LES INVITO A …….

M. en C. GUILLERMO ESCAMILLA GUERRERO

INSTITUTO NACIONAL DE PEDIATRIA
MÈXICO D.F.
 PRINCIPIOS
• FUNCION DE SOLUCION ADITIVA/ANTICOAGULANTE:

»ESTABILIZADOR

METABOLICO

»PREVENIR COAGULACION
 PRINCIPIOS
• C. E………………. 1 – 6 °C
• C. P……………….. 20 – 24 °C
• PMN………………. 20 – 24 °C
• PFC…………………...< -18 °C
• GAH.………………...< -18 °C
 VIDA DE
ALMACENAMIENTO

75% DE LOS ERITROCITOS

ORIGINALMENTE TRANSFUNDIDOS
ESTEN EN EL RECEPTOR 24 HORAS
DESPUÉS
 CONTROL EN LA RECOLECCIÓN
DE SANGRE
La sangre que va a ser donada debe ser colectada
por:
» Personal entrenado
» Bajo la supervisión de un médico calificado
» Utilizando un sistema cerrado de bolsa
plásticas
» Métodos asépticos
» Una sola punción venosa limpia.
 CONTENEDORES DE
PLÁSTICO
RECIPIENTE SEGURO DURANTE LA
COLECCIÓN, ALMACENAMIENTO,
PROCESAMIENTO, TRANSPORTACIÓN
Y ADMINISTRACIÓN DE SU
CONTENIDO
 CONTENEDORES DE
PLÁSTICO

NOM-139-SSA1-1995

QUE ESTABLECE LAS

ESPECIFICACIONES SANITARIAS
DE LAS BOLSAS PARA
RECOLECTAR SANGRE
 CONTENEDORES DE
PLÁSTICO

NOM-140-SSA1-1995

QUE ESTABLECE LAS

ESPECIFICACIONES
SANITARIAS DE LAS BOLSAS
PARA FRACCIONAR SANGRE
 BOLSA PARA
FRACCIONAR SANGRE

ARTÍCULO DE USO MÉDICO, ESTÉRIL,

ELABORADO CON MATERIALES PLÁSTICOS,
METÁLICOS Y LÁTEX, ATÓXICO, LIBRE DE
PIRÓGENOS Y NO REACTIVO TISULAR
 BOLSA PARA FRACCIONAR
SANGRE
CONSISTE EN UNA SERIE
DE BOLSAS UNIDAS
ENTRE SÍ, UNA DE LAS
CUALES PUEDE
CONTENER UNA
SOLUCIÓN ADITIVA
MEDIANTE TUBOS DE
DIMENSIONES
 BOLSA PARA
FRACCIONAR SANGRE

LA BOLSA PRINCIPAL
DEBE CONTENER UN
ANTICOAGULANTE Y
ESTAR UNIDA A UN
TUBO EQUIPADO CON
AGUJA.
 TUBOS CORTOS
•PIEZAS DE PLÁSTICO FLEXIBLE,
TRANSPARENTE O TRANSLÚCIDO.
•ENSAMBLADO A UN TUBO
TRANSPORTADOR.
•LOS RESTANTES ESTAN OBTURADOS
CON UN DIAFRAGMA DE PLÁSTICO PARA
PUNCIÓN.
•NO RESELLABLE, PROVISTO DE
PROTECTORES QUE MANTENGAN SU
ESTERILIDAD
 Descripción:

Tubos
cortos Tubo
transportad
or
te
lan
gu
oa

Aguja
tic

Protector
An
 BOLSA PARA
FRACCIONAR SANGRE

PLÁSTICO GRADO MÉDICO

POLÍMEROS O COPOLÍMEROS, NATURALES O

SINTÉTICOS, LOS CUALES SON PROCESADOS
MEDIANTE FORMULACIONES ESPECÍFICAS
QUE GARANTIZAN LA ATOXICIDAD DEL
PRODUCTO
 BOLSA PARA
FRACCIONAR SANGRE

LÁTEX GRADO MÉDICO

LÁTEX PROCESADO MEDIANTE

FORMULACIONES ESPECÍFICAS QUE
GARANTIZAN LA ATOXICIDAD DEL
PRODUCTO.
 BOLSA PARA
FRACCIONAR SANGRE
DISEÑO
• BOLSA PRIMARIA
• BOLSAS SECUNDARIAS
• TUBO
TRANSPORTADOR
• AGUJA
• PROTECTOR DE LA
AGUJA
 BOLSA PARA
FRACCIONAR SANGRE

•RECIPIENTES HERMÉTICOS

•ELABORADOS A BASE DE CLORURO DE

POLIVINILO O CUALQUIER OTRO PLÁSTICO

•GRADO MÉDICO

•SIN PIGMENTAR
 BOLSA PARA
FRACCIONAR SANGRE

•FLEXIBLE

•TRANSLÚCIDO

•INODORO O CON UN LIGERO OLOR

CARACTERÍSTICO

•DELIMITADO POR UN TERMOSELLADO DOBLE

 PLASTIFICADOR

SUSTANCIA QUÍMICA QUE PERMITE

FLEXIBILIDAD EN EL PLÁSTICO,
LOGRANDOSE EL INTERCAMBIO
GASEOSO (ENTRADA DE O2 Y SALIDA DE

CO2)
 PLASTIFICADOR
1) DHEP DI(2-ETILEXIL-PTALATO)***
2) TOTM TRI(2ETILEXIL-TIMELITATO),
(CLX), (PL-1240)
3) DnDP DI-n-DECILPTALATO, (X-3315)
4) BTHC BUTIRIL-n-TRIHEXIL CITRATO,
(PL-2209)
5) MEHP MONO(2-ETILEXIL PTALATO)
6) POLEOLEFIN PLASTICO (PL-732) **
 POLEOLEFIN
PLÁSTICO (PL-732)

