BACTERIOLOGIA

INTRODUCCION
 BACTERIOLOGIA: estudio de las BACTERIAS

ORGANISMO UNICELULAR PROCARIOTICO

(Célula procarionte: carente de núcleo definido)
• ESTRUCTURA (de afuera hacia adentro)
PRINCIPAL (célula bacteriana propiamente dicha)
1. PARED CELULAR
2. MEMBRANA CELULAR
3. CITOPLASMA
a) RIBOSOMAS
b) GRANULOS
c) VESCICULAS
d) REGION NUCLEAR (NUCLEOIDE)
ANEXOS
 CAPSULA
 FLAGELOS
 PILI o FIMBRIAS
 1- PARED CELULAR
FUNCIONES:
1- MORFOLOGIA CELULAR (mantiene la presión
osmótica) Esta pared es también la responsable del
mantenimiento de la forma de las bacterias y del
2- PROPIEDAD TINTORIAL (coloración de GRAM)
3- AUTO BIOSINTESIS
4- REPRODUCCION (interviene en la división celular)
5- SITIO DE DETERMINANTES ANTIGENICOS
 PARED CELULAR
CONSTITUCION
1. PEPTIDOGLUCANO (mucopéptido o mureína).
• Heteropolímero rígido e insoluble en agua
• Constituido por un soporte formado por N-acetilglucosamina y ácido N-acetil-murámico
alternantes, con cadenas laterales tetrapeptídicas idénticas, fijadas al ácido N-acetil-
murámico y un conjunto de puentes peptídicos transversos idénticos.
El soporte es el mismo en todas las especies bacterianas, pero las cadenas
tetrapeptídicas laterales y los puentes peptídicos transversos varían entre las
especies bacterianas.
Como se ha dicho anteriormente, las paredes de las bacterias grampositivas y
gramnegativas son diferentes química y ultraestructuralmente.

2. ACIDOS TEICOICOS
• Polímeros solubles en agua
• Constituídos por residuos de ribitol o glicerol unidos por enlaces fosfodiésteres.
• La mayor parte del ácido teicoico se encuentra entre la membrana citoplasmática y
la envoltura del peptidoglucano.
• Fijan el ion magnesio e intervienen en el suministro de este ion a la célula.
 Clasificación bacteriana: Por PROPIEDAD TINTORIAL
1- COLORACION DE GRAM
Cristal violeta (cloruro de hexametil-p-rosalina)
Lugol (yodo – yoduro de potasio)
Etanol – Acetona
Safranina
Gram (+) violetas (retienen 1er colorante)
Su pared celular es resistente por el contenido de ACIDOS TEICOICOS
Gram (-) rosadas (no retienen el 1er colorante)
Su pared celular se desintegra con el lavado con Etanol – Acetona, sale el
cristal violeta y permanece la safranina.
La desintegración se da por estar constituida por LIPOPOLISACARIDOS

2- ZIEHL-NEELSEN (bacterias acido alcohol resistentes – BAAR)

1- Carbol fucsina
2- Calentar hasta emisión de vapores
3- Decolorar con ClH-EtOH ó ClH-Acetona
4- Azul de metileno ó Verde de malaquita
BAAR (+) rosadas
Resisten la decoloración con ácido (son ACIDORRESISTENTES), porque su
pared celular tiene ACIDO MICOLICO
BAAR (-) azules
No resisten la decoloración con ácido
PARED CELULAR de bacterias GRAM (-)
• Más delgadas pero más complejas que las
paredes de las grampositivas.
• Presentan por fuera del peptidoglucano las
siguientes estructuras:
1- lipoproteína
2- membrana exterior (constituida por un
conjunto de proteínas específicas empotradas
en una matriz de fosfolípidos)
3- lipopolisacáridos.
 Bacterias Gram (-)
MEMBRANA EXTERIOR
• Doble capa de fosfolípidos en la cual una parte de estos, pertenecientes a la capa
más externa, han sido sustituidos por moléculas de lipopolisacáridos.
• La membrana exterior tiene una composición fosfolipídica semejante a la de la
membrana citoplasmática.
La membrana exterior de las bacterias gramnegativas contiene una gran cantidad de
proteínas, siendo las más significativas:
PORINAS se organizan en los poros o canales hidrofílicos y permiten el paso a través
de la membrana exterior de las bacterias esféricas a compuestos hidrofílicos con
P.M. inferior a 600-650 Da
PROTEINAS MAYORES NO PORINICAS (OmpA) participa en la fijación de la membrana
externa a la capa de peptigoglucano y se comportan como receptoras del pili
sexual en la conjugación bacteriana mediada por el pili F.
PROTEINAS MENORES(participan en la difusión de compuestos a través de la
membrana exterior transporte de pequeñas moléculas como la vitamina B12 y los
sideróforos con hemosiderina.
ENZIMAS (fosfolipasa A, proteasas)
La membrana exterior contiene también las denominadas proteínas menores, las
cuales poseen diferentes funciones, tales como el Además de las funciones antes
señaladas para las proteínas de la membrana exterior, se señala que participan
también en la replicación del ADN y en la división celular.
Debido al hecho de servir como barreras a la difusión de moléculas grandes, se le
atribuye en parte la gran resistencia de las bacterias gramnegativas a muchos
antibióticos.
 Bacterias Gram (-)
LIPOPOLISACARIDO (LPS)
• Es la molécula más característica de las bacterias Gramnegativas
• Principal endotoxina bacteriana, considerados así por su alta toxicidad
para los animales y por estar firmemente unidos a la superficie celular,
siendo sólo liberados cuando las células son lisadas.
• Consisten en un complejo lipídico denominado lípido A, al cual se fija un
polisacárido constituido por un centro y una serie terminal de
unidades repetidoras.
El LPS está fijado a la membrana exterior por enlaces hidrófobos.
La toxicidad está fundamentalmente ligada al lípido A y el polisacárido
representa un antígeno de superficie.
 MORFOLOGIA y ESTRUCTURAS BACTERIANAS

