Stratégies de l’exploration

biologique hématologique

MODULE A
OPTION « MO21 - STRATEGIE DES EXAMENS DE LABORATOIRE »
(DFASM 2 et 3)

4 Mars 2019
Pr. R Herbrecht
Pr. L Mauvieux
Examens de laboratoire hématologiques

• Large panel d’analyses

– Examens de routine, systématiques, automatisés
– Examens plus spécialisés, manuels
– Voire très spécialisés, manuels ou automatisés

• Exploration transversale:
– maladies hématologiques
– non hématologiques avec retentissement sur les
différentes lignées sanguines
 Les différents prélèvements
Laboratoire d’hématologie

SANG
NFS ou hémogramme
Frottis sanguin MOELLE OSSEUSE
Myélogramme
GANGLION (adénopathie)
Ponction gg LIQUIDES

Biopsie gg de Ponction Biopsie médullaire

BIOPSIES
Chirurgicales ou à l’aiguille

Service d’anatomopathologie
 Exploration de l’hématopoïèse

 Examens morphologiques: NFS, cellules différenciées, Se 10-2

myélogramme, adénogramme,
liquides…
 Examens immunologiques: tout type de cellules, Se 10-2/10-3
Cytométrie-Phénotypage
Examens spécialisés d’onco-hématologie

 Examens cytogénétiques: tout type de cellules, Se 10-2

caryotype, FISH

 Biologie moléculaire: PCR, seq tout type de cellules, Se 10-4 /10-5

 Cultures cellulaires: Seul moyen d’étude des progéniteurs

1. Examens morphologiques
 Hémogramme
 Myélogramme
 BOM
1.1 Hémogramme
Quels prélèvements?
Pourquoi?
 SANG : hémogramme
 Tube EDTA
 Réalisation d’une
numération des éléments
figurés du sang
 Réalisation de la formule
sanguine
• Automatisée
• Frottis sanguin
• Coloration habituelle : May-
Grunwald Giemsa (MGG)
• Lecture au microscope
 Hémogramme : définition

Analyse quantitative et qualitative des éléments figurés du sang

 Décompte des GR, GB, et plaquettes par unité de vol de sang

(numération)

 Décompte des ≠ sous-types de GB (formule sanguine)

 Analyse morphologique de ces éléments (frottis sanguin)

 Analyse automatisées: compteurs de cellules

-Haut débit horaire

- Confirmation technique puis validation biologique
-~20 à 30% de frottis sanguins demandés en raison d’anomalies
détectées
 Frottis sanguin
• Technique
– Étalement d’une goutte de sang sur une lame
– Coloration May-Grünwald-Giemsa (MGG)
– Analyse au microscope
• Indications
– Diagnostic d’anomalies morphologiques
• Des GR
• Des GB
• Des plaquettes
– Recherche et identification de cellules
anormales
• myélémie, blastes
• cellules lymphomateuses
• Schizocytes, drépanocytes…
– Vérification du nombre de plaquettes++
 Indications de l’hémogramme
!
EN URGENCE
devant des signes évocateurs d’une diminution d’une ou plusieurs lignées

 État de choc
GR
 Pâleur intense
 Angine ulcéro-nécrotique ou résistante aux
antibiotiques
GB
 Fièvre élevée après prise de médicament, surtout
après chimiothérapie anti-mitotique
 Fièvre résistante aux antibiotiques
 Purpura pétéchial avec syndrome hémorragique Plq
 Indications de l’hémogramme
En dehors d’une situation d’urgence, les indications sont très
nombreuses :
• 1) Anomalie avec symptomatologie:
– Syndrome tumoral (adénopathie, hépato-splénomégalie)
– AEG
– Hémorragie
– Infection
– ictère
– Thromboses…

• 2)En l’absence de syndrome, de façon systématique :

grossesse, médecine du travail, bilan préop…

A PRESCRIRE AVANT TOUTE THERAPEUTIQUE POUVANT EN

MODIFIER LES DONNEES ET L’INTERPRETATION
 Interprétation d’un hémogramme

Connaître :

 Définitions des anomalies

 Quantitative
 Qualitative

 Valeurs normales et unités

 GB et valeurs absolues+++
!
 Variations physiologiques
(âge, sexe, ethnie…)