•COPOLIMERO DE ETILEN-BUTILEN-
ESTIRENO

•COPOLIMERO DE POLIPROPILEN-ESTIERNO

•COPOLIMERO DE ACETATO DE ETILEN-

VINILO
 CLORURO DE POLIVINILO
• El DEHP (ftalato) no se une químicamente
al PVC.
• El DEHP (ftalato) puede lixiviar (migrar)
desde el PVC al entrar en contacto con
los líquidos, lípidos y/o calor.
• El DEHP (ftalato) es un tóxico probado
para el aparato reproductivo y para
desarrollo en animales de laboratorio.
Health Care Without Harm Fact Sheet “Exposición al DEHP durante el
Cuidado Médico de Niños: Una causa para la preocupación”.15 de
octubre 2001
CAMBIOS DURANTE EL
ALMACENAMIENTO
1) CAMBIO DE COLORACIÓN
2) TURBIDEZ DEL ANTICOAGULANTE/
CONTAMINACIÓN POR BACTERIAS
3) CONTAMINACIÓN POR HONGOS
4) PÉRDIDA DE LA FLEXIBILIDAD
5) PERMEABILIDAD A GASES
SOLUCIONES ANTICOAGULANTES
PRESERVADORAS

SOLUCIONES QUE EJERCEN UN DOBLE

PAPEL:
• DE PREVENIR LA COAGULACIÓN
• Y DE PRESERVAR Y MANTENER LA
FUNCIÓN CELULAR
( ESPECIFICAMENTE LA ERITROCITARIA )
SOLUCIONES ANTICOAGULANTES
PRESERVADORAS

FUNCIÓN

UNIR EL CALCIO IONICO,

INHIBIENDO LA COAGULACIÓN
DE LA SANGRE CON LOS OTROS
FACTORES DEL PLASMA
 ANTICOAGULANTES
•CITRATO SÓDICO: ACTÚA COMO
QUELANTE DEL CALCIO IMPIDIENDO SU
COAGULACIÓN
•DEXTROSA: SUBSTRATO ENERGÉTICO
PARA LA GENERACIÓN CONTINUA DE ATP
POR VÍA GLUCOLÍTICA
•FOSFATOS: MANTIENEN AL 2,3 DPG
•ÁCIDO CÍTRICO: EVITA LA
ALCALINIZACIÓN DE LA SANGRE DURANTE
SU CONSERVACIÓN A 4°C
 HEPARINA

ES UN ANTICOAGULANTE, PERO NO UN
CONSERVANTE. LA SANGRE RECOGIDA
CON HEPARINA DEBE UTILIZARSE ANTES
DE 48 HORAS Y DE PREFERENCIA
DENTRO DE LAS PRIMERAS 24 HORAS.
 SOLUCIONES
ANTICOAGULANTES

Solución
Tipo Contenido
anticoagulant
e
I ACD FORMULA 67.5 o 75.0
A ml
I´ ACD FORMULA 112.5 o 125
B mL
II CPD 63 o 70 mL

III CPDA 1 63 o 70 mL
 ACD (ácido-citrato-
•
dextrosa)
CITRATO TRISODICO DIHIDRATADO 22.0
g
•ÁCIDO CITRÍCO MONOHIDRATADO 8.0
g
•DEXTROSA MONOHIDRATADA 24.5
g
•AGUA INYECTABLE cbp 1000
ml
15 ml DE ANTICOAGULANTE ACTUAN SOBRE 100
ml DE SANGRE
 ACD
SOLUCIÓN ESTÁNDAR
(1943)
CITRATO PRODUCE UNA QUELACIÓN DEL CALCIO
ACTUANDO COMO ANTICOAGULANTE.
DEXTROSA PROPORCIONA LA FUENTE DE
ENERGÍA.
ÁCIDO CÍTRICO APORTA A LA SOLUCIÓN UN pH
CERCANO A 5.

LA MEZCLA DE ACD-PLASMA TIENE UN pH DE 7.1

A TEMPERATURA AMBIENTE Y DE 7.4 A 4° C.
 CPD (citrato-fosfato-dextrosa)
•CITRATO TRISÓDICO DIHIDRATADO 26.3
g
•ÁCIDO CÍTRICO MONOHIDRATADO 3.27
g
•DEXTROSA MONOHIDRATADA 25.5
g
•FOSFATO MONOBÁSICO DE SODIO 2.22
g
•AGUA INYECTABLE cbp 1000
ml
 CPD

FOSFATO CONTRIBUYE AL DEPÓSITO DE

FOSFATO DE ADENOSINA, MEJOR
VIABILIDAD DE LOS ERITROCITOS. pH
LIGERAMENTE MAS ELEVADO QUE ACD
(5.5 SOLO, 7.5 A 4° C, CON SANGRE Y
MANTIENE EL NIVEL DE 2,3 DPG
DURANTE CERCA DE UNA SEMANA CON
MENOR DISMINUCIÓN DEL pH A 4° c.
CPD-A
(citrato-fosfato-dextrosa-
adenina)
•CITRATO TRISÓDICO DIHIDRATADO 26.3 g
•ÁCIDO CÍTRICO MONOHIDRATADO 3.27 g
•DEXTROSA MONOHIDRATADA 25.5 g
•FOSFATO MONOBÁSICO DE SODIO 2.22 g
•AGUA INYECTABLE cbp 1000 ml
14 ml DE ANTICOAGULANTE ACTUAN SOBRE 100
ml DE SANGRE

