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ACIDOS

NUCLEICOS
CONFORMACIÓN:

• Nucleósido
• Acido Fosfórico
Nucleósido

• Azúcar
• Base Nitrogenada
Base Nitrogenada:

• Purinas
• Pirimidinas
Hidrólisis ácida:
• Liberación de Purinas en el
ADN
METODOS DE
ESTUDIO
HISTOLOGICO
Fijación:
• Carnoy
• Alcohol
• Formol
• Zenker

Técnicas de estudio:
• Inclusión en parafina
• Cortes por congelación
Métodos de Demostración:

• Histoquímicos : generales y específicos


• Moleculares
Métodos Métodos
generales: específicos:

• Mitchel : B. N. • Feulgen
• Serra : Fosfato • Unna-Pappenheim
• Turchini : Azúcar • Acridina Orange
FEULGEN: ADN

• 1º Hidrólisis ácida : formación de -CHO


distancia entre -CHO es
de 1 a 1.1 nm

• 2º R. Schiff : color magenta


H H
H
H
¿Qué es el reactivo de
Schiff?
Fucsina básica
Reactivo de Schiff
FEULGEN
Feulgen:

• Reacciòn Plasmal
ARN
• Distancia entre carbonilos menor
de 1 nm
• Extracción por hidrólisis
PROBLEMAS:

• Exceso de hidrólisis
• Falla del Schiff.
FEULGEN-FLUORESCENTE
Unna-Pappenheim:
• ADN
• ARN

• Verde Metil
• Pironina
Verde metil
Cristal violeta Pironina
Unna-Pappenheim:
• pH: 4.8
• Estructura
• Brachet

• Verde metil : ADN


• Pironina : ARN
Acridina Orange:
• Fluorescente
• Metacromático

• ADN
• ARN
Acridina orange
Takahash
i
Acridina Orange:

 Digestión enzimática

Moleculares:
• Hibridación in situ
• PCR
Hibridación in situ:(HIS)
Dterminación de secuencias
específicas de DNA y RNA en los
tejidos.

HIS : Pasos
• Desnaturalización del ADN
• Hibridación
• Visualización
HIS: Desnaturalización:
• Temperatura de 100 +/- 3 ºC
• Placas térmicas

HIS: Hibridación

• Sondas específicas marcadas


• 37 ºC
HIS: Sondas
• Secuencia específica de ADN que se
desea investigar.

• Las sondas deben estar


marcadas:
- Biotina
- Fluorocromo
- Isótopos
HIS: Visualización

• Depende del tipo de marcador que


se haya utilizado

• Biotina: Enzima
• Fluorocromo:Fluorescencia
• Isótopos: Autorradiografía
Herpes / Sarcoma de Kaposi
PCR
• reacción en cadena de la polimerasa
• aumento notable de adn a través de
síntesis sucesivas.

PCR: Pasos

• Desnaturalización del ADN


• Apareamiento de Primers
• Extensión de la cadena
ACIDOS NUCLEICOS
formadoS ADN
tipos
son
NUCLEOTIDOS ARN
COMPUESTOS para el
es la unión de CATENARIOS
que ESTUDIO
FOSFATO NUCLEOSIDO MORFOLOGICO
ALMACENAN
la
constituido por
la FIJACIÓN
AZUCAR TECNICA DE
BASE INFORMACIÓ ESTUDIO
NITROGENADA N GENÉTICA

pueden ser M.DEMOSTRACIÓN

PURINAS PIRIMIDINAS pueden ser

M. HISTOQUÍMICOS
M.MOLECULARES

a su vez

GENERALES ESPECÍFICOS