MICROBIOLOGIA:

GENERALIDADES
INTRODUCCIÓN
La Microbiología es la ciencia que de los seres vivos muy
trata
pequeños, cuyo tamaño se encuentra por debajo del poder
resolutivo del ojo humano.

 Bacteriología
 Micología
 Virología
 Parasitología

Esta determinada por la metodología apropiada para poner en

evidencia, y poder estudiar, a los microorganismos.
 Microscopio
 Técnicas de cultivo puro en laboratorio
 -

INTRODUCCIÓN
Estudio de los organismos deriva de 3 palabras
microscópicos,
griegas: mikros(pequeño), bios(vida) y logos (ciencia) que
conjuntamente significan el estudio de la vida microscópica.

¿es animal, vegetal o mineral ?

Los microorganismos son diminutos seres vivos que

individualmente son demasiado pequeños como para verlos a
simple vista.

Se incluyen las bacterias, hongos (levaduras y hongos

filamentosos), virus, protozoos y algas microscópicas.
 -

IMPORTANCIA DE LA
MICROBIOLOGÌA
 Los microorganismos han sido los primeros en aparecer en la
evolución, y constituyen seguramente la mayor parte de la
biomasa de nuestro planeta.

 Las actividades microbianas sustentan los ciclos

biogeoquímicos de la Tierra, que dependen de modo
fundamental de los microorganismos.

 Las actividades metabólicas microbianas son

excepcionalmente variadas, siendo algunas de ellas
exclusivas del mundo procariótico.
 -

ASPECTOS
BENEFICIOSOS
El aspecto aplicado y la incidencia económica y social de los
microorganismos:

 Todas las culturas desarrollaron de modo empírico multitud

de bebidas y alimentos derivados de fermentaciones
microbianas: vino, cerveza, pan, verduras fermentadas, etc.

 Producción de multitud de productos industriales: alcoholes,

ácidos orgánicos, antibióticos, enzimas, polímeros, etc.

 Los microorganismos siguen desempeñando un papel

fundamental en la nueva generación de medicamentos
recombinantes y de terapias novedosas.
 -

ASPECTOS
PERJUDICIALES
Las enfermedades microbianas han sido causa de grandes
males en el mundo. Basta recordar que la peste (muerte negra)
causó a mediados del siglo XIV, la muerte de la tercera parte de
la población europea, y ya en la primera mitad del siglo XV llegó
a afectar a más del 75%.

 Desde la época del descubrimiento de América, las

exploraciones han conllevado el intenso trasiego de agentes
patógenos de un lugar a otro.

 La microbiología médica, desde la época de Pasteur y Koch,

en la lucha contra las enfermedades infecciosas (antisepsia,
desinfección, esterilización, quimioterapia).
 EVOLUCIÓ DEL MICROBIAN
N MUNDO O
Los primeros seres que aparecieron
en la Tierra se alimentaban de las
[
sustancias orgánicas que se
producían constantemente en la
atmósfera: quimioorganotrofos
tiffliJI anaerobios.
O

La competencia por los nutrientes

hizo que muchos de ellos se
especializaran en realizar procesos
de fotosíntesis o de quimiosíntesis,
y que surgieran las bacterias
fotolitotrofas y las quimiltrofas.
 -

EVOLUCIÓ DE MUNDO MICROBIAN

N L O

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Todos las células eucarióticas heredaron la capacidad de realizar la

respiración celular y, algunas (algas, vegetales), además, la de hacer
la fotosíntesis utilizando el agua como donador de electrones. La
presencia de oxígeno originó la capa de ozono, y por ello, los seres
vivos pudieron abandonar el agua, pues estaban protegidos por la
capa de ozono.
TECNICAS DE OBSERVACIÓN
MICROSCOPICA
 Lunes

TIPO DE OBSERVACIONES MICROSCÓPICAS

1. Observación en fresco
Son preferibles en las situaciones siguientes:

• La morfología de las bacterias se altera cuando se desecan y tiñen.

• Cuando las bacterias se observan para determinar movilidad
• Para observar los cambios citológicos que ocurren durante la
división celular
• Por este método se observan fácilmente algunas inclusiones
celulares como vacuolas y materias grasa.

2. Observación con tinciones

• Para observar las características morfológicas de las bacterias
• Identificación y diferenciación de microbios entre especie y
dentro de la misma especie (tinción diferencial o selectiva).
 Lunes

TIPO DE OBSERVACIONES MICROSCÓPICAS

1. Observación en fresco
•preparación en fresco simple
•preparación en gota pendiente
2. Observación con tinciones
•Tinción simple: un solo colorante.
•Tinción diferencial: más de un colorante
•Tinción especial
Tinción negativa: colorea el medio que rodea a la
bacteria permaneciendo ésta sin teñir. 
Procedimiento para un preparado en fresco
en gota pendiente
2. TINCIONES O COLORACIONES
 COLORANTE: DEFINICIÓN

• Son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por algún componente.