TIEMPO DE CONSERVACIÓN 35 DÍAS

 CPD-
A A LA SOLUCIÓN DE
0.25 milimol / 1 DE ADENINA
CPD EN SU ACCIÓN DE CONSERVANTE.
LA ADENINA HACE FALTA PARA LA FORMACIÓN DE
ATP, LA CPD-adenina MANTIENE EL NIVEL DE 2,3
DPG.
Presenta el hematócrito deseado, la incidencia de
reacciones febriles o urticantes tras su transfusión
es muy baja.
CPDA-2 contiene mayores cantidades de glucosa
y adenina.
 ADSOL
•CITRATO DE SODIO USP 900 mg
•MANITOL USP 750 mg
•DEXTROSA USP 2.2 mg
•ADENINA 27 mg
•AGUA INYECTABLE 100 ml

TIEMPO DE CONSERVACIÓN 42 DÍAS

 ADENINA

LA ADENINA ES TOMADA POR EL

ERITROCITO E INCORPORADA A LA
RESERVA, UTILIZADA PARA MANTENER LA
CONCENTRACIÓN DE ATP EN EL MISMO
 Solución aditiva

Solución que en conjunto

con el anticoagulante
protege la vida de los
eritrocitos
 VENTAJAS DE LAS
SOLUCIONES ADITIVAS
•Recuperación máxima de plasma y CE con Hto.
60 %
•Almacenamiento por 42 días a T° 1 - 6 ° C
•Con CPDA-1: Plasma o PRP separado dentro de
las primeras 6 u 8 hs.
•Para plaquetas almacenar y transportar la sangre
a 20 - 24 ° C
•La solución aditiva deberá mezclarse con los
eritrocitos dentro de las 72 hrs, posterior a la
extracción.
 SOLUCIONES
REJUVENECEDORAS

1.- RESTABLECIMIENTO DE LA
VIABILIDAD
2.- RECUPERACIÓN DE LOS
NIVELES
2,3 DPG
 EXTRACCIÓN
• Punción limpia
• Rápida
• Mezcla continua y suave con el
anticoagulante
• Intervalo de sangrado 4 – 10
minutos
• Hasta 15 minutos
TECNICAS GENERALES DE
FRACCIONAMIENTO
– Precipitación espontánea
• Reposo 24-48 horas a 4°C

– Interacción diferencial campos fisicos:

• Centrifugación
• electroforesis

– Interacción diferencial con medios sólidos:

• intercambio iónico
• Ultrafiltración
• cromatografía
TECNICAS GENERALES DE
FRACCIONAMIENTO
– Solubilidad diferencial:
• Crioprecipitación (temperaturas menores a –30°C)

• “salting out” con sales neutras

• sistemas de bipartición en mezclas de solvente orgánico /agua

TECNICAS GENERALES DE
FRACCIONAMIENTO
Los métodos de mayor empleo en los bancos
de sangre son:
• La centrifugación
– Alta revolución y tiempo corto
– Baja revolución y tiempo largo
• Crioprecipitación
– Incubación 72 horas a –70°C
– Precipitación con mezclas criogénicas:
» Alcohol/ hielo seco
» Acetona/hielo seco
» Alcohol/acetona/hielo seco
 SISTEMAS DE
CENTRIFUGACION

Eritrocitos

Leucocitos

Plaquetas
Sangre Tota
entrifugación Suave “DOS CAPAS”

}
Plasma Rico en Plaquet

}
Concentrado de Glóbul
Rojos
Centrifugación Fuerte
“TRES
CAPAS”

} Plasma

} Buffy Coat

}
Concentrado Globular
 CENTRIFUGAS DE
FRACCIONAMIENTO

Fuerza centrífuga relativa (FCR) ó

g=(0.00001118) (r) (r.p.m) 2

 LOS PUNTOS CLAVE EN EL CONTROL
DE CALIDAD DEL FRACCIONAMIENTO
SON
• Control de las centrífugas refrigeradas: temperatura y r.p.m.
• Tiempo de fraccionamiento y revoluciones para la obtención de
PRP(plasma rico en plaquetas), C.P(concentrado plaquetario) y
Crioprecipitados.
• Número de plaquetas, pH y función plaquetaria en C.P.
• Volúmenes obtenidos basados en lo que establece la NOM
• Actividad del Factor Vlll y factor l en crioprecipitados y/o en plasma
fresco congelado total. En tanto que del factor lX en plasma
desprovisto de factor Vlll.
FACTORES QUE AFECTAN LA
CALIDAD DEL PRODUCTO
• Relación de sangre/anticoagulante.
• Recolección de sangre.
• Período entre la recolección y el
fraccionamiento.
• Velocidad de congelación del plasma.
• Condiciones de almacenamiento.
• Condiciones de transporte.
CONCENTRADOS DE ERITROCITOS
UNIDAD VOLUMEN TEMP DE VIGENCIA CARACTERISTI
EN mL CONSERVACION CAS
EN 0C ESPECIALES

CONC. DE 180-350 ML 1-6 SEGÚN NINGUNA

ERITROCITOS ANTIOGULANTE

CONC. DE 180 A 350 1A6 SEGÚN EL CONTENIDO

ERITROCITOS ANTICOAGU-LANTE MAXIMO DE
POBRE EN LEUCOS LEUCOS /
UNIDAD 1X109

CONC. DE 180 A 350 1A6 4 A 24 HORAS A PLASMA

ERITROCITOS PARTIR DE SU AUSENTE POBRE
LAVADO PREPARACION EN LEUCOCITOS
Y PLAQUETAS
 CONCENTRADOS DE
LEUCOS Y PLAQUETAS
TIPO DE UNIDAD FUENTE DE OBTENCION VOLUMEN TEMP. DE MINIMOS EN EL 75% O + DE VIGENCIA MAXIMA APARTIR DE
CONSERVACION EN 0C LAS UNIDADES LA RECOLEC-CION

