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Otras manifestaciones
Antiinflamatorios no
esteroideos
Antibacterianos
Antihistamínicos
5
Universidad Autónoma de Yucatán
Campus de Ciencias de la Salud
Facultad de Química
Dra. Fabiola Villa
Toxicología
ADA 3. Seminario:
Técnicas moleculares
EQUIPO VERDE
- Cortés Flores María Teresa
- Díaz Russell Julio Ismael
- Escamilla Tamayo Sandra Edith
- Mutul Pech Daniel Aldair
10/10/2019
- Pavía López Mauricio Humberto
- Poot Cocom Kassandra Marily
TÉCNICAS MOLECULARES
Técnicas de laboratorio que usan ADN, ARN o proteínas, para su el
aislamiento, extracción en alta pureza, visualización para conocer su
estado, para cortarlos y pegarlos, para la amplificación de una región en
una enorme cantidad de moléculas
En la Toxicología ...
La determinación de la viabilidad
Evaluación de la viabilidad celular es el conteo de las células
celular vivas (sanas) o muertas en una
muestra.
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CITOMETRÍA DE FLUJO
FUNDAMENTO
Una de las formas de evaluar la integridad de la membrana, es el uso de colorantes
de exclusión o colorantes de retención.
Las células vivas con membranas intactas → habilidad para excluir colorantes que
fácilmente penetran la membrana plasmática de células muertas o dañadas.
MÉTODO
La tinción de células no viables con
yoduro de propidio.
Protocolo P2
Muestras
Protocolo F2
Muestras
Protocolo F3
INSTRUMENTO
Citómetro de flujo Coulter EPICS XL Los resultados se obtuvieron
(Coulter Electronics, Hialeah, FL, EE. UU.). en forma de tres gráficos:
➔ Intensidad de luz de
Equipado con un láser de iones de argón fluorescencia lineal (FL),
refrigerado por aire sintonizado a 15 ➔ Dispersión de luz de
mW y funcionando a 488 nm. ángulo directo (FS) vs
dispersión de luz de
La fluorescencia emitida desde los ángulo lateral (SS)
núcleos se recogieron a través de un ➔ Pulso FL integral versus
filtro dicroico de paso largo 645 y uno altura de pulso FL.
de paso de banda 620.
RESULTADOS
Protocolo
F2
Figura 1 . Los citogramas de
la columna izquierda
muestran la dispersión de la
Protocolo
luz del ángulo frontal (FS)
F3
frente a la dispersión de la
luz del ángulo lateral (SS), los
histogramas de la columna
central muestran la
intensidad de la luz de
fluorescencia relativa (FL) del Protocolo
yoduro de propidio y los P1
citogramas de la columna
derecha muestran la integral
del pulso FL relativo vs.
altura relativa del pulso FL.
Protocolo
P2
RESULTADOS