Historia

Egipcios Fuego ... Esterilizar material infeccioso

Desinfectantes ... Embalsamaban cuerpos

Griegos Quemaban azufre ... Fumigar edificios

Hebreos Qemaban cuerpos cadáveres con lepra

Objetivos del control Microbiano

Destruir patógenos Reducir o eliminar m.o.

para prevenir su responsables de la
transmisión contaminación aguas,
alimentos etc.
 ESTERILIZACIÓN
latín “sterilis” (incapacidad de reproducirse)

Implica inactivación total de toda forma de vida, (esporas),virus en

términos de la capacidad del m.o. para reprodu
“Un objeto es estéril o no lo es”

“cida” acción letal

bactericida: agente (físico o químico) destruye bacterias

germicida ó desinfectante: sustancias químicas que

destruyen, ó eliminan, al menos, patógenos,
no esporas

“stasis” inhibir el desarrollo ó la multiplicación de m.o.

bacteriostático: previene el desarrollo de bacterias

“Antiséptico opone a la sepsis ó putrefacción, (letal o impide el

desarrollo de m.o. (agentes tópicos)
 Dinámica de la Esterilización y la
Desinfección

Índice de la letalidad de los microorganismos

Muerte...pérdida irreversible (reproduccion y crecimiento)

en un medio adecuado (recuento nºsobreviv.)

Cinética de destrucción de una población microbiana

Es exponencial ó logarítmica y el nº de sobrevivientes en

función del tiempo, (linea recta pendiente -).

La población se reduce
en niveles iguales a
intérvalos constantes
 K = nº real de sobrevivientes = log B

B= nº inicial de m.o.
b= nº que queda después del tiempo “t”

Mayor nº células a destruir +++ intenso y prolongado tratam.

y la velocidad de desinfección .... concentración desinfectante
 Condiciones que influyen sobre la eficacia
de un agente antimicrobiano

Tamaño de la población microbiana

mayor población más tiempo para destruirla

Naturaleza de los m.o.

endosporas bacterianas + resistentes que célula vegetativa
bacteria jóven + sensible que la bacteria vieja
M. tuberculosis, más resistentes que otros

Concentración del agente antimicrobiano

mayor concentración del agente, mayor destrucción
Etanol del 70% es + eficaz que etanol de 95%

Duración de la exposición
más tiempo de exposición al agente, ++++ m.o. se destruirán

Temperatura
La actividad de los agentes, aumenta con la temperatura
 Ambiente local
el calor + eficaz a pH ácido que a pH básico.

 Presencia de materia orgánica.

Protege a los m.o frente al calor y desinfectantes químicos

Control microbiano por agentes Físicos

 Calor
 Congelación
 Radiación
 Vibraciones
 Filtración
 CALOR

Húmedo Seco

Es el método más confiable, difundido mundialmente

Tiempo de Muerte Térmica (TMT):

El tiempo mínimo necesario para destruir una suspensión
microbiana a una temperatura específica y en condiciones
definidas.
No es posible destruir completamente todo

Tiempo de reducción decimal (D):

Tiempo necesario para destruir el 90% de los m.o. ó sus
esporas en una muestra, a una temperatura específica.
El valor “D”: es el tiempo necesario para que disminuya la
población en un logaritmo (10 veces). Útil en industria alimentos
Enlatados (esporas Cl. botulinum)
 CALOR SECO
Formas: incineración, horno Pasteur (160-180ºC- 2-3 horas)

Usos: materiales de vidrio, polvos, gelatinas, aceites y metal

Mecanismo de la esterilización por calor seco

Desnaturalización proteica, oxidación y efectos tóxicos

(concentración elevada de electrolítos)

Número de grupos polares sobre las cadenas peptídicas

disminuye y se requiere más energía para abrir la molécula

Ventajas del calor seco

No corroe utensilios de cristal, ni metálicos

Desventajas (Mayor tiempo y temperaturas más elevadas)

 Inapropiada (goma, plásticos)
 Dest. endosporas de Cl. botulinum 2 h -160ºC (seco)
5min-121ºC (húmedo)
 CALOR HÚMEDO

Formas Ebullición
Calor húmedo discontinuo: “Tindalización “
Vapor por presión (Autoclave de Chamberland)
Pasteurización

Usos:Todo tipo de materiales, bacterias, c/ sin esporas,

hongos y virus
Temperaturas supriores a 100ºC (121ºC-15-20 min).