CONCENTRA-DO DE LEUCOS POR AFERESIS VARIABLE 20 a 24 horas 1 X 1010 24 horas

( NEUTROFI-LOS )

POR FRACCIONAMIENTO DE 45 A 60 mL 20 a 24 horas 5.5 x 1010 24 a 72 horas

SANGRE TOTAL
CONCENTRA-DO DE PLAQUETAS

POR AFERESIS 200 a 250 mL 20 a 24 horas 3 x 1011 24 horas a 5 dias

 PLASMAS Y
CRIOPRECIPITADOS
TIPO DE UNIDAD VOLUMEN EN mL MINIMOS EN EL 75% o TEMP. DE CONSERVA- VIGENCIA MAXIMA A
+ DE LAS UNIDAD CION EN 0C PARTIR DE LA
RECOLECCION

150 a 180 por Proteina 60 g/ L

PLASMA fraccionamiento Factor VIII 1 U/mL -18 o menor 12 meses
FRESCO 450 a 750 por aferesis Fibrinogeno 160 mg/dL 6 hrs. Una vez
descongelado

150 a 180 por

PLASMA ENVEJECIDO fraccionamiento Proteina 60 g/L 18 o menor 5 años
450 a 750 por aferesis
26 dias con ACD o CPD
1a6 40 dias con CPDA

Factor VIII : 80 UI 12 meses

CRIOPRECIPI-TADO 10 a 25 mL -18 o menor 6 horas una vez
descongelado
“ Lo que no se define no se puede medir,

Lo que no se mide no se puede mejorar,

Y lo que no se mejora se degrada siempre”

Lord Kelvin
 DENSIDAD DE PRODUCTOS
BIOLOGICOS
Densidad de sangre o de sus fracciones sanguíneas

• Sangre de varón 1.057 g/ml

• Sangre de mujer 1.053 g/ml

• Concentrado eritrocitario 1.093 g/ml

• Plasma 1.028 g/ml

SANGRE FRESCA (TOTAL)

• NOM p.30
• Volumen 450 ml ±10 % ( + anticoagulante)
• Conservar entre +1ºC y +6ºC
• Vigencia máxima (como fresca) después de
la recolección: 6 hrs. Pasado ese lapso se
considerará SANGRE TOTAL.(ST)
SANGRE TOTAL, ALTERNATIVAS EN
CUANTO A SU VOLUMEN

Volumen (ml) Peso (g)

405 - 495 615 -715

• 300 - 404 ml Usar solo el C E o dar

de baja toda la unidad.
• < 300 ml Dar de Baja
• Si < 6 hrs se puede fraccionar en 4.
CONCENTRADOS ERITROCITARIOS
(C.E.)
• NOM p 31 Requisitos:
• Volumen : 180ml a 350 ml
• Temperatura de conservación : +1ºC a +6ºC
• Vigencia máxima : según el anticoagulante
• Caracteres especiales : ninguno
• Identificación de las unidades (etiqueta) y su inspección
física, es igual al de la sangre fresca (total).
• Otras determinaciones que permiten evaluar la calidad
del concentrado eritrocitario:
• Cuantificación de Hb total del C.E. g/dl
• Hematocrito (%)
 CE LAVADO (por inversión)
• NOM p31
• Vol. Neto: 180-350 ml
• Temp. de conservación: +1ºC-+6ºC
• Hematocrito : 68-80 %
• Leucocitos eliminados: > 75 %.
• Eritrocitos recuperados: > 63%
• Vigencia máxima: 4 hrs. a partir de su
preparación
• Caracteres especiales: plasma ausente, pobre
en leucocitos y plaquetas
 CONCENTRADO
PLAQUETARIO
• NOM p 32: obtenidas por fraccionamiento de sangre
fresca a temperatura entre +18ºC y 24ºC.
• Volumen: 45 a 60 ml.
• Plaquetas/bolsa: 5.5 x 1010 (en el 75% o más de las
unidades al límite de su vigencia).
• pH: 6.0 (en el 75% o más de las unidades al límite de
su vigencia).
• Temperatura de conservación: +20ºC a +24ºC y en
agitación suave*.
• Vigencia máxima a partir de la recolección: 24 a 72
Hrs.
 CONCENTRADO PLAQUETARIO
• Identificación de las unidades: igual que para sangre
total pero agregando a la fecha de caducidad la hora y
en las condiciones de almacenamiento, que éste debe
ser de +21ºC a +24ºC y con agitación suave.
• Otros estudios útiles:
– Inspección física
– Contaminación con eritrocitos y leucocitos
– Funcionalidad plaquetaria (retracción de coágulo
agregometría)
ALGO PARA LAS PLQS???

18% presentan swirling (a los 5 días)

(bertollini: transfusion 1996;36:128-132)
Technical Approaches for Bacterial Detection

•Culture
•% Oxygen in Air

•Cell Markers
•Metabolic substrates/products –Observations
–Glucose •Clumping/color
–Lactic acid/Lactate •Swirling
–Carbon Dioxide –Gram stain
–pH –Wright Stain
–Bicarbonate –Acridine Orange Stain
–Plasma Oxygen –Antibiotic probes
•Cell Growth –Antibody probes
•Culture –Epifluorescence
•% Oxygen in Air microscopy
•Molecular Biology
–PCR
–rRNA

Adapted in part from: Mitchell, Brecher: Transfusion Medicine Reviews 1999; 13:132-44
CONTAMINACIÓN
 PLASMA FRESCO
(CONGELADO)
• NOM: p 32:

• Obtenido por centrifugación dentro de las seis

primeras horas de su recolección.