 ATCD et terrain du patient

Quels seuils représentent des urgences immédiates?

anomalies risques
blastes > 50 000 / mm3 thrombose / Leucostase
Hte > 47 % (f) ou 54% ( h) thrombose
plaquettes > 1 000 000 /mm3 thrombose / hémorragie
PNN < 500 /mm3 choc septique
anémie mal tolérée hypoxie (territoire coronarien, cerébral..)
plaquettes < 20 000 / mm3 hémorragie
1.2 Myélogramme
Quels prélèvements?
Pourquoi?
 MOELLE OSSEUSE : Myélogramme
 Sites : sternum, os iliaque
 Réalisation :
- Anesthésie locale (Xylo+/- (EMLA)) parfois générale
(enfant) (Entonox)
- Désinfection
- Ponction à l’aide d’un trocart
Frottis (MGG)
Prélèvements autres (phénotype, cytogénétique, biologie
moléculaire, cultures…)
 Indications du myélogramme
• Suspicion d’une atteinte la moelle osseuse
– Cytopénies ou hypercytoses non expliquées:
• Anémies, thrombopénies, neutropénies, hyperleucocytose,
polyglobulie, thrombocytose…
• Présumées centrales+++ (anémies régénératives= NON).
– Présence de cellules anormales dans le sang périphérique
• Blastes, éléments dysplasiques
• Lymphocytes pathologiques (immunophénotypage)
– Suspicion d’envahissement
• Leucémie aiguë
• Pathologies lymphoïdes (myélome, Sd lymphoprolifératifs)
• Métastases…

• Prélèvement pour examens complémentaires

– Caryotype, immunophénotype, bio mol, myélocultures
 Analyse du myélogramme
1ère étape: faible grossissement X10 :
Richesse globale
Logettes graisseuses

Mégacaryocytes

Caractère polymorphe ou non

Infiltrat +/- massif

Repérage de cellules rares

Amas de cellules métastatiques, grandes cellules….

2ème étape : moyen (x50) et fort (x100) grossissements :

Etude morphologique qualitative et quantitative
Morphologie fine des lignées hématopoiétiques myéloïdes et lymphoïde
Décompte cellulaire (proportions relatives)

Cellules rares
1.3 Biopsie ostéo-médullaire
Quels prélèvements?
Pourquoi?

Biopsie OstéoMédullaire ou BOM

 Site : Os iliaque (EIP+++, EIA si besoin)
 Réalisation +/- prémédication :
- Désinfection stricte
- Anesthésie locale soigneuse par xylocaïne à 2% des plans
cutanés, sous-cutanés et du périoste
- Prélèvement d'une carotte ostéo-médullaire d'environ 2 cm de
long à l’aide d’un trocart
- Appositions éventuelles pour étude cytologique
Fixation, décalcification, coupes
Colorations (cellules, charpente), immuno-histochimie
 Indications et interprétation de la BOM
Indications :
- Aplasie
- fibrose
- bilan d’extension LNH
- SMP…

Analyse :
→ Appréciation de l’ architecture médullaire
→ Quantification du degré de fibrose
→ Envahissement nodulaire (lymphomes/ métastases…)

Délai de réponse = minimum 48h

 Avantages-Inconvénients
Myélogramme/BOM

Myélogramme BOM
= cytologie = histologie
Facilité +++ +
Cellules +++ +
Délai rendu +++ +
Richesse + +++
Fibrose - +++
Architecture - +++
CI Sternotomie Plq < 50 G/L
RX Troubles
caogulation
Quels prélèvements?
Pourquoi?
 Ganglions
 Adénogramme (ponction) : frottis

 Biopsie chirurgicale : appositions

 Liquides de ponction
(LCR, Pleural, ascite…)
 Aspect macroscopique

 Numération & Cytocentrifugation

 Tumeurs (rate, peau, masse…)

 Ponction guidée : frottis

 Biopsie chirurgicale: empreintes

2. Immunophénotypage
 TUBE
Cytométrie en Flux EDTA

 Principe : Analyse rapide d’une grande quantité de cellules en suspension,

préalablement marquées par des Ac couplés à des fluorochromes , dirigés contre
des Ag spécifiques d’une lignée cellulaire et d’un niveau de différenciation
→ Etude de l’expression de marqueurs de surface ou cytoplasmique (CD) par la
mesure de l’intensité de Fluorescence des cellules (MFI)

