OTROS MICROSCOPIOS

HISTOLOGIA-MEDICINA
 Utiliza el fenómeno de Tyndall.
 Poder de resolución incrementado
 Condensador parabolico:
- C. Parabolide: lampara opaca.
- C. Cardioide: pieza semiesferica de cristal
plateada, pintada de negro en su parte
superior.
 Se utiliza en bacteriologia.

M. DE CAMPO
OSCURO/ULTRAMICROSCOPIO
 M. DE CAMPO
OSCURO/ULTRAMICROSCOPIO
 Utiliza el fenómeno de interferencia.
 Se observa células In vivo, transparentes
y NO coloreados. Ej.: cel. En Mitosis
 Atraviesa la célula dando diferentes tonos
de gris.
 Posee:
- Diafragma anular.
- Disco de Zernike (placa de retardo de
fase)

M. DE CONTRASTE DE
FASES/INTERFERENCIA.
 M. DE CONTRASTE DE
FASES/INTERFERENCIA
 Utiliza el fenomeno de polarizacion.
 Se observan estructuras birrefringentes.
 Posee:
- Prisma polarizado (debajo del
condensador).
- Prisma analizador (encima del objetivo)
 Birrefringencia=luz
 Monorrefringencia=oscuridad

M. POLARIZACION
M. POLARIZACION
 Usa el fenómeno de fluorescencia.
 Posee:
- Fuente de luz= rayos UV y azul violeta
(prod. Altas temperaturas)
- Cámara fotográfica=capta imágenes.
- Condensador de Cuarzo.
- Espejo de superficie aluminizada
- Filtro de absorción=evita el daño a la
retina.

M. DE FLUORESCENCIA/
INMUNOFLUORESCENCIA
M. DE FLUORESCENCIA
 Estudia la distribucion intracelular de
moleculas.
 Usa tincion fluorescente=marca moleculas
en celulas fijadas o vivas.
 Proteinas de la celula se ven por la PVF

M. DE FLUORESCENCIA
M. DE FLUORESCENCIA
 Utiliza M. de fluorescencia+analisis
electronico
 Imágenes tridimencionales
 Pundo de luz (laser) enfoca la muestra a
una profundidad, luz fluorescente se
recoge con un detector (video camara).
 Solo la luz enfocada alcanza el detector

MICROSCOPIA FOCAL
MICROSCOPIA FOCAL
 Se aplica a celulas vivas.
 2 fotones exitan el tinte fluorescente.
 Producen imágenes 3D

MICROSCOPIA DE EXITACION POR

DOS FOTONES
 M. fotonico= 500 nm (luz visible)
 M. electronico= 0,005 nm (electrones)
 Son de tres tipos:
- M.E. de transmision/convencional
- M.E. de Barrido/Rastreador/Scaning.
- M.E. de Tunel de Barrido.

M. ELECTRONICO
M. ELECTRONICO
 CARACTERISTICAS:
- lentes=campos electromagnéticos=
Lentes electromagneticos: bobinas con
orificio central de 30 a 50µm.
- Unidad de consola= parte mecánica
- Unidad de Potencia= parte óptica

M. ELECTRONICO
 Tubo de rayos catodicos.
 Catodo=tugsteno (“V”), calentado emite
electrones.
 Electrones acelerados por 50 a 100 kV al
anodo (placa metalica con orificio
central=apertura).
 Pasan el anodo para ir al condensador
magnetico.
 Lente del objetivo magnetico, forma
imagen.

M.E. de transmision/convencional
 Imagen es agrandada adicionalmente por
la lente de proyección, que lo proyecta
sobre pantalla fluorescente o placa
fotográfica.
 1 millón a 10 millones de aumentos.
 Todo el sistema debe estar al vacio.
 Imagen se forma por dispersión de
electrones= IMAGEN EN SOMBRA.
 Muestra delgada (40-80nm) por <poder
de penetración.(para aumentar requiere
500 a 3000 kV)
M.E. de transmision/convencional
 NO requiere que electrones atraviesen la
muestra.
 Imagen 3D, de la superficie de la muestra
 Bobina deflectora, barre con haz de
electrones primarios muy estrecho.
 Por cada punto de la muestra se emiten
electrones secundarios (se mide por un
detector)
 NO necesita cortes finos; PR=10 nm; PP=
10 veces del Mic optico.
M.E. de
Barrido/Rastreador/Scaning.
 M.E. de
Barrido/Rastreador/Scaning.
 Capta la superficie de la muestra hasta
nivel atómico.
 Tiene una sonda 1nm debajo la muestra.
 Se puede ver hasta dos hebras de DNA.

M.E. de Tunel de Barrido

 Microscopio, fijo en un mesón (negro).
 Situado a altura adecuada para el
observador.
 Iluminar el campo microscópico.
 Colocar la muestra.
 Cubreobjetos de la muestra hacia arriba.
 Separar platina de objetivos.
 Colocar 1er aumento en “eje optico”

MANEJO DEL MICROSCOPIO

 Mirando lateralmente, se acerca platina y
objetivo, hasta 2 mm
 Se observa por el ocular, y se sube el
objetivo (baja la platina), por el T. macro
hasta encontrar imagen, afinar con T.
micro.
 Si se precisa mayor aumento, separar
objetivo de platina

MANEJO DEL MICROSCOPIO

 Si no se logra imagen, NO acercar platina
y objetivos mirando por el ocular.
 Terminado el proceso, guardar el
microscopio cubierto con un lienzo oscuro.
 Nunca limpiar las lentes con Xilol.

MANEJO DEL MICROSCOPIO