• CONGELADO, si se congela dentro de las seis

primeras horas de su recolección.
 PLASMA FRESCO
(CONGELADO)
• NOM: p 32:
• Volumen neto: 150-180 ml
• Proteínas: 60g/dl
• Factor VIII: 1 UI / ml
• Fibrinógeno: 160 mg/dl
• Temp. de conservación: -18ºC o menor
• Vigencia máxima: 12 meses (6 hrs. una vez
descongelado)
• Identificación y aspecto físico igual que ST.
 PLASMA ENVEJECIDO (DESPROVISTO
DE CRIOPRECIPITADO)
• NOM: p 32:
• Volumen: 150-180 ml
• Proteínas: 60 g/l
• Temp. de conservación: -18ºC o menor y su
vigencia máxima a partir de su recolección será
de 5 años. Otra opción:
• Temp. de conservación: +1ºC - +6ºC y su
vigencia máxima será: con ACD o CPD: 26 días;
con CPDA 40 días
 CRIOPRECIPITADO
• NOM: p 33:
• Volumen: 10 a 25 ml
• Factor VIII: 80 UI
• Temp. conservación:
-18ºC o menor
• Vigencia máxima: 12
meses (6 hrs una vez
descongelado)
 CRIOPRECIPITADO
• De acuerdo con la NOM se pueden mezclar
tres unidades (reconstituyendo con SSI).
• Requisitos:
• Peso bruto: 46 - 67 g*
• Volumen neto: 31 - 52 ml
• Factor VIII: UI / ml: 4.5 - 8.8 UI
• UI / crio: 191 - 336
• Fibrinógeno (opcional):100 - 350 mg/unidad
• Vigencia máxima: (NOM inciso 9.11) 12
meses (6 hrs una vez descongelado)
M en C GUILLERMO ESCAMILLA
GUERRERO

BANCO DE SANGRE
INP
 Con la aplicación de esta fórmula se puede
estandarizar el empleo de cualquier marca de
centrífuga refrigerada en fraccionamiento.
 El control de calidad aplicable a centrífugas
refrigeradas es mediante la obtención de
porcentajes de recuperación en concentrados
plaquetarios, índice de contaminación de
glóbulos rojo y blancos. (ver sección de
concentrados plaquetarios)

03/22/11
  Control de calidad diario de antisueros y
células de fenotipo conocido.
Pruebas pre-transfusionales para:
 Plasma
 Concentrado plaquetario.
 Crioprecipitado.
 Paquete globular.
 Sangre total. En un orden Social Eficaz,- y la
En un orden Social Eficaz,- y la
empresa debe serlo,- dicho orden
ha de conferir responsabilidades y
también atribuciones
a todos sus miembros
Drucker, 39
 Volumen sanguíneo obtenido:
 Obtener el peso promedio de la bolsa con anticoagulante y sin
aguja más las bolsas satélites.
 Pesar la BOLSA RECOLECTORA con sangre total y restarles el
peso del inciso (1).
 Relacionar el peso obtenido con la densidad para traducir a
mililitros el volumen sangrado
 1.057 gr/ml en varones
 1.053 gr/ml en mujeres
 Observar si la bolsa presenta:
 Defectos de fabricación
 La presencia de aire que no debe ser > 3 cm de diámetro
 Observar que esté bien sellado el tubo colector
 Revisar que no exista hemólisis
 Presencia de coágulos
 Color rojo característico
 Control de las centrífugas refrigeradas:
temperatura y revoluciones por minuto.
Tiempo de fraccionamiento y revoluciones para la
obtención de Plasma Rico en Plaquetas,
Concentrado Plaquetario y Crioprecipitados.
Volúmenes obtenidos en Paquete Globular,
Concentrado Plaquetario, Plasma y Crioprecipitado:
Número de plaquetas, pH y función plaquetaria en
Concentrados plaquetarios.
 Actividad del Factor VIII y Factor I en
crioprecipitados y/o en Plasma fresco congelado
total, en tanto que del Factor IX en plasma
desprovisto de Factor VIII.
 Práticas actuales para la manufactura de buenos
productos (current Good Manufacturing Practices,
GMP) de FDA
 ISO 9000 en la Comunidad Europea
 Asociación Americana de Bancos de Sangre (AABB)
 Comité Nacional de Normas de Laboratorio Clinico
(NCCLS)
 Demming, Juran, ODI, Premio Nacional de Calidad
Malcolm Baldrige
 Gemba Kaizen
 La acción incorrecta La acción correcta
ejecutada ejecutada
correctamente correctamente