 Indications :
- Diagnostic (blastes, lymphomes, HPN…)
- Classification (Score de Matutes)
- Pronostic (CD38, ZAP70)
- Thérapeutique (CD20, CD52, CD33…)
3. Cytogénétique
 TUBE
HEPARINE
• Caryotype conventionnel
Etude des anomalies de nombre ou de • FISH
structure des chromosomes Détection d’anomalies spécifiques par
sonde fluorescentes

FISH interphasique BCR-ABL

→ Intérêt diagnostic et pronostic

4. Biologie moléculaire
Examens très spécialisés demandés en TUBE EDTA
milieu hématologique : sensibles +++

• Techniques multiples : PCR, CGH, séquençage haut

débit…

• Recherche d’anomalies à l’échelon du nucléotide :

– Transcrits de fusion (ex BCR-ABL)
– Mutations (ex JAK2 V617F)
– Etude de la clonalité lymphoïde…

→ Intérêt diagnostic et pronostic, et thérapeutique

(molécule ciblées)
5. OBSERVATIONS
 Seuils pathologiques
Anémie
– homme Hb < 13,5 g/dL
– femme Hb < 12,5 g/dL
– femme enceinte Hb < 11,5 g/dL
– à la naissance Hb < 13,5 g/dL
– de la naissance à 6 ans Hb < 11,5 g/dL
– de 6 ans à 14 ans Hb < 12,5 g/dL
Microcytose adulte VGM < 82 m3
Macrocytose VGM > 98 m3
Hypochromie CCMH < 32 %
Hyperréticulocytose Réticulocytes > 120 000 x 106/L
 Seuils pathologiques
Plaquettes
Thrombopénie < 150 000 x 106/L = 150 G/L
Thrombocytose > 450 000 x 106/L = 450 G/L

Globules blancs
Neutropénie < 1 500 x 106/L (1,5 G/L)
Polynucléose neutrophile > 7 000 x 106/L
Éosinophilie > 800 x 106/L
Basocytose > 100 x 106/L
Lymphopénie < 1000 x 106/L
Lymphocytose > 4 000 x 106/L
Monocytopénie < 100 x 106/L
Monocytose > 1000 x 106/L
 Observation 1

Femme de 27 ans
GR 4,5.T/L
Hb 10 g/dL
Hte 34% Anémie microcytaire
VGM 75 fL hypochrome
TCMH 26pg
CCHM 29 g/dL
réticulocytes 40 G/L
GB 5,4.1G/L, formule normale
plaquettes 200.G/L

• Quel est le mécanisme de l'anémie?

défaut de synthèse de l'hémoglobine
• Quel est l'examen à demander en premier?
bilan martial (ferritine+++)
Stratégie diagnostique initiale devant une anémie

1) l'anémie est microcytaire +/- hypochrome et non

régénérative

• il s'agit d'un défaut de synthèse de l'hémoglobine

• les réticulocytes sont normaux (sauf traitement ou mécanisme

associé)

• l'examen à demander en premier est un bilan martial

 Bilan martial
Si anémie et VGM (<80fL) + TCMH (<27%)

• (Fer sérique (< 5 µmol/l) [9 - 28 µmol])

• Coefficient de saturation de la transferrine

– Élevé ou normal: exclut la carence martiale
– Abaissé (<16%) : carence martiale
• Variations nycthémérales
• Variations selon les situations cliniques

• Ferritine (< 10 mg/ml) [15 à 260 ng/ml]

–  dans syndrome inflammatoire ou si atteinte hépatique, hyperthyroïdie

• Récepteur soluble de la transferrine

– Augmente proportionnellement à la carence
 cellules souches
anémie microcytaire
BFUE, CFU-E
mécanisme 1
aplasie, envahissement

proérythroblaste (pro-EB)
mécanisme 2
érythrobastopénie

EB. basophile

mécanisme 3 : défaut
EB. basophile de synthèse de l’Hb

mécanisme 4 : défaut de
synthèse de l’ADN
EB. polychromatophile

mécanisme 5
EB acidophile (énucléation) dysérythropoièse

mécanisme 6
raccourcissement de la réticulocyte
durée de vie des GR 24-48 H

120 j
hémolyse hématie 24 à 48 H
physiologique
 Observation 2
Homme de 45 ans
GR 3 T/L
Hb 10,3 g/dL
Hte 32%
VGM 106 fL
CCHM 32 g/dL
réticulocytes 150 G/L
leucocytes, formule normaux
plaquettes 175.G/L