– Tamaños y formas
1- Cocos
• estreptococos (cadena) 2 um de diam.
• diplococos (de a 2)
• estafilococos (racimo) 0,5 a 1,5 um diam.
• sarcinas (tetradas de cocos)
2- Bacilos 1 um ancho x 4 um largo
• Cortos: cocobacilos
• Ahusados:fusiformes.
• Largos: filamentosos.
• Curvos: vibriones.
• Espiralares:Espiroquetas (Treponema, Borrelia y Leptospira)
Bacterias
MEMBRANA CELULAR (CITOPLASMÁTICA)
• Composición: Proteínas…………..60%
Lípidos………………20%
H. de carbono……10%
FUNCIONES:
Barrera osmótica.
Transporte específico
Receptores quimiotácticos.
Secrección proteíca.
Enzimas de biosíntesis y respiración.
Replicación de ADN.
 CITOPLASMA:
RIBOSOMAS
• I. de Sedimentación: 70 S
• Composición: PROTEINAS
ARN
• Subunidades:
30S: ARN 16S: 21proteínas (S1-S21)
50S: ARN 23S y 5S 30 proteínas (L31-L32).

ARN : dirige ensamblaje de partículas

Funciones:

*30S : Aminoacetilación- ARNt .

Decodificación ARN m
*50S : formación de uniones peptídicas.
 CITOPLASMA:
Inclusiones intracitoplasmáticas
Material de reserva:
• Glucógeno (enterobacterias)
• Polibetahidroxibutirato (bacilos)
• Polifosfato O gránulos de volutina (micobacterias, Y.
pestis, C.diphtheriae)
• Poliaminas: putrescina, espermidina.
Funciones :
• Antimutagénico
• Impiden disociación ribosomal.
• Resistencia de protoplastos a lisis osmótica.
• Estabilidad de polianiones (ácidos nucleícos).
 CITOPLASMA:
CUERPO NUCLEAR Ó NUCLEOIDE
• COMPOSICIÓN:
ADN ………………. 60%
ARN…………………30%
PROTEÍNAS………10%
• ESTRUCTURA CROMOSOMA:
Bases: adenina-timidina y citosina-guanina.
Hélice bicatenario y complementario circular
Cerrado covalentemente.
Superhelicoidal (< longitud y < orden estructural).
Topoisomerasas : I y II (ADN girasa)
 ANEXOS:
CÁPSULA
• FACULTATIVAS:
• NATURALEZA POLISACÁRIDA (GLUTAMIL
POLIPÉPTIDO- Bacillus anthracis)
Funciones:
• Antigénica y Antifagocítica
• Patogenicidad
• Colonias M, L yR
 ANEXOS:
FLAGELOS
• Apéndices filamentosos.
• Protéicos (subunidades de flagelina).
• Estructura: helicoidal, delgados y largos
Filamento – gancho - cuerpo basal (cilindro de 2 ó más anillos)
Funciones :
• Movilidad: giro helicoidal (E protón motora)
• Quimiotactismo (receptores de MB)
• Antigenicidad (Ag H).
Localización:
1. Perítricos (enterobacterias)
2. Polares (pseudomonales):
monótricas (1 flagelo)
lofótricas (1 penacho de flagelos)
anfítrica (2 penachos de flagelos)
 ANEXOS:
• FILAMENTOS AXIALES
Estructura: semejante a flagelos.
Localización: espacio periplásmico.
Rotación de filamentos: provoca un movimiento
particular (rotación bacteriana opuesta)
• PILIS Ó FIMBRIAS:
Microfibrillas protéicas (pilina)
2 tipos: Pilis somáticos(comunes)
Pilis sexuales
Funciones:
• Adherencia (colonización)
• Antigénica (variación: evasinas)
• Conjugación bacteriana
• Unión a bacteriófagos
 ESPORAS
• Géneros: Clostridium, Bacillus.
• Funciones: Resistencia. Diseminación.
• Formación:
1. Filamento axial
2. Tabique polar.
3. Cubierta.
ESPORA: estructura
• Núcleo:
ADN. Ribosomas. ARNt .
Enzimas.
• Cubierta
(integumento):
Membrana interna
Corteza
Capa interna
Capa externa
(Exosporium.
Lipoproteína).
 TOXINAS BACTERIANAS
• Sustancias solubles que alteran el metabolismo
normal de la célula huésped.
• Responsable de signos y síntomas de algunas
enfermedades bacterianas
• Exotoxinas: secretadas al medio
• Endotoxinas: LPS de BGN
• Pueden estar codificadas por fagos, ó plásmidos
• Actúan en forma local, y/o sistémica.
• Actúan a bajos niveles
• Inactivadas se llaman toxoides y se utilizan como
vacunas
Ejemplos: Toxina diftérica, colérica, tetánica,
botulínica, etc.
 El ESTUDIO BACTERIOLOGICO
1- Exámen en fresco (directo)
Coloración de Gram (eventualmente ZIHEL-NEELSEN)