La acción incorrecta La acción correcta

ejecutada ejecutada
incorrectamente incorrectamente
duti t cax E

Ejecución
 El problema identificado y corregido en el
sitio de trabajo: $1
 Identificado y corregido después de que
deja el sitio de trabajo, antes de que
alcanza al cliente:
 $10
 Identificado y corregido después de que
alcanza al cliente
$100
 Sangre es una droga sujeta al cGMP
(CFR21, parte 211)
 El personal debe ser entrenado y
competente (documentado por examen
de capacitación) antes de empezar el
trabajo
 Todos los procesos deben ser validados
 Mantenimiento preventivo y calibración
de los equipos
 Calificación del los proveedores
 Las etiquetas de sangre deben ser
controladas
 Todos los procedimientos deben estar
reglamentados (Standard Operating
Procedures)
 Todo debe documentarse por escrito
 Informes de errores y accidentes deben
ser investigados y rectificados
 Auditoría periódica de los sistemas
 Perfeccionamiento continuo
 El Departamento de Calidad esta
completamente separado del
Departamento de Producción
 El encargado de Calidad tiene la
autoridad de interrumpir producción
cuando procesos o productos no están de
acuerdo con especificaciones
 El producto no puede ser distribuido
antes de revisión y aprobación por el
departamento de Calidad
 Objetivo
› Ejemplo: para mejorar el proceso de
colección de muestras de pacientes
 Estudio y gráfico de flujo del proceso
 Definición de
› Puntos de control críticos (PCC)
› Elementos importantes (EI) que
preceden los PCC
› Verificación del sistema (medidas
cuantitativas)
 PCC
 La solicitud
 La identificación del enfermo
 Colección y transporte de la
muestra al banco de sangre
 Elementos importantes
› Nombre y apellido, numero de
identificación, cuarto, cama, etc..
› El tipo y cantidad de muestra
› Dia y hora de solicitud y de colección
› Firma de la enfermera o médico
› Prioridad
 Verificación
› Análisis de no. y fuente de errores
 Elementos importantes
› Pregunte el nombre del paciente antes de la
colección
› Verifique el apellido y no. en la pulsera del
paciente
› Verifique el apellido y no. en la solicitud, los
tubos de ensayo y la pulsera
› Use alternativas para identificación si es
necesario (paciente inconsciente)
 Verificación
› No. de pacientes con identificación
inadecuada, pabellón del hospital
› Observación directa de flebotomía
 El conjunto de procedimientos que
aseguran que un proceso, un
procedimiento, un sistema de
computación o un instrumento
desempeñan conforme especificaciones
pre-determinadas
 La verificación es realizada por los
fabricantes y por los usuarios. Se
examina el proceso entero para
documentar que los resultados deseados
son los resultados obtenidos
 Siempre que hay un cambio, los
sistemas deben ser revalidados
(agujas, computadoras,
etiquetas nuevas etc..)
 Validación debe incluir
situaciones críticas como
sobrecarga, apagón de
electricidad, ascensores mal
funcionando, onda de calor, etc.,
 Errores
son oportunidades para mejora
 Deben analizarse errores en detalle
› ¿Cuál fue la causa? ¿Podrían evitarse?
› ¿El proceso actual facilita la repetición?
› ¿Como evitar la repetición?
› ¿Debemos cambiar procedimientos?
¿Entrenamiento? ¿Equipo?
 Debemos analizar riesgos potenciales y
planear la investigación por adelantado
 Por ejemplo, cuando nosotros
participamos en los programas de
proficiencia
› Recibimos muestras para pruebas de
proficiencia regularmente
› Nosotros tenemos una norma para recibir
las muestras
› Pero...
 … en lugar de 100% correctos nosotros somos
sólo 40% correctos.
 ¡Una vergüenza! Sin embargo, la vergüenza no
es recibir una mala nota...
 Vergüenza es no haber analizado continuamente
los datos del laboratorio, los procesos y
tendencias para predecir el potencial para un
error
 ¡Vergüenza es no tener un plan escrito para
estudiar fracasos en programas de proficiencia
antes de que ellos pasen!
 El fraccionamiento o separación de los
componentes de la sangre se basa en el
principio de que los diferentes
componentes tienen diferentes pesos
específicos:
 Plasma : 1.026 gr/dl
Plaquetas: 1.058 gr/dl
Monocitos: 1.062 gr/dl
Linfocitos: 1.070 gr/dl
Neutrofilos: 1.082 gr/dl
Glóbulos rojos: 1.100 g/ml
 NOM p.30
 Volumen 450 ml ±10 % ( +
anticoagulante)
 Conservar entre +1ºC y +6ºC
 Vigencia máxima (como fresca) después
de la recolección: 6 hrs. Pasado ese
lapso se considerará SANGRE TOTAL.
(ST)
ANTICOAGULANTE VIGENCIA
DENSIDAD
 Heparina 48 hrs --
---
 ACD 21 días
1.02146 gr/dl
 CPD 21 días
1.02347 gr/dl
 CDPA -1 35 días
1.02610 gr/dl
 CPDA con manitol 45 días ---
----
 Pesos aproximados de las bolsas transfer
(Baxter). Incluyen 5 g del tubo colector, sin
aguja y sin anticoagulante.
 Bolsa cuádruple 116 g
 Bolsa triple 91 g
 Bolsa doble 66 g
 Bolsa sencilla (primaria) 40 g
 Bolsa satélite 24 g
 Densidad de sangre o de sus fracciones
sanguíneas
 Sangre de varón 1.057
g/ml
 Sangre de mujer 1.053
g/ml
 Concentrado eritrocitario 1.093 g/ml
 Plasma
1.028 g/ml
 Bolsa cuádruple (Baxter) = 116 g
 Con 67.5 ml de ACD.
D=P/V P=DXV
 Peso de 67.5 ml de ACD =(67.5)
(1.02146) = 68.9 g
 La bolsa de recolección más el
anticoagulante pesa:
 116 g + 69 g = 185 g
Si extraemos 405 a 495 ml de sangre:
 En varones: densidad de 1.057: 428 a 523 gr
 En mujeres: densidad de 1.053: 426.5 a 521.3
gr
 El peso bruto: Peso de la sangre+ peso del
anticoagulante + peso de la bolsa vacía.
 Rangos permitidos:
 Hombre: 613 a 708 gr
 Mujer: 611.5 a 700.3 gr
 Valores de referencia:450 ml +/- 10 %
 (405 ml a 495 ml)
 VNE = PB - ( pb+ pa) / D. de la sangre.
Donde: PB: peso bruto
pb: peso de la bolsa
pa: peso del anticoagulante
 Volumen sanguíneo total (VST)= Factor (peso
disponente)
Donde:
 hombre: 70 ml/kg
 mujer: 65 ml/kg
 Peso bruto = 680 g
 Varón de 75 kg
 VNE = 680 g - (116 + 69) / 1.057 = 468 ml
 VST= 70 ml/kg (75 kg) = 5250
 Volumen máximo de extracción al disponente:
450ml ± 10%
 Volumen (ml) Peso (g)
405 - 495 615 -715
 300 - 404 ml Usar solo el C E o dar de baja
toda la unidad.
 < 300 ml Dar de Baja
 Si < 6 hrs se puede fraccionar en 4.
 NOM p 31 Requisitos:
 Volumen : 180ml a 350 ml
 Temperatura de conservación : +1ºC a +6ºC
 Vigencia máxima : según el anticoagulante
 Caracteres especiales : ninguno
 Identificación de las unidades (etiqueta) y su
inspección física, es igual al de la sangre fresca
(total).
 Otras determinaciones que permiten evaluar la
calidad del concentrado eritrocitario:
 Cuantificación de Hb total del C.E. g/dl
 Hematocrito (%)
 Valores de referencia: 180 ml a 350 ml
 VN = (PB - pb p) / Densidad del C.E.
 Donde:
PB: Peso bruto
pb p: peso de bolsa primaria
Densidad CE: 1.093 gr/dl
 Cálculo del # eritrocitos / bolsa.
 Cálculo de plasma en ml / bolsa.
 Hemoglobina libre en ml de
plasma (mg / ml)
 Hemoglobina libre en bolsa ( mg /
bolsa)
 Ejemplo:
 Peso bruto del C.E. = 348 g
 C.E. Volumen neto = (PB -pb p)/ 1.093
 = 348 g - 40 g / 1.093 = 281.8 ml
 Hb (gr/dl)
 Hto (%)
 Leucocitos /µ
 Leucocitos totales= (Leucocitos/µ )
(1000)(VNCE)
 Observación de hemolisis en
microhematocrito
 Control Bacteriológico
 Coágulos
 Aire en la bolsa.
 Valores de referencia : 35 - 94 mg/dl
 100 - 230
mg/bolsa
 TECNICA
 Centrifugar el segundo tubo (que ha
permanecido intacto),3 min. a 3500 rpm
 Medir con una regla el paquete globular y
agregar un volumen igual de sol.salina.
 CALCULOS:
 Hb libre mg/ml = DOprob x conc Std
/ DOStd
 Hb libre / bolsa
=[ (GRT)x[Hb↑]pmg%]/100
 PESO BRUTO (gr) 354 - 457
 PESO NETO (gr) 321 - 426
 VOL. NETO (ml) 294 - 384
 Hb mg% 22.8 - 26.3
 Hto % 74.4 - 79.6
 GRT ml 227.2 - 394.6
 PLASMA ml 63 - 93
 Leucocitos/µ 5500 - 12 600
 Leucocitos totales (109) 1.9 - 4.0
 Hb ↑ mg% 35 - 94
 Hb ↑ mg/bolsa 99.8 - 228.8
 NOM p31
 Vol. Neto: 180-350 ml
 Temp. de conservación: +1ºC-+6ºC
 Hematocrito : 68-80 %
 Leucocitos eliminados: > 75 %.
 Eritrocitos recuperados: > 63%
 Vigencia máxima: 4 hrs. a partir de su
preparación
 Caracteres especiales: plasma ausente,
pobre en leucocitos y plaquetas
Antes: VN= [PB- pb p (40gr) ]/1.093
GRT= VN (Hto)/100
GBT= (GB/µ )(1000)(VN)
Después: VN = [PB-pb p(24gr) ]/1.093
Hb mg%
Hto(%)
GBT & GRT
 REQUIERE CONDICIONES ESTÉRILES
 Lavar el CE CON 250-350 ml de SSI, mezclar.
 Invertida la bolsa, centrifugar a 4ºC por 15
min. a 3500 rpm
 Transferir únicamente el CE a una bolsa
estéril de 300 ml que contenga 60-70 ml de
SSI.
 Mezclar el CE perfectamente y ayudados con
un rodillo mezclar la sangre del tubo
colector con el resto.
%recuperación de eritrocitos:
ml GR en CE lavado x 100/ml GR en CE