• Quels sont les caractères de cette anémie?

macrocytaire, normochrome, régénérative
• Quels sont les mécanismes possibles d'une telle anémie?
hémolyse, hémorragie aiguë récente,
réparation d'une anémie centrale
• Pourquoi les réticulocytes sont-ils augmentés?

augmentation des érythroblastes due à l'augmentation de la

sécrétion d'érythropoiétine

• Pourquoi l'anémie est-elle macrocytaire?

- du fait de la grande taille des réticulocytes

- parce que l'érythropoiétine fait diminuer la durée de

maturation et donc le nombre de mitoses (CCHM normale
atteinte plus vite)
Stratégie diagnostique initiale devant une anémie

2) l'anémie est régénérative

il faut rechercher :
– une hémorragie aiguë récente
– une hémolyse (haptoglobine, bilirubine NC)
– une anémie d'origine centrale en cours de
réparation
 cellules souches
anémie régénérative
BFUE, CFU-E
mécanisme 1
aplasie, envahissement

proérythroblaste (pro-EB)
mécanisme 2
érythrobastopénie

EB. basophile

mécanisme 3 : défaut de
synthèse de l’Hb
EB. basophile

mécanisme 4 : défaut de
synthèse de l’ADN
EB. polychromatophile

mécanisme 5
EB acidophile (énucléation) dysérythropoièse
mécanisme 6
réticulocyte
raccourcissement de la
durée de vie des GR
24-48 H

120 j
hémolyse hématie 24 à 48 H
physiologique
 anémie Causes
Causes corpusculaires
régénérative extracorpusculaires
Anomalies de la membrane Immunologique
- Sphérocytose -incompatibilité
- Elliptocytose foetomaternelle
- Pyropoikilocytose
-auto-immune
-médicamenteuse
-accident transfusionnel

Infectieuse
et parasitaire

Hb Mécanique:
Drépanocytose -PTT, SHU
Thalassémies -malformation cardiaque

Enzymopathies
Déficit G6PD Toxique:
Déficit PK -champignons
-venins
-CCl4
 Observation 3
femme de 70 ans, ATCD cancer du sein
GR 3T/L
Hb 10,3 g/dL
Hte 32%
VGM 106 fL
CCHM 32 g/dL
GB et formule normaux
plaquettes 175.109/L

• Quel est le mécanisme de cette anémie?

on ne peut pas le savoir car on n'a pas les réticulocytes

• Les réticulocytes sont à 40G/L. Quel est le mécanisme de cette anémie?

central (insuffisance médullaire) car réticulocytes abaissés

• Quels autres examens sont nécessaires pour interpréter ces résultats?

• Taux de B12 et Folates : éliminer une carence vitaminique
→ normaux.
• Bilan martial : éliminer une éventuelle carence associée.

• Myélogramme (avec prélèvement pour la cytogénétique)

– Dysmégacaryocytopoèse avec mégacaryocytes au noyau peu lobé,
anormaux
– Dysgranulopoïèse : Hypogranularité de la lignée granuleuse;
– Dysérythropoièse (voir images)

 Quel est le diagnostic le plus probable?

 Syndromes myélodysplasiques

• hémopathies clonales acquises de la cellule souche

hématopoïétique médullaire, avec prolifération excessive de
progéniteurs myéloïdes qui se différencient de manière
anormale (= dysmyélopoïèse).
• Apoptose excessive des précurseurs aboutit à un défaut de
production et à des cytopénies périphériques (=hématopoïèse
inefficace).

