficiente, y
permite a los tejidos sobrevivir a episodios de
anoxia.
Sin embargo, el músculo cardiaco, que está
adaptado para el desempeño aerobio, tiene
actividad glucolítica relativamente baja y poca
supervivencia en condiciones de isquemia.
 Las enfermedades en las cual hay deficiencia de
enzimas de la glucólisis (p. ej, piruvato cinasa) se
observa sobre todo como anemias hemolíticas o si el
defecto afecta el músculo esquelético (p. ej.
Fosfofructocinasa), como fatiga.
En las células cancerosas en crecimiento rápido,
la glucólisis produce a un índice alto, formando
grandes cantidades de piruvato el cual es reducido
hacia lactato y exportado. Esto produce un ambiente
local hasta cierto punto ácido en el tumor, mismo
que puede tener inferencias para la terapia del
cáncer.
 La Reacciones de la glucólisis

Es la oxidación citosólica de la D-glucosa hasta

dos moléculas de ácido pirúvico o ácido láctico
generando dos moléculas netas de ATP, por una serie
de reacciones conocida como la vía glucolítica de
Emberden-Meyerhof.
 La Glucólisis

Es la principal vía metabólica de la glucosa y

puede ocurrir en condiciones:

La Glicólisis La Glicólisis
aerobia anaerobia
Ocurre en todos los tejidos y
en todos los seres vivos
 Glucólisis aerobia

En la glucólisis aerobia, el ácido pirúvico difunde

a la mitocondria y allí, por el complejo de la piruvato
deshidrogenasa, se transforma en Acetil~S-CoA
para alimentar al ciclo de Krebs o servir de
precursor, según el caso, para la síntesis de ácidos
grasos.
 Glucólisis anaerobia

En la glucólisis anaerobia o fermentación

(alcohólica en procariotas y láctica en eucariotas),
la glucosa se convierte en el único combustible
metabólico que se oxida sin oxígeno, lo cual es
importante para los tejidos anaerobios como el
músculo, la médula renal, los eritrocitos y la retina.
Solo se produce ATP por fosforilización a nivel del
sustrato.
 Fase de la Glucólisis

La glucólisis se divide en dos fases:

1.- La fase de las hexosas donde se consume

ATP.
2.- La fase de las triosas donde se produce ATP
por fosforilización a nivel del sustrato, hay una
oxidación ligada al NAD⁺ y se produce piruvato.
1.- Activación de la D-glucosa

 Es irreversible, se consume 1 ATP.

 Produce glucosa 6-P y puede trabajar dos
enzimas distintas: hexoquinasa y glucoquinasa.
Mg ⁺²
D- glucosa + ATP D-glucosa 6-P + ADP
Hexoquinasa
 La enzima puede trabajar con el anómero
α o β. En reacción es catalizada por un grupo
de 4 enzimas distintas llamadas
hexoquinasas de I a IV.
1.- La hexoquinasas tipo I y II, se
encuentra en el cerebro y músculo
esquelético
2.- La hexoquinasa IV, se conoce como
glucoquinasa está en el hígado.
2.- Isomerización de la D-glucosa
 Es reversible y trabaja la enzima fosfohexosa
isomerasa, que requiere Mg⁺² o Mn⁺².
 En la reacción se produce un isomerismo
aldosa-cetosa porque la glucosa que es una
aldosa se transforma en su isómero la fructosa.
Mg ⁺²
D-glucosa 6-P Fructosa 6P
Fosfohexosa isomerasa
3.- Fosforilación de la fructosa 6-P
 Es irreversible, consume 1 ATP y es principal
punto de control de la glucolisis.
 La reacción es catalizada por la
fosfofructoquinasa 1 y culmina la etapa de la
hexosa fosfato.
Fructosa 6P + ATP Fructosa 1,6-P + ADP
Fosfofructoquinasa 1
D- Fructosa 1,6bisfosfato
4.- Escisión aldólica de la fructosa bisfosfato

Por acción reversible de la enzima fructosa

bisfosfato, la fructosa 1,6 bisfosfato se hidroliza
entre los carbonos 3 y 4 para dar lugar a dos
triosas fosfatos:
1.- Una aldosa (gliceraldehido 3-P)
2.- Una cetosa (la dihidroxiacetotona-P)
 Las triosas fosfatos son interconvertibles, por
acción reversible de la enzima fosfotriosa
isomerasa y en la glucólisis el equilibrio se
favorece hacia el gliceraldehido 3-P.