 %de leucocitos en el CE lavado:

leucos de CE lavado x 100/leucos en CE

 %eliminación de leucocitos:
100 - % de leucocitos presentes
 PESO BRUTO (gr)  260 - 340
 VN (ml)  218 - 286
 Hto%  68.5 - 79.5
 GRT  162 - 209
 SSI  47.5 - 87
 GB/µ  1063 - 1963
 GBTx109  0.42 - 0.52
 % GB  75.7 - 96.9
 % GR  635. - 83.7
RECUPERACION
 Volumen neto: 150-180 ml
 Proteínas: 60g/dl
 Factor VIII: 1 UI / ml
 Fibrinógeno: 160 mg/dl
 Temp. de conservación: -18ºC o menor
 Vigencia máxima: 12 meses (6 hrs.
una vez descongelado)
 Identificación y aspecto físico igual
que ST.
 NOM: p 32:
 Volumen: 150-180 ml
 Proteínas: 60 g/l
 Temp. de conservación: -18ºC o menor y
su vigencia máxima a partir de su
recolección será de 5 años. Otra opción:
 Temp. de conservación: +1ºC - +6ºC y su
vigencia máxima será: con ACD o CPD:
26 días; con CPDA 40 días
 NOM p 32: obtenidas por fraccionamiento de
sangre fresca a temperatura entre +18ºC y
24ºC.
 Volumen: 45 a 60 ml.
 Plaquetas/bolsa: 5.5 x 1010 (en el 75% o más
de las unidades al límite de su vigencia).
 pH: 6.0 (en el 75% o más de las unidades al
límite de su vigencia).
 Temperatura de conservación: +20ºC a
+24ºC y en agitación suave*.
 Vigencia máxima a partir de la recolección:
24 a 72 Hrs.*/
 CONCENTRADO PLAQUETARIO