• Caryotype : Facteur Pronostic +++

Score IPSS (blastose, cytopénies, CG)
Stratégie diagnostique initiale devant une anémie

3) l'anémie est normocytaire ou macrocytaire,

normochrome, non régénérative

c'est la seule situation où il faut demander un

myélogramme, mais seulement après avoir écarté un
certain nombre de causes!
(carence vitaminique, intoxication alcoolique,
médicaments,Hypothyroïdie…)
 cellules souches
anémies normo
ou macrocytaires BFUE, CFU-E
mécanisme 1
non régénératives aplasie, envahissement

proérythroblaste (pro-EB)
mécanisme 2
érythroblastopénie

EB. basophile
mécanisme 3 : défaut de
synthèse de l’Hb

EB. basophile
mécanisme 4 : défaut
de synthèse de l’ADN
EB. polychromatophile

mécanisme 5
EB acidophile (énucléation) dysérythropoièse

mécanisme 6
raccourcissement de la réticulocyte autres : I. rénale (NC)
durée de vie des GR I. endocrinienne
24-48 H
alcool (MC)
120 j
hémolyse hématie 24 à 48 H (myélogramme
physiologique
+
non indiqué)
 DIAGNOSTIC DES ANEMIES NORMOCYTAIRES
NON REGENERATIVES

anémie normocytaire normochrome non régénérative

neutrophiles et plaquettes normaux neutropénie et/ou thrombopénie

éliminer :
insuffisance rénale
syndrome inflammatoire
hémodilution
insuffisance endocrinienne

SINON MYELOGRAMME

moelle envahie érythroblastopénie myélodysplasie moelle pauvre ou normale

biopsie médullaire(aplasie,myélofibrose)
 DIANOSTIC DES ANEMIES MACROCYTAIRES
NON REGENERATIVES

anémie macrocytaire normochrome non régénérative

neutrophiles et plaquettes normaux neutropénie et/ou thrombopénie

VGM < 110 Fl

éliminer
éliminer : VGM > 110 fL hypertension portale
alcoolisme chronique
insuffisance endocrinienne (TSH)
SINON SINON
N

MYELOGRAMME

moelle envahie myélodysplasie carence B12/folates moelle pauvre ou normale

biopsie médullaire
(aplasie, myélofibrose)
 Observation 6
Enfant, 8 ans, polyADP, asthénie

GR 5,2.1012/L
Hb 15 g/dL
Hte 49,4%
VGM 94 fL
CCMH 32 g/dL
TCMH 30 pg

GB 35.109/L
P. neutrophiles (PN) 10% soit 3,5.109/L
P. éosinophiles (PE) 1%
P. basophiles (PB) 0%
lymphocytes 80% soit 28.109/L hyperlymphocytose
monocytes 4%

Plt 300.109/L
• Hypothèses diagnostiques

• Leucémie aigue ? :
– hyperleucocytose
– cellules circulantes en excès mais non blastiques(« lymphocytes »)
 NON
• Syndrome mononucléosique
– Adénopathies
– Lymphocytes hyperbasophiles

• Examens complémentaires
MNI test confirmé par une sérologie EBV
 Mononucléose infectieuse
 Aspect cytologique
Frottis sanguin:
-Présence de lymphocytes
hyperbasophiles
-Présence de cellules lymphoïdes de
grande taille
-Polymorphisme des lymphocytes
 Hyperlymphocytoses:

- Age +++
- Contexte +++
=> virose?: contexte,sérologies
=> syndrome lymphoprolifératif (>60 ans +++)?
– Aiguë? Chronique? (>3 mois)
– Présence de lymphocytes pathologiques? (frottis)
– Syndrome tumoral (gg, splénomégalie)?
 Observation 7
• Homme de 49 ans sans antécédents notables
Opéré pour péritonite post appendiculaire
Au décours de l ’intervention fièvre à 39.5°C

• Numération sanguine: • Formule sanguine:

– GB 39.400 – PNN 84% =>33.340/mm3
– Hb 11,4g/dl – PNE 0.4% =>100/mm3
– GR 3.8M/mm3 – Monocytes2.8% =>2400/mm3
– Hte 30% – Lymphocytes 2% =>788/mm3
– VGM 92 µ3 – Métamyélocytes 3%
– TCMH 28 pg – Myélocytes 7%
– CCMH 32%
– IDC 22.5% Anémie normochrome normocytaire
– Plaquettes 470 G/L
Polynucléose neutrophile + myélémie +
monocytose
Discrète thrombocytose
• Hypothèses diagnostiques

– Infection:
• contexte clinique
• fièvre
– Syndrome myéloprolifératif
• contexte+++ (CHRONICITE!!!)