Mecanismo de lesión térmica

 Acción letal es más rápida y mejor penetración (agua)

 Ruptura y degradación del ADN
 Pérdida de integridad de la membrana,
 Filtración de moléculas
 Desnaturalización enzimas y coagulación de proteínas
 VAPOR POR PRESIÓN (autoclave)

Chamberland (1884)

 121ºC x 15 lbs. presión x 20 min (muestras pequeñas)

 Continuar 15 min. (muestras grandes)
 Destruye bacterias patógenas y esporas (penetración agua)
 Acción letal rápida
 AUTOCLAVE
AUTOCLAVE
Observaciones: AUTOCLAVE

Si no se extrae todo el aire de la cámara no se alcanzará

la temperatura adecuada (121ºC)
Debe retirarse todo el aire de la cámara (Purga)
Contenedores deben estar separados y no muy llenos
Ebullición
100 ºC . destruye células vegetativas, No esporas
Usos: agua potable, y objetos. No esteriliza

Tindalización
(80 a 100 °C x 30 min x 3 días )
Método fraccionado de esterilización
Usos: materiales líquidos o semisólidos que son destruidos
por el calor (huevo, suero, hidratos de carbono)

Pasteurización
Usos: esterilizar leche, cerveza, vinos y otras bebidas,
vacunas bacterianas

Temperaturas de Pasteurización de la leche

62ºC x 30 min. Normal seguido enfriamiento rápido
72ºC x 15 seg. HTST alta temperatura, tiempo corto
140-150ºC x 1-3 seg. UHT temperatura ultraelevada
 Congelación
Esterilización: no confiable, reduce crecimiento m.o
pero no lo detiene

Aplicación: conservación cultivos bacterianos por largos

períodos de tiempo

Mecanismo de lesión
Lesión de la membrana celular
pérdida de compuestos orgánicos intracelulares
cristales de hielo fuera de la célula, salida agua
electrolitos intracelular
 Desnaturalización de proteínas
 Congelación con rapidez (-35C) ...cristales dentro célula
efecto letal durante la descongelación
 M.O no se multiplican (-20ºC) por ausencia de agua libre
 Radiaciones

Luz solar ,,,, efecto bactericida (rayos ultravioleta)

Radiaciones Ultravioleta
No penetra alimentos, agua, cristal, suciedad (No confiable)

Longitud de onda bactericida.... 240-280 nm (optimo 260 nm)

Principal mecanismo es la formación dímeros de Timina (ADN)

Distorsion DNA y apareamiento anormal bases
Producción de peróxidos (agentes oxidantes)

 Longitud de onda UV (325 y 400 nm) ...daña m.o. ..induce

degradación triptófano fotoproductos tóxicos .
..rotura hebras ADN
 Usos de las radiaciones UV
Control de infecciones transmitidas por el aire
Desinfección de áreas cerradas (sala de quirófano de
hospitales), cabinas de seguridad biológica
Radiaciones Ionizantes
 Longitud onda muy cortas, más que los UV (alta Energía)
átomos pierdan electrones (ionicen)
 producen destrucción del ADN, mutaciones (muerte)
 Agente esterilizante excelente. Penetra objetos
 Eliminan endosporas y células vegetativas, No virus

a) Rayos x: se producen artificialmente

b) Rayos gamma: se emiten durante la desintegración de
radioisotopos (cobalto 60)

Esterilización al frío
Usos: esteriliza carne y enlatados y objetos
sensibles al calor (agujas, jeringas, catéteres, sondas
guantes, hormonas, antibióticos y suturas )
 Vibraciones Sónicas y Ultrasónicas
Útil ruptura células quedan muchos sobrevivientes
Generadores operan a 20-1000 kc/seg
Carecen valor esterilizante, ondas ultrasónicas +++ efectivas

Mecanismo de acción

Despolimerización de macromoléculas

Reagrupamientos intramoleculares

Ruptura de dobles cadenas en el DNA

Producen cavidades dentro de los líquidos

Formación de peróxido de hidrógeno (si existe 0 2)

Bact. Gram (-) ++++ sensibles y Staphylococcus - sensible

 FILTRACIÓN

Usos: materiales termolábiles líquidos,( suero, plasma )

Filtros:
 Dispositivo porosos que impiden el paso de bacterias
 0,3 m a 10 m de diámetro
 existen diversos filtros. (diferencias tamaño del poro)
 + emleado es de 0,22 m
 Tipos de Filtro
 Profundidad (placa fibrosa, asbesto o fibra de vidrio).
 De membrana (acetato o nitrato de celulosa).
 Nucleoporo (Huella de nucleación). Película de policarbonato

Profundidad Membrana Nucleoporo

Profª. Rosanna Citti de P.