 Identificación de las unidades: igual que

para sangre total pero agregando a la fecha
de caducidad la hora y en las condiciones de
almacenamiento, que éste debe ser de
+21ºC a +24ºC y con agitación suave.
 Otros estudios útiles:
› Inspección física
› Contaminación con eritrocitos y leucocitos
› Funcionalidad plaquetaria (retracción de
coágulo agregometría)
 VOLUMEN NETO =
 Pesobruto - Peso de la bolsa (satélite) /
1.028 (densidad del plasma)

 Valores de referencia = 45 a 60 ml
 USAR MATERIAL DE PLÁSTICO
 CUENTA DE PLAQUETAS
AUTOMATIZADA
 Hacer una dilución 1:6 con s.s.i. y
con pipeta automática.
 El resultado se multiplica por 6 para
tener plaquetas/ml
 Plaquetas/bolsa =
 Plaquetas/µ l x 1000 x vol. neto
 Cuenta de plaquetas manual: diluir 1:200 en
pipetas para rojos con oxalato de amonio al 1%
(0.5 a 101).
 Mezclar en agitador mecánico 2 a 3 min.
 Llenar ambos lados de la cámara de Neubauer.
 Dejar sedimentar 10 min en cámara húmeda
 Contar la quinta parte de la cuadrícula central.
 Tomar el promedio de ambos lados.
 Cálculos:
 Plaquetas/µ l =
plaquetas contadas x 5 x 10 x 200

 Plaquetas/bolsa =
plaquetas/µ l x 1000 x vol. neto

 Valores de Referencia:
› Plaquetas/µ l: no mnos de 1,000,000
› Plaquetas/bolsa: no menos de 5.5 x 1010
 CONTAMINACIÓN CON ERITROCITOS:
 Hacer una dilución 1:10 con SSI (1 a 11) en la
pipeta de blancos.
 Mezclar
 Cargar ambos lados de la cámara de Neubauer.
 Dejar sedimentar 5 min en cámara húmeda.
 Leer la cuadrícula central y sacar promedio.
 Cálculos:
› Eritrocitos / µ l = GR contados x 10 x 10
› Eritrocitos / bolsa = GR / µ l x 1000 x vol.
Neto

 Valores de referencia
› Eritrocitos / µ l = menos de 2000
› Eritrocitos / bolsa = menos de 0.1 x 109
 CONTAMINACIÓN CON LEUCOCITOS
 Hacer una dilución 1:10 con líquido de Turck
(1 a 11) en la pipeta de blancos.
 Mezclar
 Cargar ambos lados de la cámara de
Neubauer.
 Dejar sedimentar 5 min en cámara húmeda.
 Leer las cuatro cuadrículas de las esquinas,
sacar promedio de ambos lados.
 Cálculos:
› leucocitos / µ l: (céls contadas x 10 x 10) /
4
› leucocitos / bolsa = leucocitos / µ l x 1000
x vol neto

 Valores de referencia:
› leucocitos / µ l = menos de 2000
› leucocitos / bolsa = menos de 0.2 x 108
 RETRACCIÓN DEL COÁGULO:
 (Usar material de plástico)
 Tomar un pool de no menos de seis
disponentes varones (0.5 ml de citrato
de sodio al 3.8% + 4.5 ml de sangre).
 Centrifugar 10 min a 1500 rpm.
 Separar el plasma rico en plaquetas
(PRP) y hacer una cuenta de plaquetas.
 Recentrifugar los tubos y obtener plasma
pobre en plaquetas (PPP)
 CONCENTRADOS PLAQUETARIOS

 Ajustar las plaquetas del pool y del C.P. en estudio a

50,000 / µ l con PPP: EJEMPLO:
 C.P. = 1,200,000 plaquetas / µ l
 (1,200,000 / 50,000) -1 = 23
 Para tener cantidades adecuadas podemos diluir 100 µ l de
C.P. + 2,300 µ l de PPP o 50 µ l de C.P. + 1,150 µ l de PPP.
 Pipetear en cada uno de dos tubos de 13 x 100, 4.3 ml de
ssi.
 Agregar: 0.1 ml de tromboplastina.
0.5 ml plaquetas ajustadas a 50,000
0.1 ml de cloruro de calcio 0.1 M
 Mezclar e incubar 5 mins a 37ºC.
 Cuidadosamente desprender el
coágulo y medirlo (a).
Incubar una hora a 37ºC, medir
nuevamente el coágulo (b). Cálculos:
b x100 / a = X 100 - X = %
retracción
VALOR NORMAL : MAYOR DE 10 %
 NOM: p 33:
 Volumen: 10 a 25 ml
 Factor VIII: 80 UI
 Temp. conservación: -18ºC o menor
 Vigencia máxima: 12 meses (6 hrs una
vez descongelado)
 De acuerdo con la NOM se pueden mezclar tres
unidades (reconstituyendo con SSI).
 Requisitos:
 Peso bruto: 46 - 67 g*
 Volumen neto: 31 - 52 ml
 Factor VIII: UI / ml: 4.5 - 8.8 UI
 UI / crio: 191 - 336
 Fibrinógeno (opcional):100 - 350 mg/unidad
 Vigencia máxima: (NOM inciso 9.11) 12 meses (6
hrs una vez descongelado)
 NOM: p 32:

 Obtenido por centrifugación dentro de

las seis primeras horas de su
recolección.

 CONGELADO, si se congela dentro de

las seis primeras horas de su
recolección.