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REALISER PAR :
ELGHEYLANI MOHAMED
BAH AHMED SALEM
AIDA MARIEM
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PLAN
I. Introduction générale
II. Microscope optique
III. Microscope à fond clair
IV. Microscope à contraste de phase
V. Microscope à fluorescence
VI. Microscope inverse
VII. Conclusion
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Introduction générale
• Le microscope vient du mots grecs anciens mikrós qui signifie
« petit » et skopeîn « regarder »
• La microscopie est un ensemble de techniques d'imagerie des objets
de petites dimensions et invisibles à l'œil nu.
• Le premier microscope était inventé en 1595, à l’époque du roi Henri
IV. par Zacharias Janssen, un fabricant de lunettes hollandais, qui a eu
l’idée de superposer deux verres de lentille dans des tubes
coulissants, afin de grossir de très petites choses.
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Microscope optique
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Introduction
objectif oculaire I
L
im
ag
e
ca
pt
Object
ep
ar
la
ré
tin
e
condenseur
Source
lumineuse
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Principe de fonctionnement :
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Trajet optique
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Schéma de principe du microscope optique
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Etape 1 :L'objectif L1 donne une image A1B1 intermédiaire, réelle et
renversée de AB, située dans un plan image quelconque de L1 qui est dans
ce cas le plan focal objet de L2.
Etape 2 :A1B1 est alors objet pour l'oculaire L2 et comme il est situé dans
son plan focal objet L2 agit comme une loupe et donne une image A'B' à
l’infini qui sera virtuelle, renversée et plus grande que l'objet.
Etape 3 :Cette image à l'infini devient objet pour l'œil de l'observateur qui
n'accommode pas et l'observe comme au travers d'une loupe, à travers
l'oculaire L2.
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Fiche d'entretien et maintenance
• La qualité des examens de laboratoire dépend de l'état du microscope
et l'état du microscope dépend de l'entretien qu'on lui apportera.
Pour toutes ses composants contre la poussière l'humidité et les
chocs .
Composants Entretien
Les oculaires * Protection de la poussière: après utilisation,
mettre une housse sur le microscope.* Nettoyage
des oculaires : la lentille externe (où on met
l'oeil) se nettoie avec un chiffon sec ou un papier
qui ne raye pas (papier spécial pour les lentilles,
kleenex, sopalin, papier toilette).
Les objectifs * Nettoyage de l'objectif x100 à immersion:
essuyer l'huile après chaque utilisation avec un
papier qui ne raye pas (papier lentille, kleenex,
papier toilette).
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Composants Entretien
Le condenseur • essuyer la lentille du condensateur avec un chiffon
ou un papier qui ne raye pas.
• pour enlever la poussière, utiliser un pinceau fin ou
souffler de l'air avec une poire (poire optique pour
appareil photo).
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microscope à fond clair
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Introduction
A quoi sert?
• Le microscope en fond clair, à l'opposé du microscope à fond noir, permet de
recueillir la lumière de la source directement dans les objectifs, après avoir
été transmise par l'échantillon. Celui-ci est éclairé par-dessous et observé
par-dessus. Bien que la préparation des échantillons soit peu contraignante,
cette technique est limitée par un faible contraste et une faible résolution.
On peut améliorer l'observation en colorant les échantillons.
• Utilisation du microscope en fond clair Ce microscope peut être utilisé pour
visualiser des objets vivants variés (bactéries, unicellulaires...) ou fixés
(coupes histologiques...).et l'observation des structures cellulaire internes
après coloration
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Schéma synoptique
OCULAIRE
OBJECTIF
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Fiche d’ entretien
solution Cause possible panne
Engager l'objectif jusqu'au cran, Objectif mal placé, condenseur trop Champ d'observation sombre
remonter le condenseur, nottoyer bas,lentilles sales
les lentilles
Nottoyer les Parties optiques poussiéreuses Particules visibles dans le champ
d'observation
Ajuster l'ouverture numerique Condensseur trop bas,diagrame Image fllotantes
suivant l'objectif choisi faiblement ouvert
desserrer Boutton trop serré Mise au point rapide très forte
Ajuster ces paramétre,utiliser des Distance interpupillaire mal Vue avec les deux yeux non uniforme
objectifs simillaires ajustée,pas de compensation
dioptrique,occulaires non assortis
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Microscope à contraste de phase
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définition et Principe
Principe de fonctionnement
de fonctionnement
• Définition :Un microscope à contraste de phase (ou en contraste de
phase) est un microscope optique qui transforme en niveaux
de contraste les différences d'indices de réfraction entre deux
structures, lesquelles se traduisent en différences de phase pour les
ondes lumineuses les traversant.