 Entonces cada molécula de glucosa que entra a

la glucólisis se transforma en dos moléculas de
gliceraldehido 3-P ( una se obtiene directamente
de la aldosa y la otra por isomerización de la
dihidroxiacetona 3-P.
 Desde aquí comienza la etapa de las triosas y en
ella todas las reacciones tienen dos moléculas de
los reaccionantes y productos si calculamos la
glucólisis a partir de una glucosa.

Fructosa 1,6 bisfosfato

Aldolasa

Gliceraldehido 3-P + Dihidroxiacetona- P

Fosfotriosa Isomerasa

Gliceraldehido 3-P
5.- Oxidación del Gliceraldehido 3-P

 Reacción reversible en donde se atrapa la

energía de una oxidación en forma de enlace
fosfato de alta energía en el carbono 1 del 1,3
difosfoglicerato
 Es catalizada por una piridinoprteína ligada al
NAD ⁺, la gliceraldehido 3-P deshidrogenasa.
 Se genera NADH en el citosol, el cual, en
condiciones aerobias forman ATP en la cadena
respiratoria por acción del sistema de lanzadera
mitocondriales.
En el hígado y corazón, donde se encuentra la
lanzadera del oxaloacetato/malato se genera 3
ATP por cada gliceraldehido 3-P que se oxide en el
citosol y por lo tanto rinde 6 ATP por glucosa.
 En el músculo esquelético y cerebro, donde se
encuentra la lanzadera de glicerol 3-P, se generan 2
ATP por cada gliceraldehido 3-P que oxida en el
citosol y por lo tanto rinde 4 ATP por glucosa.

Gliceraldehido 3-P + Pi + NAD 1,3 difosfoglicerato + NADH + H⁺

Gliceraldehido 3-P deshidrogenasa
Paso 1: Formación del intermediario tiohemiacetal inicial entre el
gliceraldehido 3P y la enzima.
Paso 2: Oxidación del intermediario inicial por el NAD⁺ para dar
lugar a un producto intermediario acil-enzima.
Paso 3: Ruptura fosforolítica del enlace tioéster en el intermediario
acil-enzima.

Ruta de reacción de la gliceraldehido 3-P deshidrogenasa

6.- Fosforilación a nivel del sustrato

 En una reacción de acoplamiento reversible, la

enzima fosfoglicerroquinasa transfiere el fosfato
de alta energía del carbono 1 del 1,3 DPG al ADP
para formar ATP liberando 3 fosfoglicerato en lo
que se considera un ejemplo de fosforilización a
nivel del sustrato.
 Esta reacción rinde 2 ATP por glucosa.
 La fosfoglicerato quinasa cataliza la primera
reacción glucolitica que forma ATP

1,3 difosfoglicerato + ADP 3- fosfoglicerato + ATP

Fosfogliceroquinasa
7.- Isomeración del 3-fosfoglicerato.
 Es reversible, catalizada por la enzima
fosfoglicerolmutasa, que se encuentra fosforilizada y
en su mecanismo de acción forma el intermediario
covalente 2,3 difosfoglicerato para luego liberar al
2- fosfoglicerato.

