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METHODES DE DIAGNOSTIC

EN Mycologie

Dr Aloui Dorsaf
Introduction

Les mycoses, ou infections fongiques,


sont des maladies provoquées par des
champignons microscopiques appartenant
au règne des Fungi.
Aspects cliniques
variables, selon:
 champignon en cause
 mode de contamination
 facteurs favorisants
…
Mycoses superficielles: atteinte primitive de
couches superficielles de la peau et des muqueuses,
et atteinte des phanères

Mycoses profondes:
Diagnostic biologique direct
1. Prélèvement +++

Écouvillon stérile pour le


prélèvement des muqueuses

Matériel requis pour prélèvement superficiel


(peau et phanères
Prélèvement au niveau de la peau glabre
Prélèvement au niveau d’une plaque alopécique du cuir chevelu
Prélèvement d’ongle
Pvt d’une muqueuse urines

Sang périphérique
( candidémie) Pvt de sécréta: exp
LBA….
2. Examen direct

• Avec un éclaircissant (en cas de


prélèvement de peau et phanères

• Avec de l’eau physiologique( en cas


d’écouvillonnage)
3. Culture

Systématique pour tous


les prélèvements:
Milieu de Sabouraud-
Chloramphénicol
Milieu de Sabouraud-
ChloramphénicolActidione®
.
3. Culture
Mettre les cultures à l’étuve
 à 27°C pour les prélèvements superficiels
 à 37°C pour les prélèvements profonds

Temps d’incubation:
 48h pour les candidoses.
 au moins un mois pour les dermatophytoses.
 15 jours pour les moisissures
4. Identification

Etude macroscopique et microscopique


(champignons filamenteux)

Autres tests selon genre et espèce ( levures)


Les levures
Candida

Candidoses

(mycoses humaines les plus fréquentes)


 Candida (C.) albicans :espèce la plus fréquente,
saprophyte du tube digestif et des voies génito-
urinaires

 Autres: C.glabrata, C. tropicalis, C.


parapsilosis, C. kefyr, C. guilliermondii, C.
krusei …
Clinique
 Dermatomycoses:
 Intertrigos : des
petits/ grands plis

 Perlèche
 Onyxis
Clinique
 Mycoses des
muqueuses :
 candidoses
oropharyngées
 candidoses
oesophagiennes
 Vaginite chez les
femmes enceintes
 Balanite
Clinique
 Mycoses profondes:
Candidémie, candidoses
viscérales (chorio-rétinite,
abcès rénaux, pleuraux, ...)
Diagnostic
1. Examen direct
Diagnostic

2. Culture
Diagnostic
3. Identification de Candida albicans :

Test de blastèse + Chlamydosporulation sur PCB / RAT


Diagnostic
4. Identification après culture sur milieu chromogène:

Candida albicans

Candida tropicalis

Milieu CandiSelect®
Diagnostic
4. Identification après assimilation des sucres
(auxanogramme/Api ID 32 C):
Antifongigrammes

Disques Microdilution sur plaque


(Sensititre Yeast One)

ETest®
Cryptococcus neoformans

Cryptococcose
Clinique

Après une atteinte pulmonaire, souvent


asymptomatique, atteinte du système
nerveux central à type de méningo-
encéphalite.

Terrains : HIV+++
Autres immunodéprimés.
Diagnostic
1. Examen direct du LCR (à l’encre de chine):

Levures encapsulées
Diagnostic
2. Culture:

Colonies muqueuses beiges


Malassezia

Malassézioses
Pityriasis versicolor

 taches irrégulières
beiges à brune siégeant
sur :
 le tronc,

 les membres,

 les épaules,

 le dos,

 le cou
autres manifestations
 pityriasis capitis:
atteinte pelliculaire du cuir
chevelu,

 Dermite séborrhéique:
affection chronique de la
peau grasse siégeant au
niveau du visage

 atteinte systémique
Diagnostic
1. Examen direct (objectif 10 et 40)

Scotch test cutané: levures en « grappe » de


raisin
Diagnostic
2. Culture

milieu de Sabouraud contenant de l’huile d’olive ou d’arachide


Les champignons filamenteux
Dermatophytes

Dermatophyties
Clinique
de la peau glabre : Epidermophytie circinée
au niveau des plis: intertrigo
des ongles: onychomycoses
des cheveux : teigne
Clinique
Epidermophytie circinée

Intertrigo des plis

Onychomycoses

Teignes et sycosis
Diagnostic
1. Examen direct au niveau des squames et des ongles:
1. Examen direct, en cas d’atteinte pilaire :
 en complément de la clinique, il oriente vers le genre
du dermatophyte en cause:

Teigne tondante Teigne tondante Teigne inflammatoire


trichophytique microsporique
Teigne trichophytique Teigne microsporique
2. Culture: Trichophyton rubrum (espèce anthropophile)
2. Culture: Microsporum canis (espèce zoophile)
Aspergillus

Aspergilloses
Clinique
Aspergillus responsable
d’atteintes :

pulmonaire,

extra-pulmonaire,

allergique,

toxique
Diagnostic
1. Examen direct du LBA :
Diagnostic
2. Culture:

Colonies duveteuses vertes


Diagnostic
3. Identification:

Têtes aspergillaires
Autres
Pneumocystis jiroveci

Pneumocystose
Clinique
 Pneumopathie interstitielle bilatérale

 Terrain immunodéprimé: HIV+++


Diagnostic
1. Recherche de Pj dans le LBA coloré au Gomori-Grocott:

Kystes de P.jirovecii assemblés en amas (seule la paroi des kystes est colorée)
Kystes vides en forme de ballon dégonflé caractéristique
Diagnostic
2. Recherche de Pj dans le LBA coloré au Bleu de Toluidine :

Kystes de P.jirovecii assemblés en amas (seule la paroi des kystes est colorée)
Diagnostic
3. Recherche de Pj dans le LBA coloré au MGG :

kyste mature de P.jirovecii contenant 8 corps intra-kystiques