• Examens complémentaires
bilan infectieux orienté:
VS CRP
Hémocultures
drains...
 Observation 8
• Homme 59 ans, hypertendu, consulte pour fatigue, perte de poids et
pesanteur de l ’hypochondre gauche. Pas de fièvre.
A l ’examen, splénomégalie palpable à 2 travers de doigt. RAS par ailleurs.
• Formule:
• Numération:
29.400 GB PNN : 71% (20.870 /mm3)
4.80 1012 GR PNE: 3% (880 /mm3)
13.9g/dl Hb
PNB : 9% (2600 /mm3)
Hte 42%
VGM 86.4 Ly: 8% (2350/mm3)
TCMH 29 Mono: 2% (590 /mm3)
CCMH 36 g/100ml
IDC 16.2 Métamyélocytes: 2% (590 /mm3)
Plaquettes: 545.000 Myélocytes 4% (1180 /mm3)
Blastes 1% (290 /mm3)
Hyperleucocytose : Polynucléose , myélémie, 1% blastes circulant, Basophilie
Thrombocytose
• Hypothèses diagnostiques

– Infection:
• contexte clinique
• fièvre
– Syndrome myéloprolifératif
• contexte+++ (CHRONICITE!!!)

•Symptômes à rechercher
- Syndrome infectieux? Pour écarter une
polynucléose réactionnelle mais basophilie
- Hépato-splénomégalie?
 Orientation diagnostique

On s ’oriente vers un syndrome myéloprolifératif

– LMC?
– Autre syndrome myéloprolifératif?
– => consultation spécialisée
• CONFIRMER LE DIAGNOSTIC
• EXAMENS COMPLEMENTAIRES +++ :
- Cytogénétique
- Biologie moléculaire
Résultats du myélogramme : Richesse augmentée

Lignée granuleuse : Hyperplasique, sans hiatus de maturation

PN : 40%
PNE : 2%
PNB : 1%
Métamyélocytes neutrophiles : 25%
Myélocytes neutrophiles : 26%
Promyélocytes 7%
Myéloblastes 1%
Blastes 3%
Monocytes 2%
Lymphocytes 2%
Lignée érythroblastique :
Erythroblastes basophiles 1%
Erythroblastespolychromatophiles1%
Erythroblastes acidophiles 2%

Mégacaryocytes présents souvent hypolobés

 Diagnostic(s) possible(s) et examens demandés

Myélogramme : Aspect cytologique suspect de leucémie myéloïde

chronique en phase chronique

→Examens complémentaires indispensables pour confirmer

l’hypothèse cytologique :

– Caryotype : mise en évidence du chromosome Philadelphie

affirme le diagnostic
recherche d ’autres anomalies associées

– Biologie moléculaire : recherche et quantification du transcrit

de fusion BCR/ABL
 affirme le diagnostic
 Intérêt dans le suivi (très sensible par PCR)
LMC – Diagnostic
 Suivi biologique des patients

• Hémogramme (réponse hématologique)

• Caryotype (réponse cytogénétique)

– évaluer la réponse cytogénétique
– détecter anomalie surajoutée au cours de l ’évolution

• Biologie moléculaire: (réponse moléculaire)

suivi de la maladie résiduelle par PCR quantitative
 Augmentation des éléments du sang

• PNN + myélémie :
– Infection? Médicaments?? Contexte+++
-importance myélémie
– Syndrome myéloprolifératif (SMP)?
-blastes?
 CRP, PCT..
-Basophiles?