3-fosfoglicerato 2-fosfoglicerato
fosfogliceromutasa
8.- Enolización del 2- fosfoglicerato.
En esta reacción una deshidratación reversible,
catalizada por la enolasa en presencia de Mg⁺²,
incrementa la energía del enlace fosfato del 2-
fosfoglicerato transformándolo en el compuesto de
mayor energía: el fosfoenolpiruvato. La enolasa es
inhibida por fluoruro.
2 – fosfoglicerato Fosfoenolpiruvato
Enolasa + Mg ⁺²
9.- Fosforilización a nivel del sustrato en
la síntesis del piruvato.

 Es irreversible, catalizada por la enzima piruvato

quinasa, que transfiere el P de alta energía del
fosfoenolpiruvato al ADP para formar piruvato y ATP
por fosforilización a nivel del sustrato.

Fosfoenolpiruvato + ADP Piruvato + ATP

Piruvato quinasa Mg⁺²
La glucólisis está regulada en tres pasos que
involucran reacciones no en equilibrio.

La mayor parte de las reacciones de la glucolisis

son reversibles, tres son en gran medida
exergónica y por ende deben considerarse
irreversible desde el punto de vista fisiológico.
Estas reacciones, catalizadas por la hexocinasa
o glucocinasa, la fosfofructocinasa y la piruvato
cinasa, son los principales sitios de regulación de la
glucólisis.
La fosfofructocinasa está inhibida a concentraciones
intracelulares normales de ATP; esta inhibición
puede aliviarse con rapidez mediante 5`AMP que se
forma a medida que se empieza a acumularse ADP,
lo que señala la necesidad de un incremento en la
velocidad de la glucólisis.
Las células que tienen la capacidad de
gluconeogénesis (que revierte la vía glucolítica)
tienen diferentes enzimas que catalizan reacciones
para revertir estos pasos irreversibles; glucosa 6-
fosfatasa, fructosa 1,6- bisfosfatasa y, para revertir
la reacción de la piruvato cinasa, piruvato
carboxilasa y fosfoenolpiruvato carboxinasa.
 La fructosa entra a la glucólisis mediante
fosforilización hacia fructosa 1- fosfato, y evita los
principales pasos reguladores; de este modo, da
por resultado la formación de más piruvato (y
acetil- CoA) que es necesario para la formación de
ATP.
En el hígado y el tejido adiposo, esto lleva a
aumento de la lipogénesis y una ingestión alta de
fructosa puede ser un factor en la aparición de
obesidad.
En los eritrocitos es posible evitar el paso por
el primer sitio de formación de ATP en la
glicólisis.

En los eritrocitos, es factible evitar hasta cierto

grado el paso por reacción catalizada por la
fosfoglicerato cinasa mediante la reacción de la
bisfosfoglicerato mutasa, que cataliza la conversión
de 1,3- bisfosfoglicerato en 2,3- bisfosfoglicerato,
seguida por la hidrólisis hacia 3 – fosfoglicerato y Pi,
catalizada por la 2,3 – bisfosfoglicerato fosfatasa.
 Esta vía alternativa comprende rendimiento
neto nulo de ATP por glucólisis. Sin embargo, sirve
para proporcionar 2,3- bisfosfoglicerato, que se une
a la hemoglobina, lo que disminuye su afinidad por
el oxigeno y así hace que el oxigeno esté disponible
con más facilidad para los tejidos.
 La oxidación del piruvato hacia acetil – CoA
es la ruta irreversible desde la glucólisis
hacia el ciclo del ácido cítrico.

La piruvato, formado en citosol, es transportado

hacia la mitocondria mediante un simportador de
protones
Dentro de la mitocondria, se descaboxila de
manera oxidativa hacia acetil – CoA mediante un
complejo multienzimatico relacionado con la
membrana mitocondrial interna.
 Este complejo de piruvato deshidrogenasa es
análogo al complejo de a – cetoglutarato
deshidrogenasa del ciclo del ácido cítrico. El
piruvato es descarboxilado por la piruvato
deshidrogenasa componente del complejo
enzimático hacia un derivado hidroxietilo del anillo
tiazol de tiamina difosfato unido a enzima que, a
su vez, reacciona con lipoamida oxidada, grupo
prostético de la dihidrolipoil transacetilasa, para
formar acetil lipoamida.
 La acetillipoamida reacciona con la coenzima A
para formar acetil – CoA y lipoamina reducida se
vuelve a oxidar mediante una flavoproteína, la
dihidrolipoil deshidrogenasa, que contiene FAD.
Por último, la flavoproteína reducida se oxida
mediante NAD⁺ que, a su vez transfiere
equivalentes reductores a la cadena respiratoria.