2- Cultivo
3- Identificación del gérmen (PRUEBAS
BIOQUIMICAS)
4- ANTIBIOGRAMA
 El ESTUDIO BACTERIOLOGCO

1- Exámen en fresco (DIRECTO)

• Determina MORFOLOGIA y AGRUPACION bacteriana
• Puede orientar a la primera terapéutica (en URGENCIAS)
• Establece la respuesta inflamatoria (cantidad y tipo de células
en la muestra
 El ESTUDIO BACTERIOLOGICO
2- CULTIVO
• Repite in vitro las condiciones de desarrollo bacteriano que están
sucediendo in vivo (dentro del huésped)
• Consiste en intentar desarrollar a la bacteria en medios artificiales
(medios de cultivo) que contengan nutrientes adecuados
• Los principales son (en órden creciente de complejidad de composición)
– 1- Agar Nutritivo (el más básico)
– 2- Agar Sangre (agar nutritivo + sangre entera) (Streptococcus spp.)
– 3- Agar Chocolate (agar sangre desnaturalizado con calor) (para
bacterias que requieren Factor V u VIII de la sangre)
– 4- Medios enriquecidos (para bacterias con requerimientos
nutricionales complejos)
• Agar McConkey
• Agar SS (SALMONELLA / SHIGELLA)
• Agar infusión cerebro-corazón
• Agar bilis-esculina
• etc
 El ESTUDIO BACTERIOLOGICO
3- Identificación del gérmen ó Tipificación (PRUEBAS
BIOQUIMICAS)
• Clasifica (identifica) a las bacterias que han desarrollado en
el CULTIVO
• Son un conjunto (batería) de reacciones químicas entre una
colonia bacteriana y una sustancia química en particular.
• Se informan como POSITIVA o NEGATIVA y se va armando
un conjunto de resultados que se confrontan con Tablas
Estandarizadas
• Las más comunes son:
– IMVIC (Indol – Rojo de Metilo – Voges Proskauer –
Citrato) (para Gram (-))
– Catalasa (para diferenciar Stafillococcus spp. de
Streptococcus spp.)
– Optoquina
– Etc.
 El ESTUDIO BACTERIOLOGICO

4- ANTIBIOGRAMA
• Consiste en enfrentar a las bacterias que han crecido
en el cultivo a un conjunto de ANTIBIOTICOS (ATB)
• Determina el TRATAMIENTO
• Se informa como:
– SENSIBLE: cuando el ATB inhibe totalmente el desarrollo
bacteriano
– Medianamente SENSIBLE: cuando el ATB inhibe
parcialmente el desarrollo bacteriano
– RESISTENTE: cuando el ATB no inhibe el desarrollo
bacteriano
 ANTIBIOTICOS (antimicrobianos)
Son sustancias químicas producidas por diferentes
especies de microorganismos (bacterias, hongos, etc)
(ANTIBIOTICOS NATURALES)
o
sintetizados por métodos de laboratorio (ANTIBIOTICOS
SINTETICOS)
que inhiben o suprimen el
crecimiento de otros micro-organismos y pueden
eventualmente destruirlos.
Estos compuestos difieren marcadamente en sus
propiedades físicas, químicas y farmacológicas, así como
en su mecanismo de acción y espectro antimicrobiano