• Los colorantes son compuestos químicos utilizados para aumentar el contraste

 COLORANTES: TIPOS

a) Sales colorantes: más comúnmente usados

 básicos: Consisten en un catión coloreado unido a un anión incoloro. Tiñen la célula
bacteriana uniformemente (ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos )
 (cromatina nuclear de pro y eucariotas)
 (más usados en citología bacteriana).
• Ej: clorhidrato (-) de azul de metileno (+). la safranina, la fucsina básica, el cristal violeta

 ácidos: Tienen el catión incoloro unido a un anión coloreado. No

tiñen la célula bacteriana, pueden usarse como color de contraste
(coloración negativa). Tiñen estructuras citoplasmáticas de las
células eucariotas(Rx básicas)
Ej: eosinato (-) de sodio (+),la fucsina ácida y el rojo Congo.
 COLORANTES: TIPOS

b) Colorantes liposolubles
• Se combinan con los componentes lipídicos de la célula, usados para revelar la
localización de los depósitos de grasa. Ej. Negro Sudán.
 COLORACIONES : TIPOS

• Vitales
• Son aquellas que se practican sobre células que están vivas, mediante la
introducción de un colorante en la circulación de un organismo vivo.
• Ejem: el verde Jano y el azul de metileno.

• Supravitales
• son aquellas que se realizan sobre células o tejidos vivos, pero que están
aislados del organismo del que proceden.

• No vitales
• se realizan sobre células muertas.
 TÉCNICAS PARA REALIZAR UNA
PREPARACIÓN COLOREADA

a) Frotis o película (extensión)

b) La fijación

c) Coloración.
 TÉCNICAS PARA REALIZAR UNA
PREPARACIÓN COLOREADA

a) Frotis o película (extensión)

• Utilizar portaobjetos limpios y desengrasados
 TÉCNICAS PARA REALIZAR UNA
PREPARACIÓN COLOREADA
b) La fijación:

Los microorganismos queden adheridos al portaobjeto ( coagula las sustancias

proteicas)
TIPOS
• CON CALOR (O MÉTODO DE KOCH)
• FIJACIÓN QUÍMICA: alcohol metílico, formalina al 5 % (v/v), licor de Hoffman (partes
iguales de etanol absoluto y éter)

Metanol
Tinción de células para la observación
microscópica

Extensión de una fina capa

de células sobre el porta

Adición del colorante

lavado y secado
Secado al aire

Se coloca una gota de aceite

de inmersión sobre el porta y
se observa con el objetivo de
Fijación por flameado del porta 100X
 TÉCNICAS PARA REALIZAR UNA
PREPARACIÓN COLOREADA

c) Coloración. SIMPLE : Positiva o negativa

 Lunes
Tinción simple de azul de metileno.

Frotis y fijación

1.- Poner una gota de agua en 2.- Tomar la muestra con el asa de 3.-Extender sobre el agua y
un porta siembra fijar a la llama del mechero

Tinción

1.- Cubrir la preparación 2.- Lavar con agua, dejar

con Azul de Metileno 5’ secar y observar al
microscopio

Micrococcus luteus
 Lunes
Tinción negativa.

1.- Colocar una gota de Nigrosina

en un porta
3.- Mezclar con la
Nigrosina y extender por
2.- Tomar muestra del todo el porta. Secar al aire
microorganismo con el asa, y observar
flamear el tubo y tapar

cápsulas tanto bacterianas como de levaduras, esporas que se observan como cuerpos
refringentes y espiroquetas
 TÉCNICAS PARA REALIZAR UNA
PREPARACIÓN COLOREADA

c) Coloración. Diferencial o compuesta

se utilizan para distinguir entre tipos de microorganismos

Etapas :

1. tinción primaria
2. Tinción de contraste o secundaria

- Ejemplo.: COLORACION GRAM, COLORACION DE

ZIEHL- NEELSEN, ESPORAS
 TERMINOS

•Los mordientes, aunque no son colorantes, intensifican la

tinción porque aumentan la afinidad de la célula por el
colorante. También se pueden utilizar para producir un
engrosamiento de ciertas estructuras celulares externas,
como los flagelos, que debido a su delgadez no podrían ser
visualizados de otra forma.
 TAREA 1

• MEDIO DE CULTIVO
• ¿QUE ES?
• ¿PARA QUE SIRVE?
• CLASIFICACIÓN (explicar cada uno)
• FACTORES QUE AFECTAN UN MEDIO DE CULTIVO ( explicar cada uno)

NOTA: TODA TRABAJO DEBERA TENER PORTADA (NOMBRE COMPLETO),

CONCLUSIONES ( PERSONALES) Y REFERENCIAS ( NO WIKIPEDIA, NO RINCON DEL
VAGO ETC….)