• Thrombocytose :
– Contexte +++: infection? Carence en fer? Syndrome inflammatoire?
Splénectomie? Corticothérapie au long cours???
– SMP?: splénomégalie, autres anomalies NFS
 Bilan martial, CRP…

• Augmentation de l’Hémoglobine :
– Insuffisance respiratoire? Cardiopathie? Tumeurs secrétant de l’Epo???
– SMP?:
 Gazométrie, Dosage Epo, JAK2
 Observation 9
• Mme. R, 42 ans. Antécédents: néphrectomie; 2 transplantations rénales
Hospitalisée pour fièvre après la 2ème transplantation, séroconversion CMV, sous Bactrim
préventif et 2 semaines après :

• HEMOGRAMME
Globules Blancs 1.7 G/l
Globules rouges 3.47 T/l
Hémoglobine 11.9 g/dl Agranulocytose
Hématocrite 36.0 %
VGM 103.7 fl Anémie macrocytaire
TCMH 34.4 pg normochrome
CCMH 33.1 %
IDC 15.9 %
Plaquettes 233 G/l
VPM 7.8 fl
Formule leucocytaire: % 109/l
Poly neutrophiles 8 0.14
Poly éosino 15 0.26
Poly baso 1 0.0
Lymphocytes 32 0.54
Monocytes 44 0.75
• Myélogramme:
– Moelle riche
– Présence des lignées:
• érythroblastique
• mégacaryocytaire
• Augmentation des monocytes (10%).
Il s’agit d’une agranulocytose
toxique consécutive à la prise
de Bactrim® et qui a été
arrêté 2 semaines environ
avant la réalisation de
l ’hémogramme.

– Lignée granuleuse:
• myéloblastes présents, promyélocytes présents,
• rares éléments matures: blocage de maturation
 Agranulocytose toxique

• Ce que l’on observe dans le sang:

– neutropénie sévère
– présence de monocytes: témoin d ’une réparation en
cours.

• Moelle osseuse:
– prédominance d ’éléments jeunes et de monocytes.
 Observation 10

• Charlotte F., étudiante en histoire, sans aucun passé médical, vous

consulte pour son ordonnance de renouvellement de sa
contraception. Elle est fatiguée et se plaint de ménorragies.

• L’examen est normal en dehors d’ecchymoses récentes aux

membres inférieurs liées d’après la patiente à une chute de vélo.

• La NFS que vous préférez contrôler en même temps que son bilan
de contraception montre les résultats suivants :
 • Hb 10,1 g/dl
• VGM 106 µ3
• réticulocytes 23 G/L
• Leucocytes 2,6 G/L dont Pancytopénie
 10% de neutrophiles,
 82 % de lymphocytes
 8 % de monocytes,

• Plaquettes 12 G/L.

• Comment analysez-vous la numération?

• Compte tenu du contexte clinique, quelles sont vos hypothèses

diagnostiques?
 Etiologies d’une pancytopénie

• Aplasie médullaire
• Envahissement : Leucémie aiguë+++…

 Quels examens complémentaires

demandez-vous?
Myélogramme :
Penser à prélever en plus un tube pour
- Immunophénotypage (typage blastes)
- Cytogénétique (diagnostic/ pronostic) et biologie
moléculaire (diagnostic/ pronostic)
Moelle ENVAHIE
 LEUCEMIE AIGUË (LA) : DEFINITION
• Prolifération + blocage de différenciation de cellules immatures
non fonctionnelles (blastes)
• lignée et stade de blocage variables :
– lignées myéloïdes (LA myéloïdes)
• granuleuse : myéloblaste (peu différentiée), promyélocyte (LA
promyélocytaire),
• monocytaire, (LA monoblastique)
• myélomonocytaire
• érythroïde, mégacaryocytaire, ..
– précurseur lymphoïde B ou T immature (LA lymphoblastiques)

• conséquences :
– envahissement médullaire +/- sanguin +/- syndrome tumoral
– insuffisance médullaire : cytopénies
 Biologie
 Hémogramme : Anémie non régénérative, Thrombopénie, Normo-
Hyperleucytose avec ou sans blastose sanguine, Neutropénie (PNN < 1,5
G/L)
 Anomalies du bilan d ’hémostase: CIVD
 Complications métaboliques (masse tumorale, lyse cellulaire) : LDH
élevées, Hyper-uricémie, ~kaliémie, ~créatininémie, Troubles équilibre AB,
Syndrome de lyse spontané ou II au traitement (LA hyperleucocytaires
+++):, acidose, IRA, Anomalies bilan phosphocalcique

 Myélogramme : diagnostic
 Immunophénotypage : Typage des blastes (myéloide/ lymphoides)
 Caryotype : diagnostic (anomalies récurrentes) et pronostic
 Biologie moléculaire : diagnostic et pronostic
Classification OMS (2016)