• Ne nécessite pas de colorants
• Domaine d utilisation s’applique aux cellules vivantes.
D’où vient le contraste?
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• Lumière incidente traverse diaphragme annulaire
et focalisée en anneau circulaire sur l'objet.
• Lumière qui ne traverse pas l'objet reste intacte
et est focalisée par l'objectif sur l'anneau gris
épais de la plaque de phase qui absorbe une
partie du faisceau et change sa phase
• Quand objet réfracte ou diffracte la lumière c a d
une modification de la phase et déviation des
ondes lumineuses vers région mince de la plaque
de phase.
• Ces ondes interfèrent avec faisceau d'ondes non
réfractées. Image finale constituée de différents
degrés de brillance ou d'extinction en fonction de
l'indice de réfraction de chaque point de l'objet
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Schéma synoptique
Diaphragme
et Plaque Plan d
lumière condenseur spécimen Objectif
condenseur De phase image
annulaire
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Technique fonctionnel
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Technique fonctionnel
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Fiche de maintenance
SOUS ENSEMBLES ELEMENTS N V R
Mouvements de mise au point
STATIF Parties électrique
Diaphragme de champ & Filtres
PLATINE Mouvements X Y + Rotation
CONDENSEUR Diaphragme d’ouverture
Contacts du support
BOITIER(S) LAMPE(S) Contacts de la prise
Centrage
ILLUMINATEUR Diaphragme(s)
Lames et cubes semi réfléchissants
Ecart inter pupillaire + prisme et lentilles
TUBE D’OBSERVATION Trajets optiques
Commandes mécaniques
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SOUS ENSEMBLES ELEMENTS N V R
Corrections dioptriques
OCULAIRES Lentilles
Réticules & Bonnettes
PORTE OBJECTIFS Parties électriques
Prisme de Wollaston
CONTRASTES CONTRASTES Modules et bagues
Filtres de polarisation
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Domain d’utilisation
• Le principal domaine d'utilisation de la microscopie de fluorescence
est le domaine biomédical dans les applications de recherche
fondamentale, appliquée, de diagnostic, de contrôle de qualité, etc
• La microscopie de fluorescence dans le domaine du visible est un outil
très utilisé en biologie car très adaptée à l’étude de cellules vivantes .
• Le microscope en fluorescence permet de visualiser des objets qui
sont naturellement fluorescents (chlorophylle...), ou des molécules
rendues fluorescentes pour mieux les observer (protéines couplées à
la GFP, DAPI pour l'ADN, fluorochromes...).
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• A quoi sert?
Ce type de microscope, permet de visualiser la fluorescence émise par
les marqueurs fluorescents introduits dans l'échantillon à étudier. Pour
cela, le microscope est équipé d'un jeu de filtres et de miroirs
dichroïques. On trouve dans le microscope deux types de filtres. Des
filtres d'excitation, qui permettent de sélectionner les longueurs
d'ondes qui vont exciter l'échantillon et des filtres d'émission qui vont
permettre d'éliminer lors de l'observation, certaines longueurs d'ondes
émises par le fluorochrome en réponse à l'excitation.
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Schéma synoptique
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Fiche d entretien
Solution Causees possible panne
Engager l'objectif jusqu'au cran, Objectif mal placé, condenseur trop Champ d'observation sombre
remonter le condenseur, nottoyer les bas,lentilles sales
lentilles
Ajuster ces paramétre,utiliser des Distance interpupillaire mal ajustée,pas Vue avec les deux yeux non uniforme
objectifs simillaires de compensation dioptrique,occulaires
non assortis
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Définition et Principe de fonctionnement
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• Le microscope
inversé est
un microscope dont
l'échantillon est
illuminé par dessus
et observé par
dessous. Offrant un
large espace entre le
condenseur et la
platine
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Schéma synoptique
SOURCE
CONDENSEUR DE
OCULAIRE LUMIERE
OBJECTIF ECHANTIONNAGE
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TRAJET OPTIQUE
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Fiche de maintenance
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CONCLUSION
• Finalement les microscopes jouent un rôle très important dans
différentes domaines ,car ils ne sont pas seulement l'outils de
diagnostic le plus important dans le laboratoire médical mais ils
aident aussi les scientifiques à étudier les microorganismes, les
cellules, les structures cristallines et les structures moléculaires.
• Et Nous avons essayé dans cette exposé de vous informer sur les
différents tubes des microscopes ,sur le principe de fonctionnement
et le méthode d'entretien .
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merci pour votre attention
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