Piruvato + NAD⁺+ CoA Acetil – CoA + NADH + H⁺ + CO2

 La piruvato deshidrogenasa está regulada
mediante inhibición por producto terminal y
modificación covalente

La piruvato deshidrogenasa es inhibida por sus

producto, Acetil – CoA y NADH. También está
regulada por una cinasa que fosforila tres residuos
de serina del componente piruvato deshidrogenasa
del complejo, lo que da por resultado decremento
de la actividad, y por desfosforilización por una
fosfatasa que causa aumento de la actividad. La
cinasa se activa por incrementos de las
proporciones [ATP]/[ADP], [acetil – CoA]/[CoA], y
[NADH]/[NAD⁺].
 De este modo, la piruvato deshidrogenasa y, por
ende, la glucólisis, son inhibidas tanto cuando se
dispone de cantidades adecuadas de ATP (y
coenzimas reducidas para la formación de ATP),
como cuando los ácidos grasos se están oxidando.
En el ayuno, cuando aumentan las
concentraciones de ácidos graso libre, hay un
decremento de la proporción de la enzima en la
forma activa lo que lleva a una preservación de
carbohidrato. En el tejido adiposo donde la glucosa
proporciona acetil – CoA para la lipogénesis, la
enzima se activa en respuesta a la insulina.
La oxidación de la glucosa da hasta 32 moles
de ATP en condiciones aerobias, pero sólo 2
moles en ausencia de O2.

Cuando un mol de glucosa es objeto de

combustión en un calorímetro hasta CO2 y agua, se
liberan unos 2870 kj como calor. Cuando la
oxidación ocurre en los tejidos, se genera 32 moles
de ATP. La mayor parte del ATP se forma mediante
fosforilación oxidativa originada por la reoxidación
de coenzimas reducidas por la cadena respiratoria;
el resto se forma por fosforilación a nivel del
sustrato.
Formación de ATP en el catabolismo de la glucosa.
 Aspecto clínicos
La inhibición del metabolismo del piruvato lleva a
acidosis láctica: La arsenita y los iones
mercúricos reaccionan con los grupos – SH del
ácido lipoico, e inhiben la piruvato deshidrogenasa,
como hace una deficiencia de tiamina en la dieta,
lo que permite que se acumule piruvato.
Muchos alcohólicos tienen deficiencia de
tiamina (tanto por llevar una dieta inadecuada
como porque el alcohol inhibe la absorción de
tiamina) y a menudo presentan acidosis pirúvica y
láctica que en potencia es mortal.
 Los pacientes con deficiencia hereditaria de
piruvato deshidrogenasa, que puede ser el
resultado de defectos en uno o más de los
componentes del complejo de enzimas, también
presenta acidosis láctica, en particular después de
una carga de glucosa.
Debido a la dependencia del cerebro de la glucosa
como combustible, estos defectos metabólicos por lo
general causan alteraciones neurológicas.
 La deficiencia hereditaria de la aldolasa A y la
deficiencia de piruvato cinasa en los eritrocitos
causan anemia hemolítica. Los pacientes con
deficiencia de fosfofructocinasa muscular tiene la
capacidad para hacer ejercicio, en particular si están
recibiendo dieta con alto contenido de carbohidratos.
Al proporcionar lípidos como combustible alternativo,
por ejemplo, durante la inanición, cuando los ácidos
grasos libres y los cuerpos cetónicos en sangre están
aumentados, la capacidad para desempeñar trabajo
mejora.